【摘要】：背景 癲癇是一種常見多發(fā)的以大腦神經(jīng)元異常放電引發(fā)突然短暫反復(fù)發(fā)作為特征的神經(jīng)系統(tǒng)疾病，嚴(yán)重威脅人類生命與健康。目前臨床上癲癇的治療主要依靠藥物療法，，但現(xiàn)有的藥物無(wú)法適用所有患者且毒副作用大。 瑞替加濱是唯一一個(gè)被FDA批準(zhǔn)上市的用于成人部分發(fā)作輔助治療的KCNQ鉀通道激動(dòng)劑藥物。KCNQ鉀通道在神經(jīng)興奮性調(diào)節(jié)中起著基礎(chǔ)而關(guān)鍵的作用，以瑞替加濱為代表的KCNQ激動(dòng)劑因而被寄予厚望，其抗癲癇作用機(jī)制被廣泛研究，但是目前已有的研究多為體外電生理記錄，而對(duì)與癲癇相關(guān)腦區(qū)（如海馬）神經(jīng)元電活動(dòng)的影響不清楚。 目的 建立穩(wěn)定的自由活動(dòng)動(dòng)物腦電信號(hào)采集系統(tǒng)，通過對(duì)自由活動(dòng)正常大鼠海馬神經(jīng)元電活動(dòng)的記錄分析，研究以瑞替加濱為代表的KCNQ鉀通道激動(dòng)劑對(duì)大鼠海馬神經(jīng)元放電的影響，探索該類化合物治療癲癇的神經(jīng)電生理作用機(jī)制，為發(fā)展新型抗癲癇藥物提供理論指導(dǎo)。 方法 本實(shí)驗(yàn)采用健康雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠（250-350g），行常規(guī)開顱手術(shù)，在海馬CA1區(qū)手術(shù)植入單電極2*4陣列，動(dòng)物術(shù)后常規(guī)護(hù)理，自由飲食，恢復(fù)7天。電生理記錄時(shí)，動(dòng)物處于自由活動(dòng)狀態(tài)，其腦部電極可穩(wěn)定記錄神經(jīng)元放電，且這種放電可持續(xù)存在1-2周。運(yùn)用多通道在體記錄系統(tǒng)，將前置放大器接于電極板，電信號(hào)傳輸進(jìn)入采集器，儲(chǔ)存于Recorder16系統(tǒng)，數(shù)據(jù)進(jìn)行離線分析。 運(yùn)用多通道在體記錄系統(tǒng)觀察瑞替加濱對(duì)自由活動(dòng)大鼠海馬神經(jīng)元的影響，實(shí)驗(yàn)時(shí)先穩(wěn)定記錄電信號(hào)10min，腹腔注射給予動(dòng)物15mg/kg瑞替加濱，再連續(xù)穩(wěn)定記錄和采集電信號(hào)360min。此外，觀察瑞替加濱能否反轉(zhuǎn)鉀通道抑制劑4-氨基吡啶（4-AP）或XE991導(dǎo)致的自由活動(dòng)大鼠海馬神經(jīng)元的興奮性升高，電信號(hào)采集方法同前，在腹腔注射給予4-AP（5mg/kg）電信號(hào)穩(wěn)定記錄20min后或XE991（10mg/kg）電信號(hào)穩(wěn)定記錄120min后，腹腔注射給予瑞替加濱15mg/kg，穩(wěn)定記錄360min。所有電信號(hào)均存儲(chǔ)于電腦中，采用Offline Sorter進(jìn)行離線分析。 結(jié)果 在我們實(shí)驗(yàn)室成功建立了基于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的腦電信號(hào)采集系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)了對(duì)自由活動(dòng)動(dòng)物腦電活動(dòng)的記錄。運(yùn)用這個(gè)系統(tǒng)，我們將海馬神經(jīng)元進(jìn)行分類并考察瑞替加濱對(duì)海馬神經(jīng)元放電的影響。我們發(fā)現(xiàn)大鼠腹腔注射15mg/kg瑞替加濱能顯著抑制海馬錐體神經(jīng)元與中間神經(jīng)元的自發(fā)放電。此外，同劑量瑞替加濱能翻轉(zhuǎn)鉀通道抑制劑4-AP (5mg/kg,0.2ml/100g)或XE991(10mg/kg,0.2ml/100g)導(dǎo)致的海馬神經(jīng)元興奮性升高。 結(jié)論 我們的工作首次采用自由活動(dòng)大鼠在體記錄方式考察KCNQ鉀通道激動(dòng)劑瑞替加濱對(duì)大鼠神經(jīng)元核團(tuán)放電的影響，發(fā)現(xiàn)該藥物對(duì)海馬錐體神經(jīng)元和中間神經(jīng)元的興奮性均有抑制作用，并可逆轉(zhuǎn)鉀通道抑制劑導(dǎo)致的興奮性升高，部分揭示了瑞替加濱治療癲癇的作用機(jī)制。
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圖片說(shuō)明： ptic drugon theBlockade ofsodiumchannelsBlockade ofcalciumchannelsInhibition ofglutamateexcitationIncrease inGABA levelActpothanarbital 1912 + + +azepine1963 +te 1974 +ntin 1993 +ate 1995 + + +ide 2005 + +ine 2011 替加濱抗癲癇作用機(jī)制研究癲癇藥物中，瑞替加濱（Retigabine，化學(xué)式見圖 1-1）是 2011 年品管理局批準(zhǔn)上市的用于成人部分發(fā)作性癲癇治療的 KCNQ 鉀通KCNQ 通道開放促進(jìn)鉀離子外流，胞外鉀離子增加導(dǎo)致細(xì)胞膜的低神經(jīng)元的興奮性，最終呈現(xiàn)抗癲癇效應(yīng)[30]。
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圖片說(shuō)明： 第 1 章 引言度的瑞替加濱對(duì)短時(shí)程去極化刺激產(chǎn)生的動(dòng)作電位沒有影響[32]。對(duì)海馬中經(jīng)元，瑞替加濱抑制動(dòng)作電位產(chǎn)生過強(qiáng)去極化的數(shù)量達(dá)到減少中間神經(jīng)元奮性[33]。從 17 個(gè)進(jìn)行手術(shù)病人取皮層切片，瑞替加濱能降低自發(fā)尖波的發(fā)數(shù)[34]。前人及本實(shí)驗(yàn)室的體外實(shí)驗(yàn)證明瑞替加濱可增強(qiáng)除 KCNQ1 外的所NQ 通道，并可以抑制神經(jīng)元放電（圖 1-2）[35]。V.Armand 報(bào)道在海馬切，瑞替加濱顯著性的減少 4-AP 所致海馬癲癇樣放電[36]。瑞替加濱對(duì)在膠細(xì)胞由 4-AP 誘導(dǎo)產(chǎn)生的興奮上有明顯鎮(zhèn)靜作用[37]。小鼠皮下給予 4-AP，明顯增加，前直強(qiáng)直，無(wú)序的奔跑[38,39]。有研究報(bào)道瑞替加濱能逆轉(zhuǎn) XE致的神經(jīng)細(xì)胞的發(fā)放[40]。另有研究報(bào)道瑞替加濱對(duì)神經(jīng)元 GABA 電流BA 的分泌也有增強(qiáng)作用[41]。
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R965

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 馮麗梅;夏桂枝;任榕娜;楊朋范;周琳瑛;梅珍;;兒童難治性癲vN致vN灶的病理改變[J];中國(guó)當(dāng)代兒科雜志;2013年05期

2 龔含嫣;張溥明;;多通道神經(jīng)信號(hào)分析方法及其應(yīng)用(英文)[J];生理學(xué)報(bào);2011年05期

本文編號(hào)：2515721