【摘要】：血管緊張素II(angiotensin II,Ang II)和降鈣素基因相關(guān)肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)在血管的損傷和保護中起重要作用。為了探討CGRP受體成分蛋白(receptor component protein,RCP)在CGRP和Ang II對血管平滑肌細胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)血管過氧化物酶1(vascular peroxidase-1,VPO1)表達調(diào)控中的作用及機制,本研究采用體外培養(yǎng)鼠源性A10血管平滑肌細胞株(A10VSMC),給予CGRP或/和Ang II刺激,并用小干擾RNA(si RNA)干擾細胞RCP基因的表達,Western Blot檢測RCP以及VPO1蛋白表達水平;RT-PCR檢測RCP及VPO1 m RNA的表達水平。結(jié)果顯示,在靜止期野生型A10VSMC,CGRP和Ang II能分別上調(diào)RCP和VPO1蛋白和m RNA表達(均P0.05),但CGRP預孵育細胞后,Ang II誘導的RCP和VPO1蛋白表達降低(均P0.05);與野生型組比較,VPO1在所有RCP基因干擾組的表達均顯著降低(均P0.01)。同時,在RCP基因干擾條件下,和對照組相比,CGRP處理組VPO1蛋白的表達顯著增加,而Ang II組沒有明顯變化;和Ang II組相比,CGRP與Ang II聯(lián)合作用顯著增加VPO1蛋白表達,但這種作用能被抗氧化酶Catalase所抑制(P0.05)。以上結(jié)果提示,RCP可能參與CGRP或Ang II誘導的VPO1蛋白表達;RCP可能在介導CGRP和Ang II受體共同調(diào)控VPO1表達的信號轉(zhuǎn)導整合中起一定作用。
[Abstract]:Angiotensin II (angiotensin II,Ang II) and calcitonin gene-related peptide (calcitonin gene-related peptide,CGRP) play an important role in vascular injury and protection. To investigate the role and mechanism of CGRP receptor protein (receptor component protein,RCP in regulating the expression of vascular peroxidase 1 (vascular peroxidase-1,VPO1) in vascular smooth muscle cells (vascular smooth muscle cell,VSMC) induced by CGRP and Ang II. In this study, mouse A10 vascular smooth muscle cell line (A10VSMC) was cultured in vitro and stimulated by CGRP or / and Ang II. The expression of RCP gene in small interfering RNA (si RNA) interfering cells was detected by, Western Blot. The expression of RCP and VPO1 protein was detected. The expression levels of RCP and VPO1 m RNA were detected by RT-PCR. The results showed that RCP and Ang II could up-regulate the expression of RCP and VPO1 protein and m-RNA respectively (P 0.05), but the expression of RCP and VPO1 protein induced by, Ang II decreased after preincubation with CGRP (P 0.05). Compared with the wild type group, the expression of VPO1 in all RCP gene interference groups was significantly decreased (all P 0.01). At the same time, under the condition of RCP gene interference, the expression of VPO1 protein in CGRP treated group was significantly higher than that in control group, but there was no significant change in Ang II group. Compared with Ang II group, the combination of CGRP and Ang II significantly increased the expression of VPO1 protein, but this effect was inhibited by antioxidase Catalase (P0.05). These results suggest that RCP may be involved in the expression of VPO1 protein induced by CGRP or Ang II, and RCP may play a role in the signal transduction integration mediated by CGRP and Ang II receptors that co-regulate the expression of VPO1.
【作者單位】： 南華大學藥物藥理研究所 湖南省分子靶標新藥研究協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】：supported by the National Natural Science Foundation of China(No.81173060) Hunan Province Cooperative Innovation Center for Molecular Target New Drug Study,China(No.2014-405)
【分類號】：R967

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