發(fā)布時間：2019-04-13 16:51

【摘要】：肺癌是最常見的肺原發(fā)性惡性腫瘤,也是發(fā)病率和死亡率增長最快,對人群健康和生命威脅最大的惡性腫瘤之一。絕大多數(shù)肺癌起源于支氣管黏膜的上皮細(xì)胞。目前臨床上吉西他濱是治療晚期非小細(xì)胞肺癌的一線藥物,但因其半衰期短需大劑量持續(xù)給藥維持體內(nèi)有效的藥用濃度。這種大劑量的給藥方式給患者帶來了很強(qiáng)的毒副作用,限制了其臨床效用。本課題旨在,利用肺癌細(xì)胞表面過表達(dá)的雌激素受體(Estrogen receptors,ER)與配體雌酮(Estrogen,ES)間的特異性高親和力,研制出一種新型以雌酮修飾的長效吉西他濱脂質(zhì)體制劑,以提高藥物對腫瘤的靶向性同時能夠?qū)崿F(xiàn)在體內(nèi)達(dá)到長效循環(huán)的效果。此外,本論文對該新型脂質(zhì)體制劑進(jìn)行了表征、體外靶向性、體外細(xì)胞毒及體內(nèi)抗腫瘤的研究。首先采用硫酸銨梯度法制備4種不同的吉西他濱脂質(zhì)體制劑,即吉西他濱普通脂質(zhì)體(L-GEM)、吉西他濱靶向脂質(zhì)體(ES-L-GEM)、吉西他濱長效脂質(zhì)體(SSL-GEM)和吉西他濱長效靶向脂質(zhì)體(ES-SSL-GEM)。然后分別對這四種脂質(zhì)體制劑進(jìn)行表征研究,通過透射電鏡對脂質(zhì)體形態(tài)進(jìn)行觀察,采用動態(tài)光散射粒徑分析儀測定粒徑大小、粒徑分布、多分散系數(shù)和Zeta電位,借助紫外可見分光光度計檢測吉西他濱脂質(zhì)體的包封率,并通過透析法檢測四種制劑儲存在4℃和25℃條件下于不同時間段的穩(wěn)定性。之后在熒光顯微鏡下觀察肺癌細(xì)胞A549對加載了羅丹明熒光染料(Rh B)的四種脂質(zhì)體制劑的攝取情況,以此驗(yàn)證長效靶向脂質(zhì)體的體外靶向作用。為探究A549細(xì)胞對長效靶向脂質(zhì)體的攝取機(jī)制,于吉西他濱脂質(zhì)體與細(xì)胞孵育前加入內(nèi)吞抑制劑:蔗糖、染料木黃酮、鹽酸阿米洛利等,并于熒光顯微鏡下觀察內(nèi)吞結(jié)果。最后采用MTT比色法對吉西他濱及所制備的的4種脂質(zhì)體制劑分別進(jìn)行細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn),以此觀察體外抗腫瘤作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯,成功制備出四種脂質(zhì)體制劑(L-GEM、ES-L-GEM、SSL-GEM、ES-SSL-GEM),粒徑約在120nm~130nm間,粒徑較為均一,PDI在0.1~0.2范圍內(nèi),脂質(zhì)體并帶有一定負(fù)電荷。吉西他濱長效靶向脂質(zhì)體的穩(wěn)定性顯著優(yōu)于吉西他濱靶向脂質(zhì)體和普通脂質(zhì)體,并且在4°C下保存至48h后吉西他濱長效靶向脂質(zhì)體制劑的滲漏率不超過10%。體外靶向性的研究結(jié)果證實(shí)ES-L-Rh B與ES-SSL-Rh B均對A549細(xì)胞具有主動靶向作用,且ES-SSL-Rh B具有長效作用。此外,除受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用外,巨胞飲介導(dǎo)的內(nèi)吞作用是長效靶向脂質(zhì)體進(jìn)入細(xì)胞的主要途徑。吉西他濱及所制備的這四種脂質(zhì)體對A549細(xì)胞的毒性作用由強(qiáng)到弱依次為:ES-SSL-GEM、SSL-GEM、ES-L-GEM、L-GEM、GEM,且ES-SSL-GEM的抗腫瘤效果顯著高于其他四種制劑,在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中也可以看出ES-SSL-GEM抗腫瘤效果是最好的。本課題在常規(guī)脂質(zhì)體中載入特異性識別雌激素受體的雌酮片段和長效PEG分子,成功研制出一種具有長循環(huán)和腫瘤特異性靶向特性的高效低毒的脂質(zhì)體載藥系統(tǒng),將這種載藥系統(tǒng)攜帶臨床上的一線抗肺癌用藥物吉西他濱,針對有高表達(dá)雌激素受體的非小細(xì)胞肺癌進(jìn)行各種研究,發(fā)現(xiàn)這種吉西他濱長效靶向脂質(zhì)體能夠延長藥物在體內(nèi)的作用時間,藥物對腫瘤細(xì)胞的殺傷作用隨著濃度和時間的增加而提高,其靶向性也可顯著增強(qiáng)其對腫瘤的定位作用并降低了毒副作用,有較高的臨床價值。希望本論文所制備的吉西他濱長效靶向脂質(zhì)體在不久的將來可以有效的應(yīng)用于肺癌的臨床治療。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R943;R96

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 黃壽吾,王昆,黃復(fù)生;新型脂質(zhì)體的研究進(jìn)展[J];食品與藥品;2005年07期

2 李春雨;李超英;;眼用載藥脂質(zhì)體研究進(jìn)展[J];河北北方學(xué)院學(xué)報;2006年01期

3 索緒斌;鄧英杰;張涵;王玉強(qiáng);;月桂酰吲達(dá)帕胺脂質(zhì)體的制備及其質(zhì)量控制[J];中國新藥雜志;2007年18期

4 董佳;楊陽;高春生;;脂質(zhì)體作為眼科給藥載體的應(yīng)用[J];中國新藥雜志;2009年06期

5 王倩;張敏靜;張卉;蘇志堅(jiān);項(xiàng)琪;黃亞東;;酸性成纖維細(xì)胞生長因子脂質(zhì)體的制備及體外釋藥動力學(xué)[J];中國藥科大學(xué)學(xué)報;2010年03期

6 高媛媛;張維農(nóng);;脂質(zhì)體的制備與檢測方法研究進(jìn)展[J];武漢工業(yè)學(xué)院學(xué)報;2010年03期

7 劉夢嬌;符華林;付強(qiáng);張艷麗;盧朝成;周濤;曹航;金超;羅莉;周建瑜;;硫酸頭孢喹肟脂質(zhì)體的制備工藝[J];過程工程學(xué)報;2013年05期

8 黃何松;龔偉;張慧;鄭肖利;梅興國;;重酒石酸長春瑞濱熱敏脂質(zhì)體的制備及其包封率測定方法研究[J];中國藥學(xué)雜志;2010年16期

9 鄭杭生;黃繩武;徐蓮英;;全緣千里光堿脂質(zhì)體及其凝膠劑的體外釋藥比較研究[J];中成藥;2013年09期

10 張代平;楊義雄;;脂質(zhì)體制劑的研究概況[J];海峽藥學(xué);2006年06期

相關(guān)會議論文 前10條

1 車曉平;趙小偉;李衛(wèi)敏;;脂質(zhì)體在皮膚局部給藥系統(tǒng)中的應(yīng)用[A];2007中藥藥物創(chuàng)新與制藥關(guān)鍵技術(shù)研討會暨中華中醫(yī)藥學(xué)會中藥化學(xué)中藥制劑學(xué)術(shù)會議論文集[C];2007年

2 張碧華;杜守穎;;脂質(zhì)體應(yīng)用研究及其在天然藥物領(lǐng)域的探索[A];現(xiàn)代化中藥制劑發(fā)展與中藥藥理學(xué)研究交流會論文集[C];2009年

3 王振華;王玉蓉;;脂質(zhì)體表面電荷的研究進(jìn)展[A];2009全國中藥創(chuàng)新與研究論壇學(xué)術(shù)論文集[C];2009年

4 程冀;季宇彬;王向濤;;脂質(zhì)體載藥方法的研究進(jìn)展[A];中藥飲片質(zhì)量分析與中藥鑒別技術(shù)交流研討會論文集[C];2009年

5 翟光喜;;脂質(zhì)體制劑的研究與應(yīng)用[A];第十二屆山東省藥劑學(xué)術(shù)會議論文集[C];2006年

6 湯連升;賈慶文;薛云;徐孫環(huán);;脂質(zhì)體類藥物非臨床評價注意事項(xiàng)[A];2013年（第三屆）中國藥物毒理學(xué)年會暨藥物非臨床安全性評價研究論壇論文摘要[C];2013年

7 湯連升;賈慶文;薛云;徐孫環(huán);;脂質(zhì)體類藥物非臨床評價注意事項(xiàng)[A];中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志(2013年6月第27卷第3期)[C];2013年

8 王志龍;趙云英;李富桂;;脂質(zhì)體應(yīng)用研究進(jìn)展[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會2010年學(xué)術(shù)年會——第二屆中國獸醫(yī)臨床大會論文集(下冊)[C];2010年

9 張峰;鄔曉剛;金曉國;鮑恩泉;;脂質(zhì)體在中藥領(lǐng)域中的應(yīng)用研究進(jìn)展[A];2009年中國藥學(xué)大會暨第九屆中國藥師周論文集[C];2009年

10 柴棟;林雅艷;王睿;;抗菌藥物新劑型——脂質(zhì)體的研究近況及發(fā)展前景[A];第十屆全國化療藥理暨抗感染藥理高峰論壇資料匯編[C];2010年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 國家知識產(chǎn)權(quán)局專利局醫(yī)藥生物發(fā)明審查部 許磊　樓杜鵑 王晶晶 張志聰;從專利角度看醫(yī)藥領(lǐng)域脂質(zhì)體的發(fā)展[N];中國知識產(chǎn)權(quán)報;2011年

2 劉汝偉 本報記者 丁秀玉;脂質(zhì)體藥物的工業(yè)化生產(chǎn)不再是我國的一個技術(shù)瓶頸![N];科技日報;2012年

3 白毅;沈陽藥大脂質(zhì)體研究成效突出[N];中國醫(yī)藥報;2005年

4 本報記者 賀延芳;如何為中國的“生物導(dǎo)彈”精準(zhǔn)制導(dǎo)？[N];中國知識產(chǎn)權(quán)報;2011年

5 沈陽藥科大學(xué)藥學(xué)系 吳翠栓 賈士聰;皮膚局部用脂質(zhì)體制劑的研究進(jìn)展[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2001年

6 記者　白毅;沈陽藥大頻出新成果[N];中國醫(yī)藥報;2006年

7 記者 章迪思;高難高精“藥物小車”中國也能造[N];解放日報;2009年

8 林峰;脂質(zhì)體阿霉素新藥臨床研究立項(xiàng)863計劃[N];科技日報;2005年

9 莊愉;緩釋多囊脂質(zhì)體制劑技術(shù)[N];中國醫(yī)藥報;2002年

10 徐錚奎;具有劃時代意義的新制劑[N];中國醫(yī)藥報;2003年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 索緒斌;體溫敏感吲達(dá)帕胺緩釋脂質(zhì)體凝膠劑的研究[D];沈陽藥科大學(xué);2005年

2 李正榮;四醚脂質(zhì)體作為口服載體的研究[D];上海交通大學(xué);2010年

3 李春雷;利用共溶劑體系制備脂質(zhì)體和油相制劑的新技術(shù)及其應(yīng)用研究[D];沈陽藥科大學(xué);2004年

4 吳燕;鹽酸表阿霉素長循環(huán)熱敏脂質(zhì)體與復(fù)方脂質(zhì)體的研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2008年

5 王文喜;脂質(zhì)體表面的高聚物修飾與細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)[D];浙江大學(xué);2011年

6 黃怡菲;兩種抗腫瘤藥物靶向脂質(zhì)體的制備與評價[D];華中科技大學(xué);2012年

7 孟凡旭;輻射敏感性載藥脂質(zhì)體的制備及其抗腫瘤作用研究[D];吉林大學(xué);2012年

8 郝艷麗;鹽酸拓?fù)涮婵灯胀�、長循環(huán)及溫度敏感脂質(zhì)體的研究[D];沈陽藥科大學(xué);2005年

9 金葉;銀杏葉提取物類脂質(zhì)體成型工藝及體外細(xì)胞攝取、轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制的研究[D];吉林大學(xué);2012年

10 王暉;腎上腺素納米柔性脂質(zhì)體透皮給藥對跨區(qū)皮瓣成活的影響[D];中南大學(xué);2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 宋鶴梁;一種骨靶向溫敏脂質(zhì)體的制備與研究[D];西南交通大學(xué);2015年

2 游利江;酸敏脂質(zhì)體的制備和體外性質(zhì)研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

3 陳丹;新型樣品前處理技術(shù)在藥物制劑復(fù)雜基質(zhì)中的研究與應(yīng)用[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

4 左甜甜;RGD介導(dǎo)多西他賽pH敏感脂質(zhì)體的合成、制備、表征及體內(nèi)外抗腫瘤活性評價[D];山東大學(xué);2015年

5 劉珍;二氧化硅/殼聚糖修飾茶多酚納米脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)和生物利用性[D];南昌大學(xué);2015年

6 袁菊;蜂膠黃酮脂質(zhì)體的制備及免疫增強(qiáng)作用的研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

7 歐陽雪;雌二醇脂質(zhì)體鼻用原位凝膠的研制[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

8 李姝影;吳茱萸堿脂質(zhì)體的制備和體內(nèi)外評價[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2015年

9 樊菊香;靶向左氧氟沙星脂質(zhì)體的制備及其抗耐藥菌作用的研究[D];東南大學(xué);2015年

10 張正;吉西他濱長效靶向脂質(zhì)體的制備及其抗腫瘤作用研究[D];吉林大學(xué);2016年

，

本文編號：2457762