【摘要】：目的探討雷公藤甲素誘導人急性T淋巴細胞白血病Jurkat細胞凋亡分子機制。方法 MTT檢測雷公藤甲素對Jurkat細胞的增殖抑制作用,然后用Origin Pro8計算出IC50。按照0、2、4、8、16 nmol/L濃度雷公藤甲素處理Jurkat細胞48 h,然后用流式細胞儀檢測細胞凋亡變化。用半定量RT-PCR法檢測加藥處理后各組Np9基因m RNA的表達水平變化并用Kodak 1D 3.6軟件對條帶進行定量分析。采用統(tǒng)計軟件分析Np9轉錄抑制與細胞凋亡的相關性。Western Blotting檢測Np9下游信號分子c-myc,β-catenin,ERK,AKT和Notch1蛋白的變化。結果雷公藤甲素呈劑量依賴性抑制Jurkat細胞的增殖,其IC50為12.7 nmol/L。雷公藤甲素呈劑量依賴誘導Jurkat細胞凋亡。進一步實驗研究結果顯示,雷公藤甲素呈劑量依賴方式抑制Jurkat細胞中Np9基因的m RNA的轉錄水平。經(jīng)統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)Np9轉錄抑制與細胞凋亡之間具有顯著的相關性(R2=0.907)。Western Blotting方法結果發(fā)現(xiàn)雷公藤甲素在抑制Np9 m RNA轉錄同時伴有其下游信號分子c-myc,β-catenin,ERK,AKT和Notch1蛋白表達水平降低。結論下調HERV-K Np9 m RNA及其下游信號分子c-myc,β-catenin,ERK,AKT和Notch1蛋白水平是雷公藤甲素誘導人急性T淋巴細胞白血病Jurkat細胞凋亡的重要分子機制之一。
[Abstract]:Objective to investigate the molecular mechanism of triptolide induced apoptosis in human acute T lymphocyte leukemia (Jurkat) cells. Methods MTT was used to detect the inhibitory effect of triptolide on the proliferation of Jurkat cells, and then IC50. was calculated by Origin Pro8. The Jurkat cells were treated with triptolide for 48 h according to the concentration of triptolide 816 nmol/L, and then apoptosis was detected by flow cytometry. The expression level of m RNA of Np9 gene in each group was detected by semi-quantitative RT-PCR method. The band was quantitatively analyzed by Kodak 1D3.6 software. The changes of c-myc, 尾 -catenin,ERK,AKT and Notch1 proteins in the downstream signal molecules of Np9 were detected by. Western Blotting analysis of the correlation between Np9 transcription suppression and apoptosis by statistical software. Results triptolide inhibited the proliferation of Jurkat cells in a dose-dependent manner, and its IC50 was 12.7 nmol/L.. Triptolide induced apoptosis of Jurkat cells in a dose-dependent manner. Further experimental results showed that triptolide inhibited the transcription of m RNA of Np9 gene in Jurkat cells in a dose-dependent manner. Statistical analysis showed that there was a significant correlation between Np9 transcription inhibition and apoptosis (R2O0.907). Western Blotting method). The results showed that triptolide inhibited the transcription of Np9 m RNA with its downstream signaling molecules c-myc, 尾-catenin,ERK,. The expression of AKT and Notch1 protein decreased. Conclusion the down-regulation of HERV-K Np9 m RNA and its downstream signaling molecules c-myc, 尾-catenin,ERK,AKT and Notch1 proteins is one of the important molecular mechanisms of triptolide inducing apoptosis in Jurkat cells of human acute T lymphocyte leukemia.
【作者單位】： 浙江大學醫(yī)學院附屬第二醫(yī)院血液科;
【基金】：國家自然科學基金(81270601,81470306)~~
【分類號】：R96

【共引文獻】

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2 李e，

本文編號：2300145