發(fā)布時(shí)間：2018-08-15 16:33

【摘要】：目的探討β2糖蛋白I(β2GPI)免疫小鼠引起的輔助性T(Th)細(xì)胞分化和抗β2GPI抗體產(chǎn)生的機(jī)制。方法將健康的BALB/c小鼠隨機(jī)分為生理鹽水組和β2GPI免疫組,每隔2周由尾靜脈注射β2GPI或等量生理鹽水,共注射2次或4次。采用間接ELISA檢測小鼠血清中抗β2GPI抗體的效價(jià);實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)檢測小鼠脾臟細(xì)胞GATA結(jié)合蛋白3(GATA3)、白細(xì)胞介素4(IL-4)、表達(dá)于T細(xì)胞的T盒(T-bet)、γ干擾素(IFN-γ)、Foxp3的mRNA水平;流式細(xì)胞術(shù)檢測小鼠脾臟淋巴細(xì)胞中GATA3陽性細(xì)胞和Foxp3陽性細(xì)胞的比例。結(jié)果 2次免疫后,小鼠血清中出現(xiàn)高效價(jià)(1∶100 000)的抗β2GPI抗體,脾臟中Th2特異性指標(biāo)GATA3、IL-4的mRNA水平和GATA3陽性細(xì)胞比例相對(duì)生理鹽水組升高。4次免疫后,小鼠血清中抗β2GPI抗體效價(jià)進(jìn)一步升高(1∶100 000),脾臟GATA3、Th1細(xì)胞特異性標(biāo)志物(T-bet、IFN-γ)和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞特異性標(biāo)志Foxp3的mRNA水平下調(diào),IL-4的mRNA水平和2次免疫后無明顯差異。此外,脾臟細(xì)胞中GATA3陽性細(xì)胞的比例進(jìn)一步上調(diào)且伴有Foxp3陽性細(xì)胞比例的下調(diào)。結(jié)論β2GPI免疫小鼠引起Th細(xì)胞向Th2細(xì)胞優(yōu)勢(shì)分化,并伴有Th1細(xì)胞和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的抑制,有利于抗β2GPI抗體的產(chǎn)生。
[Abstract]:Objective to investigate the mechanism of 尾 2 glycoprotein I (尾 2GPI) immunized T (Th) cells differentiation and anti 尾 2GPI antibody production in mice. Methods healthy BALB/c mice were randomly divided into normal saline group and 尾 2GPI immunized group. 尾 2GPI or the same amount of normal saline were injected into caudal vein every 2 weeks for 2 or 4 times. The titer of anti 尾 2GPI antibody in mouse serum was detected by indirect ELISA, and the levels of GATA binding protein 3 (GATA3), interleukin 4 (IL-4), T box (T-bet) and interferon 緯 (IFN- 緯) Foxp3 were detected by real-time quantitative PCR (qRT-PCR). The proportion of GATA3 positive cells and Foxp3 positive cells in spleen lymphocytes of mice was detected by flow cytometry. Results after two doses of immunization, a high titer (1: 100,000) anti-beta 2GPI antibody was found in the serum of mice. The level of mRNA and the proportion of GATA3 positive cells in the spleen of the mice were increased by 4 times compared with the normal saline group, the specific index of Th2 in the spleen was GATA3 + IL-4. The titer of anti 尾 2GPI antibody in serum of mice was further increased (1: 100 000). There was no significant difference between the two immunizations. The specific markers of spleen GATA3 and Th1 cells (T-bett1 IFN- 緯) and the mRNA level of regulatory T cell specific marker Foxp3 down-regulated the mRNA level of IL-4. In addition, the proportion of GATA3 positive cells in spleen cells was further up-regulated and down-regulated with Foxp3 positive cells. Conclusion 尾 2GPI immunized mice induce the dominant differentiation of Th cells into Th2 cells, accompanied by the inhibition of Th1 cells and regulatory T cells, which is beneficial to the production of anti 尾 2GPI antibodies.
【作者單位】： 江蘇大學(xué)醫(yī)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81370614)
【分類號(hào)】：R965

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本文編號(hào)：2184779