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基于微透析、高效液相色譜及微順序注射檢測大鼠、小鼠血液中的氧氟沙星

發(fā)布時間:2018-04-17 18:48

  本文選題:氧氟沙星 + 微透析。 參考:《新疆師范大學》2017年碩士論文


【摘要】:目的:氧氟沙星作為喹諾酮類藥物,具有廣譜抗菌的特點,對多數(shù)細菌都具有較強的抗菌活性,臨床用藥較為廣泛。該藥為手性藥物,但目前的報道均以消旋體對其進行評估,而未對該藥進入體內(nèi)的兩種對映異構(gòu)體進行探討和研究,使得評估過低或過高,對合理用藥及人體健康帶來安全隱患。因此,對該藥的研究已經(jīng)成為化學及醫(yī)藥學領域的研究熱點與關注焦點。本研究旨在探索建立檢測氧氟沙星外消旋體、兩種對映異構(gòu)體的高效液相色譜法及基于荷移反應結(jié)合微透析-微順序注射檢測氧氟沙星含量的方法,為氧氟沙星在臨床上合理使用提供理論依據(jù),為實現(xiàn)氧氟沙星的在線檢測提供技術支持。方法:采用微透析取樣技術,結(jié)合高效液相色譜法檢測大鼠血液中氧氟沙星含量;以硫酸銅/D-苯丙氨酸溶液為手性流動相添加劑,建立高效液相色譜法,檢測給藥氧氟沙星后的小鼠血液及各組織中兩種對映異構(gòu)體的含量及分布;基于氧氟沙星與氯冉酸發(fā)生荷移反應,結(jié)合微透析-微順序注射-閥上實驗室檢測大鼠血液中氧氟沙星的含量。結(jié)果:(1)建立了反相高效液相色譜法測定大鼠血液中氧氟沙星含量的方法,在0.025μg/m L~3.200μg/m L濃度范圍內(nèi),氧氟沙星含量與峰面積呈良好的線性關系(r=0.9996),日內(nèi)精密度實驗RSD分別為1.10%、0.60%和0.39%(高、中、低濃度),日間精密度RSD分別為1.31%、0.97%和0.49%,檢出限為0.025μg/m L,并優(yōu)化測定探針體外回收率的條件,最終確定灌流流速為1μL/min,溫度為37℃,且在9h內(nèi)探針穩(wěn)定性良好;(2)建立了測定小鼠血液及各組織中氧氟沙星兩種對映異構(gòu)體含量的手性高效液相色譜法,在0.1~12.8μg/m L濃度范圍內(nèi),左氧氟沙星與右氧氟沙星的濃度與峰面積的線性關系良好,相關系數(shù)分別為r=0.9995和r=0.9997,精密度實驗結(jié)果顯示RSD值均小于15%,左氧氟沙星與右氧氟沙星平均提取回收率值在85.16%~94.12%(高、中、低濃度),且小鼠空白血漿及空白試劑在其出峰位置無干擾;(3)利用荷移反應可增強熒光強度的原理,結(jié)合微透析-微順序注射-閥上實驗室技術建立了氧氟沙星含量的檢測方法,結(jié)合微順序注射-閥上實驗室系統(tǒng)中多功能流通池模塊,氧氟沙星溶液用量50μL,氯冉酸溶液的最佳濃度20μg/mL、用量50μL,檢測流速20μL/s,延遲時間0s,在5μg/mL~30μg/m L濃度范圍內(nèi),氧氟沙星的濃度與熒光強度呈現(xiàn)良好的線性關系(r=0.9994),精密度實驗RSD介于2.62%~4.73%之間;檢出限為2μg/m L。結(jié)論:本研究建立了三種檢測生物樣品中氧氟沙星含量的方法,方法專屬性好,符合生物樣品分析方法要求,為氧氟沙星的臨床用藥與在線檢測提供了參考依據(jù)、奠定了實踐基礎。
[Abstract]:The aim of this study was to establish a HPLC method for the determination of ofloxacin in blood of rats . The average recovery rate of ofloxacin and levofloxacin was 85.16 % 锝,

本文編號:1764826

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