發(fā)布時(shí)間：2018-03-15 03:25

  本文選題：十六烷酸　切入點(diǎn)：PC細(xì)胞　出處：《中國(guó)藥學(xué)雜志》2015年13期 　論文類(lèi)型：期刊論文

【摘要】：目的研究十六烷酸對(duì)谷氨酸損傷PC12細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用。方法將PC12細(xì)胞分為7組:正常對(duì)照組,二甲基亞砜溶劑對(duì)照組,模型對(duì)照組(25 mmol·L-1谷氨酸),陽(yáng)性藥物對(duì)照組(7μmol·L-1尼莫地平或10μmol·L-1MK801)以及十六烷酸組(1、10、100μmol·L-1)。噻唑藍(lán)法驗(yàn)證十六烷酸對(duì)谷氨酸損傷PC12細(xì)胞保護(hù)作用;乳酸脫氫酶比色法、臺(tái)盼藍(lán)染色法檢測(cè)不同濃度十六烷酸對(duì)谷氨酸損傷PC12細(xì)胞膜通透性變化的影響;AO/EB、Hoechst熒光染色法觀察PC12細(xì)胞凋亡的形態(tài)。FITC-Annexin V/PI熒光標(biāo)記流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率。Western blot法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)Bcl-2、Bax、GluR1蛋白表達(dá)。結(jié)果噻唑藍(lán)、臺(tái)盼藍(lán)染色計(jì)數(shù)、細(xì)胞上清液中乳酸脫氫酶含量顯示:與谷氨酸模型組相比,十六烷酸能明顯改善谷氨酸損傷PC12細(xì)胞的活力,減少細(xì)胞膜通透性;AO/EB熒光染色顯示谷氨酸損傷后,模型對(duì)照組可見(jiàn)大部分細(xì)胞經(jīng)AO染色后核染色質(zhì)部分呈現(xiàn)濃染,十六烷酸各組僅出現(xiàn)少數(shù)被EB染成橘紅色的細(xì)胞;Hocehst熒光染色顯示,與模型組相比十六烷酸組細(xì)胞核發(fā)出藍(lán)色熒光較弱。十六烷酸能上調(diào)Bcl-2蛋白表達(dá),抑制Bax蛋白表達(dá);并能抑制谷氨酸導(dǎo)致的谷氨酸受體的過(guò)度表達(dá)。結(jié)論十六烷酸對(duì)谷氨酸損傷PC12細(xì)胞凋亡具有保護(hù)作用,該保護(hù)與抑制谷氨酸受體蛋白NMDA、Bax蛋白的表達(dá)的增加,上調(diào)Bcl-2蛋白表達(dá)等有關(guān)。
[Abstract]:Objective to study the protective effect of hexadecanoic acid on apoptosis of PC12 cells injured by glutamate. Methods PC12 cells were divided into 7 groups: normal control group and dimethyl sulfoxide solvent control group. Model control group (25 mmol 路L -1 glutamate), positive drug control group (7 渭 mol 路L -1 nimodipine or 10 渭 mol 路L -1 MK801) and cetanoic acid group 100 渭 mol 路L -1. Thiazolyl blue assay was used to verify the protective effect of hexadecanoic acid on PC12 cells injured by glutamate. Effects of different concentrations of hexadecanoic acid on the permeability of PC12 cell membrane induced by glutamic acid by trypan blue staining the morphology of PC12 cell apoptosis was observed by AOP / EBX Hoechst fluorescence staining. FITC-Annexin V / Pi fluorescence flow cytometry was used to detect apoptosis rate. Western blot. Methods to detect the expression of Bcl-2OBax-GluR1 protein in cells. Results thiazolyl blue, thiazolyl blue, and thiazolyl blue were detected. Trypan blue staining and lactate dehydrogenase content in cell supernatant showed that cetanoic acid could significantly improve the viability of glutamate injured PC12 cells and reduce cell membrane permeability after glutamate injury. In the model control group, most of the cells showed strong staining after AO staining, and only a few cells stained with EB in the cetanoic acid group showed Hocehst fluorescence staining. Compared with the model group, the cetanoic acid group had weaker blue fluorescence. Cetane acid could up-regulate the expression of Bcl-2 protein and inhibit the expression of Bax protein. Conclusion hexadecanoic acid has a protective effect on the apoptosis of PC12 cells injured by glutamate, which protects and inhibits the increase of the expression of glutamate receptor protein NMDA-Bax protein. Upregulation of Bcl-2 protein expression and so on.
【作者單位】： 新安醫(yī)學(xué)省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;安徽省中醫(yī)藥科學(xué)院中藥藥效與安全性評(píng)價(jià)研究所;安徽中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81374005) 十二五科技支撐計(jì)劃資助項(xiàng)目(2012BAI26B03) 安徽省第五批優(yōu)秀青年科技基金資助項(xiàng)目(10040606Y17) 2013年度安徽省學(xué)術(shù)及技術(shù)帶頭人及后備人選科研活動(dòng)經(jīng)費(fèi)資助項(xiàng)目
【分類(lèi)號(hào)】：R96

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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