本文選題：補體　切入點：補體旁路激活　出處：《貴州大學》2016年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的:研究綠原酸及其代謝產(chǎn)物咖啡酸和阿魏酸對補體旁路激活導致人微血管內(nèi)皮細胞炎癥反應中相關粘附分子表達的干預作用。方法:采用眼鏡蛇毒因子(CVF)激活血清補體旁路,激活產(chǎn)物作用于人微血管內(nèi)皮細胞,分別取多個時間點細胞培養(yǎng)上清,采用ELISA方法檢測ICAM-1、IL-6、IL-8、t-PA、PAI-1的含量,MTT法篩選多個不同濃度的綠原酸、咖啡酸、阿魏酸對內(nèi)皮細胞活力的影響,以確定合適的實驗濃度,采用對細胞活力無影響的綠原酸、咖啡酸、阿魏酸濃度預處理內(nèi)皮細胞,檢測細胞培養(yǎng)上清中ICAM-1、IL-6、IL-8、t-PA、PAI-1的含量,對細胞活力有影響的濃度,進一步研究對內(nèi)皮細胞的損傷情況。結果:補體旁路途徑的激活物作用于微血管內(nèi)皮細胞后,導致內(nèi)皮細胞活化,引起細胞上清中ICAM-1、IL-6、IL-8、t-PA、PAI-1的濃度上調(diào)。0.1、0.5 mmol·L-1的綠原酸、咖啡酸、阿魏酸對細胞活力沒有影響,1.0、3.0、5.0 mmol·L-1綠原酸、咖啡酸、阿魏酸組對細胞活力有明顯的抑制作用。50、100、250μmol·L-1的綠原酸、咖啡酸、阿魏酸可下調(diào)ICAM-1、IL-6、IL-8的表達。而大于1.0 mmol·L-1綠原酸、咖啡酸、阿魏酸可導致細胞形態(tài)明顯改變,細胞收縮,間隙變大,LDH釋放在24 h時間點明顯增加,各實驗組的凋亡細胞比例明顯升高。結論:50、100、250μmol·L-1的綠原酸、咖啡酸、阿魏酸對炎癥反應有干預作用。而大于1.0 mmol·L-1的綠原酸、咖啡酸、阿魏酸可以造成內(nèi)皮細胞損傷,引起內(nèi)皮細胞凋亡。
[Abstract]:Objective: to study the effect of Lv Yuan acid and its metabolites caffeic acid and ferulic acid on the expression of associated adhesion molecules in inflammatory response of human microvascular endothelial cells induced by complement bypass activation. Huoxue Qing complement bypass, The supernatant of human microvascular endothelial cells (MECs) was cultured at different time points. The contents of IL-6, IL-8 and PAI-1 were detected by ELISA assay. The effects of different concentrations of Lv Yuan, caffeic acid and ferulic acid on the activity of endothelial cells were screened by MTT assay. In order to determine the appropriate experimental concentration, the endothelial cells were pretreated with the concentration of Lv Yuan, caffeic acid and ferulic acid, which had no effect on the cell viability. The concentration of ICAM-1, IL-6, IL-8 and PAI-1 in the supernatant of the cell culture was detected, and the concentration of the cell viability was determined. Results: after the activator of complement bypass pathway acted on microvascular endothelial cells, the endothelial cells were activated, and the concentration of ICAM-1, IL-6, IL-8 and PAPI-1 in the supernatant was up-regulated by the concentration of #number0# mmol 路L -1 Lv Yuan and caffeic acid in the supernatant. Ferulic acid had no effect on cell viability. The effects of caffeic acid, caffeic acid and ferulic acid on the cell viability were significant. 50 ~ 100 渭 mol 路L ~ (-1) Lv Yuan acid, caffeic acid, ferulic acid could down-regulate the expression of ICAM-1 IL-6IL-6IL-8, but more than 1.0 mmol 路L ~ (-1) Lv Yuan acid, caffeic acid, and ferulic acid could inhibit the expression of ICAM ~ (-1) IL-6IL-8, which was more than 1.0 mmol 路L ~ (-1) Lv Yuan acid, caffeic acid, and ferulic acid. Ferulic acid could obviously change the cell morphology, shrink the cells, increase the release of LDH at 24 h, and increase the proportion of apoptotic cells in each experimental group. Conclusion: the ratio of Lv Yuan and caffeic acid at #number0# 渭 mol 路L ~ (-1) is 100 渭 mol 路L ~ (-1). Ferulic acid could interfere with inflammatory reaction, while Lv Yuan, caffeic acid and ferulic acid more than 1.0 mmol 路L ~ (-1) could cause endothelial cell damage and induce endothelial cell apoptosis.
【學位授予單位】：貴州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R96

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本文編號：1596529