本文關(guān)鍵詞： 超聲微泡 N-甲基-D-天冬氨酸 人參皂苷Rg1 視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞 保護(hù)作用　出處：《湖北中醫(yī)藥大學(xué)》2014年博士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

【摘要】：研究背景:青光眼是一組威脅和損害視神經(jīng)視覺(jué)功能，以視神經(jīng)萎縮和視野缺損為共同特征的一種疾病，是主要致盲眼病之一，其病情非常兇險(xiǎn)，危害性極大，發(fā)病很迅速，世界衛(wèi)生組織已將其列為第二位致盲眼病[1]，通過(guò)激光、藥物、手術(shù)，降低眼壓是目前治療青光眼的主要方法之一。目標(biāo)是盡可能減少眼壓增高和眼壓波動(dòng)導(dǎo)致的視功能的損害，然而單純降低眼壓并不能阻止青光眼導(dǎo)致的進(jìn)行的視神經(jīng)損害，視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞（retinal ganglion cells,RGCs)和視神經(jīng)的損傷也很可能由其他病理機(jī)制導(dǎo)致。在祖國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中，青光眼屬于“五風(fēng)內(nèi)障”范圍，晚期亦可屬于“青盲”、“視瞻昏渺”等范圍。其基本病機(jī)是由于風(fēng)火上攻頭目，，或氣郁生火、脾濕生痰、痰火上攻造成肝郁化火、肝膽火熾、痰火上擾、陰偏盛或陽(yáng)偏盛、氣機(jī)瘀滯等諸種原因，導(dǎo)致氣血失和、經(jīng)脈失利，目中玄府閉阻，血瘀氣滯，瘀滯神水、目系失養(yǎng)發(fā)為此病。病位主要在肝，涉及腎、脾。中醫(yī)藥治療青光眼主要以清火、解郁、活血、利水、祛風(fēng)、開(kāi)竅、理氣、通絡(luò)，后期以滋補(bǔ)肝腎、疏肝解郁等法為主[2]。與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為的由于機(jī)械性損傷、缺血性損傷導(dǎo)致的氧化損傷等因素致使視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞不斷死亡及視神經(jīng)軸突不斷減少基本一致[3]。全球青光眼藥物治療的最新研究熱點(diǎn)—視神經(jīng)保護(hù)，即通過(guò)藥物或其他方法使那些還沒(méi)有受損的或者僅輕度受損的，甚至正處于毒性?xún)?nèi)環(huán)境瀕臨死亡的RGCs得到存活或繼續(xù)延長(zhǎng)生存時(shí)間；然而在臨床上，現(xiàn)有的視神經(jīng)保護(hù)藥物的治療效果卻非常不理想，究其原因可能是藥物在視網(wǎng)膜、視神經(jīng)局部有效濃度低吸收差，導(dǎo)致療效不佳。目前視神經(jīng)保護(hù)藥物主要通過(guò)口服、靜脈注射和肌肉注射給藥，均是通過(guò)全身循環(huán)后才能到達(dá)眼部組織，不但無(wú)法達(dá)到有效的治療濃度，也增加了藥物所帶來(lái)的全身毒副作用。因此尋求一種讓神經(jīng)保護(hù)藥物更為有效、局部應(yīng)用于RGCs和視神經(jīng)的新型給藥方式，成為了臨床治療的急迫需求。直接應(yīng)用于RGCs和視神經(jīng)的新型給藥方式將會(huì)被臨床所接受。 目的當(dāng)今青光眼治療還未攻克的核心難點(diǎn)是視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的凋亡導(dǎo)致視神經(jīng)的損害。目前臨床治療的給藥方式存在藥效不顯著及全身毒副作用大的缺點(diǎn)。隨著生物技術(shù)應(yīng)用的迅速發(fā)展，臨床上靶向釋放藥物的新技術(shù)—超聲微泡，即通過(guò)藥物體內(nèi)定位釋放技術(shù)，不僅能顯著降低藥物用量，減輕藥物的毒副作用，同時(shí)能提高病灶區(qū)域內(nèi)的藥物濃度，延緩藥物釋放、減少給藥次數(shù)，用藥準(zhǔn)確從而增強(qiáng)治療效果。研究已證實(shí)白蒺藜皂苷（gross saponins from Tribulus terrestris L，GSTT）與注射用鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子（Mouse Nerve Growth Factor for Injection,mNGF）能明顯減少視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡增強(qiáng)其存活，對(duì)治療視神經(jīng)損害起到一定的作用。本課題擬首次開(kāi)發(fā)一種新型超聲微泡介導(dǎo)的眼科局部給藥系統(tǒng)，同時(shí)研究人參皂苷Rg1（Ginsenoside Rg1）對(duì)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的影響。本研究通過(guò)體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，及體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，應(yīng)用安全及適宜的超聲聲強(qiáng)、輻照時(shí)間、微泡濃度，研究超聲破壞微泡介導(dǎo)藥物對(duì)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的抗凋亡機(jī)制。該給藥系統(tǒng)和三種藥物單劑的應(yīng)用，能有效提高視網(wǎng)膜局部的藥物濃度，用量準(zhǔn)確，減少全身毒副作用，延緩或阻止青光眼視神經(jīng)損害的發(fā)生及發(fā)展，給青光眼患者帶來(lái)更有效的治療，降低其致盲率，延緩病情惡化，為患者復(fù)明帶來(lái)新的希望。 方法 1.新生Sprague-Dawley大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞（RGCs）體外原代培養(yǎng)與純度鑒定。 2.研究N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）對(duì)大鼠原代視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞（RGCs）細(xì)胞凋亡的影響。通過(guò)四唑鹽（MTT）比色法檢測(cè)定細(xì)胞存活率：①測(cè)定不同濃度的NMDA（1000μM、100μM、10μM）對(duì)RGCs細(xì)胞存活率的影響，選擇NMDA造模濃度。②按照步驟①選定的NMDA濃度，通過(guò)四唑鹽（MTT）比色法測(cè)定細(xì)胞在30min、24h、48h三個(gè)不同時(shí)間點(diǎn)的存活率。 3.白蒺藜皂苷、注射用鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子、人參皂苷Rg1三種藥物對(duì)NMDA誘導(dǎo)的大鼠原代視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞損傷的保護(hù)作用。篩選白蒺藜皂苷（10-5μg/ml、10-4μg/ml、10-3μg/ml、10-2μg/ml）、注射用鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子（6×10-2μg/ml、8×10-2μg/ml、10×10-2μg/ml、12×10-2μg/ml）、人參皂苷Rg1（100μg/ml、101μg/ml、102μg/ml、103μg/ml）三種藥物對(duì)抗RGCs凋亡的最佳有效藥物濃度。計(jì)算細(xì)胞存活率的同時(shí)確定這三種藥物對(duì)RGCs保護(hù)的最佳質(zhì)量濃度（實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞存活率相對(duì)最高者所對(duì)應(yīng)的三種藥物質(zhì)量濃度)。 4.正常兔眼玻璃體腔注射人參皂苷Rg1的視網(wǎng)膜、視神經(jīng)安全性研究。健康新西蘭大白兔12只，隨機(jī)分為4組，每組3只（6眼）。實(shí)驗(yàn)組分組如下：A組正常對(duì)照組玻璃體腔內(nèi)注射0.9%生理鹽水0.1ml；B組玻璃體腔注射低劑量（0.05mg/kg）人參皂苷Rg1，C組玻璃體腔注射中劑量（0.5mg/kg）人參皂苷Rg1，D組玻璃體腔注射高劑量（2.5mg/kg）人參皂苷Rg1。于注藥后1周、2周、4周分別行行為學(xué)觀察，Accupen手持式眼壓計(jì)每日測(cè)量眼壓，用裂隙燈顯微鏡,直接檢眼鏡,眼部B超、眼前段照相、眼底照相、OCT活體觀察兔眼眼前節(jié)和眼底變化情況，4周后空氣栓塞處死新西蘭大白兔，取視網(wǎng)膜、視神經(jīng)行光學(xué)顯微鏡和透射電鏡觀察視網(wǎng)膜、視神經(jīng)組織形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)。玻璃體腔注藥每隔3天用藥一次，共28天,第28d處死兔子取材。 5.兔眼玻璃體腔注射人參皂苷Rg1后觀察經(jīng)超聲輻照微泡干預(yù)和未經(jīng)超聲輻照微泡干預(yù)，同一時(shí)間點(diǎn)不同眼組織內(nèi)藥物濃度的比較及同一眼組織中不同時(shí)間點(diǎn)的藥物濃度比較。健康新西蘭大白兔48只，實(shí)驗(yàn)組分組如下：左眼玻璃體腔注射(2.5mg/kg)人參皂苷Rg10.1ml，右眼玻璃體腔注射(2.5mg/kg)人參皂苷Rg10.1ml后注入(45μg/ml)聲諾維0.1ml，注射完畢后閉合兔眼涂耦合劑，置超聲探頭于眼球上方立即用頻率1MHZ，聲強(qiáng)為0.5W/cm2照射眼球60s，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)6只新西蘭大白兔，于注藥后30min、1h、2h、3h、4h、6h、12h、24h采用空氣栓塞處死兔,分別取房水、玻璃體、視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜、視神經(jīng)組織進(jìn)行高效液相色譜法的檢測(cè)。 6.超聲靶向擊破微泡介導(dǎo)視神經(jīng)保護(hù)藥物治療青光眼性視神經(jīng)損害的實(shí)驗(yàn)研究。采用前房注射0.3%復(fù)方卡波姆溶液建立兔慢性高眼壓視神經(jīng)損害動(dòng)物模型。健康新西蘭大白兔24只，隨機(jī)分為8組：1空白對(duì)照組（玻璃體腔內(nèi)注射0.9%生理鹽水0.1ml）、2高眼壓模型組（不做處理）、3高眼壓模型組+玻璃體腔注射人參皂苷Rg1組（玻璃體腔內(nèi)注射0.1ml人參皂苷Rg1溶液）、4高眼壓模型組+玻璃體腔注射mNGF組（玻璃體腔內(nèi)注射0.1mlmNGF溶液）、5高眼壓模型組+玻璃體腔注射人參皂苷Rg1+超聲組（玻璃體腔內(nèi)注射0.1ml人參皂苷Rg1溶液后給予聲強(qiáng)為0.5W/cm2的輻照60s）、6高眼壓模型組+玻璃體腔注射mNGF+超聲組（玻璃體腔內(nèi)注射0.1mlmNGF溶液后給予聲強(qiáng)為0.5W/cm2的輻照60s）、7高眼壓模型組+玻璃體腔注射GSTT+超聲+微泡組（玻璃體腔內(nèi)分別注射0.1ml人參皂苷Rg1溶液和0.1ml微泡混懸液，然后給予聲強(qiáng)為0.5W/cm2的輻照60s）、8高眼壓模型組+玻璃體腔注射mNGF+超聲+微泡組（玻璃體腔內(nèi)分別注射0.1mlmNGF溶液和0.1ml微泡混懸液，然后給予聲強(qiáng)為0.5W/cm2的輻照60s）。各組處理每隔3天一次，共28天,于注藥后1周、2周、4周分別行行為學(xué)觀察，Accupen手持式眼壓計(jì)測(cè)量眼壓，用裂隙燈顯微鏡,眼部B超、眼前段照相，活體觀察兔眼眼前節(jié)變化情況，4周后空氣栓塞處死兔，取兔視網(wǎng)膜和視神經(jīng)，行兔視網(wǎng)膜病理切片、光鏡測(cè)量視網(wǎng)膜厚度、視網(wǎng)膜和視神經(jīng)透射電鏡檢測(cè)、檢測(cè)視網(wǎng)膜內(nèi)NO、MDA、SOD的含量。 結(jié)果 1.成功建立了簡(jiǎn)便易行的新生SD大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞（RGCs）體外原代培養(yǎng)方法。獲得了較為純化的RGCs，免疫細(xì)胞化學(xué)法顯示RGCs的純度為90%以上，該方法培養(yǎng)的RGCs體外存活時(shí)間可達(dá)5d。 2. NMDA可誘導(dǎo)大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡。NMDA誘導(dǎo)RGCs損傷后，細(xì)胞發(fā)生凋亡還是死亡，主要取決于NMDA的濃度，本實(shí)驗(yàn)在體外培養(yǎng)RGCs中加入NMDA(100μM)30min，體外模擬視神經(jīng)損傷后的微環(huán)境，四唑鹽（MTT）比色試驗(yàn)檢測(cè)凋亡細(xì)胞數(shù)，證實(shí)100μM的NMDA能成功誘導(dǎo)RGCs發(fā)生凋亡。NMDA對(duì)于體外培養(yǎng)的大鼠RGCs的興奮性毒性作用為劑量依賴(lài)性，加入10μM、100μM、1000μM NMDA30min后，RGCs的存活率分別為91.46%、64.74％、50.02%。濃度達(dá)到100μM及以上時(shí)與正常對(duì)照組RGCs的存活率比較有明顯差異(P0.05)。加入100μM NMDA分別作用30min、24h、48h的存活率分別為63.3%、55.19%、46.98%，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，RGCs的存活率顯著下降；伴隨劑量加大，時(shí)間延長(zhǎng)，RGCs的存活率也隨之下降。因此，選擇100μM作用30min進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。 3.人參皂苷Rg1可抑制NMDA誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡，促進(jìn)體外培養(yǎng)的RGCs的存活，保護(hù)視網(wǎng)膜神經(jīng)元。四唑鹽（MTT）比色試驗(yàn)顯示，經(jīng)NMDA處理30min的RGCs細(xì)胞存活率均有下降，加藥組細(xì)胞存活率均較NMDA損傷組提高，其中10-4μg/ml GSTT+NMDA組，8×10-2μg/ml mNGF+NMDA組,102μg/ml人參皂苷Rg1+NMDA組，相對(duì)于其它劑量組均能提高細(xì)胞存活率。三種藥物均能促進(jìn)體外視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的存活，具有顯著的視神經(jīng)保護(hù)作用。 4.正常對(duì)照組和不同藥物劑量實(shí)驗(yàn)組兔眼前后節(jié)未見(jiàn)明顯異常，玻璃體腔內(nèi)未見(jiàn)明顯炎性混濁，視網(wǎng)膜未見(jiàn)脫離等并發(fā)癥。正常對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組光學(xué)顯微鏡觀察視網(wǎng)膜組織形態(tài)和透射電鏡觀察視網(wǎng)膜、視神經(jīng)超微結(jié)構(gòu)均未見(jiàn)明顯異常改變。通過(guò)行為學(xué)、眼前節(jié)、眼底、眼部B超及組織學(xué)結(jié)果均證實(shí)，玻璃體腔注射不同濃度的（0.05mg/kg、0.5mg/kg和2.5mg/kg）人參皂苷Rg1，對(duì)兔眼視網(wǎng)膜、視神經(jīng)無(wú)明顯毒副作用，是安全的。5.單純玻璃體腔注藥組和玻璃體腔注藥后經(jīng)超聲輻照微泡干預(yù)組，兩種不同方法兔眼玻璃體腔注射人參皂苷Rg1后24h內(nèi),除各組玻璃體中人參皂苷Rg1含量呈梯度下降,峰值時(shí)間為15min,其余眼部組織(房水、視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜、視神經(jīng))人參皂苷Rg1含量呈正態(tài)曲線變化。其達(dá)峰值時(shí)間為房水及眼內(nèi)壁組織視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜先達(dá)峰值,均為3h,而眼外壁組織達(dá)峰值時(shí)間較晚,視神經(jīng)為4h。將單純玻璃體腔注藥組和玻璃體腔注藥后經(jīng)超聲輻照微泡干預(yù)組兔眼各組織人參皂苷Rg1達(dá)峰值含量進(jìn)行比較,經(jīng)超聲輻照微泡干預(yù)組各組織人參皂苷Rg1峰值含量均明顯高于單純玻璃體腔注藥組,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01)，說(shuō)明玻璃體腔注射藥物經(jīng)超聲輻照微泡干預(yù)后較單純玻璃體腔注藥能夠在眼內(nèi)各組織達(dá)到高的藥物濃度。將各組各球壁組織人參皂苷Rg1峰值含量進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)玻璃體腔注射人參皂苷Rg1眼部各組織含量分布為玻璃體＞視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜＞視神經(jīng)＞房水。除外玻璃體內(nèi)因直接注射人參皂苷Rg1導(dǎo)致高藥物濃度，視網(wǎng)膜、視神經(jīng)為最能獲得理想藥物含量的組織，因此玻璃體腔注射人參皂苷Rg1是保證眼后節(jié)疾病治療，特別是視網(wǎng)膜神經(jīng)保護(hù)作用藥物濃度的有效方法。超聲輻照微泡在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步提高了藥物利用度。 6.兔眼前房注射0.3%復(fù)方卡波姆溶液是一種較好的慢性高眼壓模型制作方法，成功建立了青光眼性視神經(jīng)視網(wǎng)膜損害模型。兔視網(wǎng)膜光鏡形態(tài)學(xué)觀察：1組兔視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞呈單層排列，細(xì)胞大小不一，輪廓不規(guī)則，核深染，細(xì)胞邊界清晰，細(xì)胞排列整齊緊密，分層清楚；2組模型組兔視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)目明顯減少，各層結(jié)構(gòu)疏松，排列紊亂，層間分界不清晰，視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層呈大量空泡樣改變，部分細(xì)胞嚴(yán)重變性，出現(xiàn)核溶解、核染色淺淡、胞漿染色淺淡，核結(jié)構(gòu)稀疏，核仁固縮及偏位，胞質(zhì)染色質(zhì)邊集，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腫脹，線粒體腫脹，嵴消失，空泡變性。3、4、5、6組兔視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)目相對(duì)減少，兔視網(wǎng)膜各層結(jié)構(gòu)相對(duì)完整，排列輕度紊亂，分層相對(duì)清晰，可見(jiàn)散在空泡樣變的細(xì)胞；7、8組視網(wǎng)膜各層結(jié)構(gòu)較完整，排列較整齊，形態(tài)大致正常，內(nèi)外核層出現(xiàn)少量細(xì)胞丟失，局部有輕度空泡樣改變。光鏡測(cè)量兔視網(wǎng)膜厚度，各組兔視網(wǎng)膜厚度的差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；2組兔視網(wǎng)膜厚度明顯薄于1組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；3、4、5、6組兔視網(wǎng)膜厚度明顯厚于2組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；7、8組兔視網(wǎng)膜厚度明顯明顯厚于3、4、5、6組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。兔視網(wǎng)膜超微結(jié)構(gòu)觀察：1組正常視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞核呈類(lèi)圓形，RGC細(xì)胞核膜清晰，染色均勻，核仁明顯，內(nèi)、外核層核染色質(zhì)顏色清晰，分布均勻，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體等細(xì)胞器形態(tài)正常，細(xì)胞膜完整，感光細(xì)胞排列整齊。2組模型組感光細(xì)胞線粒體不同程度腫脹、空泡樣變；內(nèi)、外核層結(jié)構(gòu)紊亂；RGC數(shù)目減少，腫脹色淡。3、4、5、6組RGC胞核內(nèi)充滿(mǎn)均勻、色淺淡的常染色質(zhì)，感光細(xì)胞排列稍有紊亂，線粒體未見(jiàn)明顯腫脹及空泡樣變，內(nèi)核層少數(shù)細(xì)胞染色質(zhì)邊集，部分核稍有變形，核染色質(zhì)略顯稀疏，顏色稍淡，線粒體輕度空泡變性，可見(jiàn)線粒體嵴，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)僅見(jiàn)輕度腫脹。7、8組視網(wǎng)膜神經(jīng)元未見(jiàn)明顯壞死及凋亡，RGC染色質(zhì)分布均勻，核仁明顯，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)基本正常，線粒體改變不明顯，光感受器的外節(jié)盤(pán)膜排列整齊，未見(jiàn)明顯溶解。兔視神經(jīng)超微結(jié)構(gòu)觀察：1組正常兔視神經(jīng)纖維粗細(xì)不等,髓鞘完整，排列緊密、規(guī)則,呈“發(fā)絲”狀，軸突外表光滑,包繞軸突的髓鞘板層致密,視神經(jīng)髓鞘完整,軸漿均勻,軸漿內(nèi)可見(jiàn)清晰的正常微管、微絲和橢圓形的線粒體；2組模型組神經(jīng)纖維普遍發(fā)生病變,可見(jiàn)軸索消失,髓鞘排列紊亂,節(jié)段性松解、溶解、萎縮成團(tuán)或脫髓變性,膠質(zhì)增生明顯，微管和神經(jīng)微絲結(jié)構(gòu)消失，線粒體腫脹、空泡變性；3、4、5、6組視神經(jīng)髓鞘相對(duì)不規(guī)整，部分髓鞘變薄、疏松呈“洋蔥皮”狀，軸突內(nèi)微管和微絲腫脹，但不消失，部分線粒體空泡變性；7、8組視神經(jīng)髓鞘排列相對(duì)致密，髓鞘完整、規(guī)則,無(wú)脫髓鞘現(xiàn)象，可見(jiàn)微管、微絲，軸突結(jié)構(gòu)接近正常。兔視網(wǎng)膜組織內(nèi)NO、MDA、SOD含量的檢測(cè)：2組兔視網(wǎng)膜NO、MDA的含量較1組明顯升高，SOD活性較1組明顯降低，比較有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。3、4、5、6、7、8組NO、MDA的含量較2組明顯降低，SOD活性較2組明顯升高，比較有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。 結(jié)論SD大鼠RGCs體外培養(yǎng)成功，且RGCs較純化，是一種較理想的細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ�。NMDA對(duì)RGCs具有興奮性毒性作用，可誘導(dǎo)RGCs凋亡；白蒺藜皂苷、注射用鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子及人參皂苷Rg1具有對(duì)抗NMDA誘導(dǎo)的RGCs凋亡，保護(hù)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞，增強(qiáng)其活性的作用；玻璃體腔注射2.5mg/kg的人參皂苷Rg1，對(duì)兔眼視網(wǎng)膜、視神經(jīng)無(wú)明顯毒副作用，是安全的。兔前房注射復(fù)方卡波姆溶液是一種較理想的兔高眼壓造模方法。復(fù)方卡波姆誘發(fā)的兔青光眼模型具有引起眼壓中度、穩(wěn)定升高，持續(xù)時(shí)間長(zhǎng),方法簡(jiǎn)單,易于操作和控制等優(yōu)點(diǎn)，可用于對(duì)青光眼性視神經(jīng)視網(wǎng)膜損害的研究及對(duì)抗青光眼藥物的研究,是一種較理想的兔青光眼模型。超聲靶向破壞微泡能靶向釋放藥物，增強(qiáng)藥物到達(dá)眼部的濃度，超聲擊破微泡介導(dǎo)視神經(jīng)保護(hù)藥物人參皂苷Rg1和mNGF治療高眼壓兔視網(wǎng)膜、視神經(jīng)損害是有效的。超聲微泡介導(dǎo)視神經(jīng)保護(hù)藥物通過(guò)改變視網(wǎng)膜內(nèi)NO、MDA、SOD的表達(dá)量對(duì)高眼壓兔視神經(jīng)損害發(fā)揮保護(hù)作用。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：湖北中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R965

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 武勁圓;王萬(wàn)輝;;睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子對(duì)大鼠急性高眼壓視神經(jīng)損害的保護(hù)作用[J];山西醫(yī)藥雜志;2006年04期

2 柳鵬,李勇;人參皂甙生物活性的研究進(jìn)展[J];中國(guó)生育健康雜志;2004年05期

3 李國(guó)棟;袁援生;游志鵬;;異搏定對(duì)大鼠缺血再灌注損傷后視網(wǎng)膜內(nèi)caspase-3表達(dá)的影響[J];實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志;2007年01期

4 方慶;陸衛(wèi)華;趙智剛;程青;鄔明;劉非凡;李小平;楊劍虹;唐忠志;;人參皂苷Rg1對(duì)大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的保護(hù)作用[J];實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志;2011年09期

5 王慶捷;任利群;童嘉毅;陳龍;;超聲微泡在心血管疾病治療領(lǐng)域應(yīng)用的研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代醫(yī)學(xué);2011年02期

6 杜秀娟;劉金華;錢(qián)道衛(wèi);鄧秋瓊;雷丹青;;蛇毒神經(jīng)生長(zhǎng)因子對(duì)體外培養(yǎng)鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的保護(hù)作用[J];眼科新進(jìn)展;2007年09期

7 侯俊英,王秀華,李紅,楊世杰;蒺藜皂苷對(duì)缺血再灌注損傷心肌細(xì)胞的保護(hù)作用[J];中國(guó)藥理學(xué)通報(bào);2004年04期

8 楊新光,李健民;高眼壓缺血-再灌注中視網(wǎng)膜NOS的表達(dá)及L-NAME對(duì)其表達(dá)的影響[J];眼科研究;2002年01期

9 石晶明,蔣幼芹,劉旭陽(yáng);N-甲基-D-天門(mén)冬氨酸對(duì)大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層神經(jīng)元的損傷作用[J];眼科研究;2003年05期

10 王振軍;;單味中藥及其有效成分保護(hù)青光眼視神經(jīng)作用機(jī)制的研究進(jìn)展[J];醫(yī)藥導(dǎo)報(bào);2011年01期

本文編號(hào)：1536397