本文關(guān)鍵詞： CDKs 分子模擬 細(xì)胞周期 吡唑 硫脲 抗腫瘤　出處：《南京大學(xué)》2014年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：細(xì)胞周期是細(xì)胞生命活動(dòng)的重要環(huán)節(jié),細(xì)胞周期調(diào)控的失調(diào)與細(xì)胞癌變密切相關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)多種CDK(周期素依賴性蛋白激酶)在腫瘤組織中都處于失調(diào)狀態(tài)；究其原因,可能是由于CDK和Cyclin基因處于高表達(dá)狀態(tài)或者CDK抑制因子失活造成的。因此,選擇性的抑制腫瘤細(xì)胞中的CDK活性可能是控制腫瘤增殖的一條有效途徑�，F(xiàn)在農(nóng)藥及醫(yī)藥界對(duì)越來越多的硫脲結(jié)構(gòu)的化合物也給予了極大的關(guān)注；此外,吡唑類衍生物具有良好的抗癌活性已被報(bào)道許久,根據(jù)活性疊加的原理,我們將吡唑和硫脲結(jié)構(gòu)進(jìn)行有機(jī)結(jié)合并設(shè)計(jì)了一系列含硫脲結(jié)構(gòu)的吡唑類衍生物,并推測此類化合物具有良好的抗癌活性。為了進(jìn)一步驗(yàn)證上述推測,我們借助于計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)技術(shù),運(yùn)用Discovery studio分子對(duì)接軟件對(duì)我們設(shè)計(jì)的批量的吡唑類衍生物進(jìn)行篩選。本實(shí)驗(yàn)根據(jù)分子對(duì)接軟件的篩選結(jié)果,設(shè)計(jì)合成了20個(gè)新型的含硫脲的吡唑類衍生物(6a-10d),采用元素分析、1H-NMR、13C-NMR、MS分析等手段對(duì)所有化合物進(jìn)行表征并確定其結(jié)構(gòu)；其中,通過單晶X-射線結(jié)構(gòu)分析確定了化合物7a的三維空間結(jié)構(gòu)。因?yàn)檫@20個(gè)化合物均沒有活性方面的報(bào)道,我們用MTT法測試了所有化合物對(duì)3株腫瘤細(xì)胞A549,H460和MCF-7抗增殖活性,結(jié)果顯示多數(shù)化合物表現(xiàn)出良好的抗腫瘤活性：其中化合物10b活性最好,對(duì)A549的半數(shù)抑制率(IC50值)僅為0.75μM；遠(yuǎn)優(yōu)于陽性化合物Olomoucine的130.00μM。根據(jù)上述的抗增值活性數(shù)據(jù)我們初步總結(jié)了化合物的構(gòu)效關(guān)系,即發(fā)現(xiàn)與硫脲骨架相連的供電子取代基表現(xiàn)出強(qiáng)的抗增值活性。為進(jìn)一步驗(yàn)證此構(gòu)效關(guān)系,采用Elisa法測試了部分化合物對(duì)周期素依賴性蛋白激酶的抑制活性,酶抑制活性結(jié)果顯示具有較高抗腫瘤增值活性的化合物l0b同樣具有最好的CDKs抑制活性(ICso值為25 nM),故而推測目標(biāo)化合物10b的抗增值活性可能是通過抑制CDKs的活性表現(xiàn)出來的。與此同時(shí),流式實(shí)驗(yàn)結(jié)果也顯示出化合物10b在體外可強(qiáng)烈誘導(dǎo)A549阻滯于細(xì)胞周期G1期,進(jìn)一步證實(shí)了目標(biāo)化合物10b具有良好的生物活性,其可能是一類具有較好研究前景的先導(dǎo)化合物。
[Abstract]:Cell cycle is an important part of cell life. The imbalance of cell cycle regulation is closely related to cell carcinogenesis. Many kinds of CDK (cyclin dependent protein kinase) have been found to be disordered in tumor tissues. The reason may be due to the high expression of CDK and Cyclin genes or the inactivation of CDK suppressor. Selective inhibition of CDK activity in tumor cells may be an effective way to control tumor proliferation. In addition, pyrazole derivatives with good anticancer activity have been reported for a long time, according to the principle of activity superposition. We combined pyrazole with thiourea structure and designed a series of pyrazole derivatives containing thiourea structure and speculated that these compounds had good anticancer activity. We use computer-aided drug design techniques. Discovery studio molecular docking software was used to screen the batch of pyrazole derivatives designed by us. The results of this experiment were based on the results of molecular docking software. Twenty new pyrazole derivatives containing thiourea were designed and synthesized. The 1H-NMR-13C-NMR spectra were analyzed by elemental analysis. All the compounds were characterized and their structures were determined by MS analysis. Among them, the three-dimensional spatial structure of compound 7a was determined by single crystal X-ray structure analysis, because none of the 20 compounds were active. The antiproliferative activities of all the compounds against three tumor cell lines A549 H460 and MCF-7 were tested by MTT assay. The results showed that most of the compounds showed good antitumor activity: the activity of compound 10b was the best, and the IC50 of A549 was only 0.75 渭 m; Far better than the positive compound Olomoucine 130.00 渭 M. according to the above anti-value-added activity data, we preliminarily summarized the structure-activity relationship of the compound. It was found that the electron donor group attached to the thiourea skeleton showed strong anti-increment activity. The inhibitory activity of some compounds on cyclin dependent protein kinase was measured by Elisa method. The result of enzyme inhibitory activity showed that the compound 10b with high anti-tumor increment activity also had the best CDKs inhibitory activity (ICso = 25 nm). Therefore, we speculate that the anti-increment activity of target compound 10b may be expressed by inhibiting the activity of CDKs. The results of flow cytometry also showed that compound 10b could strongly induce A549 to block in G1 phase of cell cycle in vitro, which further confirmed that the target compound 10b had good biological activity. It may be a kind of leading compounds with good research prospect.
【學(xué)位授予單位】：南京大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R914.5

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前9條

1 韓寒;梁遠(yuǎn)軍;魏曉莉;許笑宇;劉克良;;α-鹵代丁二酰氧肟酸類基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑的合成及活性評(píng)價(jià)[J];高等學(xué)�；瘜W(xué)學(xué)報(bào);2009年01期

2 鄒淑愛;魏廣田;崔小邢;;器官培養(yǎng)在維甲類藥物篩選中的應(yīng)用——(一)活性評(píng)價(jià)[J];輻射防護(hù)通訊;1991年02期

3 謝理哲;吳江;李德玉;林江莉;汪天富;鄭昌瓊;;基于圖像分析的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞活性評(píng)價(jià)方法[J];生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志;2006年02期

4 劉曉宇;張俊杰;王蕊霞;;葛根總黃酮的提取及抗氧化活性評(píng)價(jià)研究[J];食品科學(xué);2007年10期

5 錢珊;吳勇;何宇新;王周玉;楊文宇;陳欣;;齊墩果酸γ-內(nèi)酯衍生物的合成及活性評(píng)價(jià)[J];高等學(xué)�；瘜W(xué)學(xué)報(bào);2012年05期

6 馬彥;黃志紓;;高選擇性端粒G-四鏈體穩(wěn)定性配體:9-O-多胺取代小檗堿衍生物的合成及活性評(píng)價(jià)[J];高等學(xué)�；瘜W(xué)學(xué)報(bào);2012年10期

7 范世光;張?zhí)煨?顧鵬毅;宋琳;賈秀坤;宋建;紀(jì)曉莉;梁再賦;;鹿茸中促神經(jīng)生長組分的篩選、鑒定及活性評(píng)價(jià)[J];中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2013年10期

8 劉影;裴健穎;李靖;董永喜;傅曉鐘;查雨鋒;蘭燕宇;王永林;;阿德福韋膦酸酯衍生物的腎毒性及抗HBV活性評(píng)價(jià)[J];華西藥學(xué)雜志;2013年01期

9 ;[J];;年期

相關(guān)會(huì)議論文 前3條

1 任鈞國;劉建勛;;中藥方劑活性評(píng)價(jià)的新思路與新方法[A];中國藥理學(xué)會(huì)第九次全國會(huì)員代表大會(huì)暨全國藥理學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2007年

2 祖勉;劉艾林;杜冠華;;臨床常用中藥的神經(jīng)氨酸酶抑制活性評(píng)價(jià)[A];中國藥理學(xué)會(huì)第十次全國學(xué)術(shù)會(huì)議�？痆C];2009年

3 吳威;畢秀麗;曹家慶;張凱卿;趙余慶;;山核桃殼中抗腫瘤物質(zhì)的發(fā)現(xiàn)與活性評(píng)價(jià)[A];海峽兩岸暨CSNR全國第十屆中藥及天然藥物資源學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前9條

1 王燕云;促滲肽—藥物的設(shè)計(jì)合成與活性評(píng)價(jià)[D];大連理工大學(xué);2015年

2 張鑫;含嘧啶類骨架蛋白抑制劑的設(shè)計(jì)、合成及生物活性評(píng)價(jià)[D];南京大學(xué);2015年

3 孫健;含硫脲吡唑類衍生物的合成及生物活性評(píng)價(jià)[D];南京大學(xué);2014年

4 高利臣;羊胎盤免疫調(diào)節(jié)因子免疫生物活性評(píng)價(jià)的初步研究[D];西南師范大學(xué);2004年

5 李曉軍;4-（2-乙酰氧基苯甲酰氨基）丁酰胺類抗癲癇藥物的設(shè)計(jì)、合成及活性評(píng)價(jià)[D];蘭州大學(xué);2011年

6 林鋒;可溶性鳥苷酸環(huán)化酶刺激劑的設(shè)計(jì)、合成與生物活性評(píng)價(jià)[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2015年

7 趙冬梅;基于結(jié)構(gòu)的結(jié)核桿菌脂肪酸縮合酶mtFabH抑制劑的設(shè)計(jì)、合成與生物活性評(píng)價(jià)[D];沈陽藥科大學(xué);2009年

8 吳文林;丹參多糖的提取和結(jié)構(gòu)表征、抗氧化活性評(píng)價(jià)[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

9 趙孟越;含噻唑、噻吩吡唑類衍生物作為BRAF~(V600E)抑制劑的設(shè)計(jì)、合成及生物活性評(píng)價(jià)[D];南京大學(xué);2015年

，

本文編號(hào)：1470170