本文關(guān)鍵詞：1、18B抗腫瘤藥效學(xué)及相關(guān)機(jī)制研究2、硝羥喹啉抗腫瘤臨床前藥效學(xué)評(píng)價(jià)

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【摘要】：腫瘤細(xì)胞的快速增長(zhǎng)。微管是細(xì)胞骨架的成分,控制細(xì)胞的增殖。由于腫瘤細(xì)胞的增殖速率遠(yuǎn)高于正常組織細(xì)胞,因此通過抑制微管的功能有可能有效抑制腫瘤細(xì)胞的增殖而對(duì)正常細(xì)胞無較大影響。XLWX-132-18B(后文稱18B),由本實(shí)驗(yàn)室與中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院六所協(xié)作研發(fā)。在前期研究工作中,我們發(fā)現(xiàn),18B競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合于微管蛋白的秋水仙堿位點(diǎn),能夠促進(jìn)微管解聚,是一種新的微管靶向藥物。我們將利用體外試驗(yàn),小鼠體內(nèi)移植瘤模型等對(duì)18B體內(nèi)外抗腫瘤作用及相關(guān)機(jī)制進(jìn)行研究探討。MTT結(jié)果顯示,18B能夠有效抑制多種腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng),并表現(xiàn)出一定的劑量效應(yīng)關(guān)系,兩次重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果基本接近。18B對(duì)于多種腫瘤細(xì)胞的IC50范圍在0.091～1.049nM之間,Imax在53.41%～95.05%之間。與陽(yáng)性對(duì)照藥紫杉醇相比,18B對(duì)不同腫瘤細(xì)胞的增殖抑制作用基本相當(dāng)甚至更強(qiáng)。經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測(cè)我們發(fā)現(xiàn),18B能夠誘導(dǎo)BGC-823細(xì)胞發(fā)生早期及中晚期凋亡,8nM作用24h后BGC-823細(xì)胞早期及中晚期凋亡百分比達(dá)到66.45%；同時(shí)還能誘導(dǎo)BGC-823細(xì)胞的線粒體膜電位(MMP)呈現(xiàn)下降；能夠促進(jìn)BGC-823細(xì)胞和HT-29細(xì)胞產(chǎn)生G2/M期阻滯。Hoechst 33342染色顯示,藥物作用后,細(xì)胞核碎裂明顯,細(xì)胞數(shù)目減少,部分細(xì)胞中染色體分布于細(xì)胞相反方向末端。定量PCR結(jié)果提示18B誘導(dǎo)細(xì)胞G2/M期阻滯和凋亡的機(jī)制可能是通過抑制CDK1表達(dá),同時(shí)下調(diào)BCL-2, Survivin, TGF-β的表達(dá)量,并上調(diào)BAD和TNF-α的表達(dá)。體內(nèi)動(dòng)物模型結(jié)果說明,18B能夠抑制S180肉瘤,人胃癌BGC-823以及人肺癌H460皮下移植瘤的生長(zhǎng)。S180肉瘤KM小鼠皮下移植瘤模型試驗(yàn)中,受試藥為1周2次,0.25mg/kg、0.5mg/kg和1.0mg/kg組的瘤重抑制率范圍在28.39%-72.62%。各組均無小鼠死亡。BGC-823皮下移植瘤的生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)中,0.25mg/kg、0.5mg/kg和1.0mg/kg組的瘤重抑制率范圍在24.77%-77.32%。同時(shí)我們對(duì)部分實(shí)驗(yàn)組腫瘤組織進(jìn)行了HE染色和免疫組化試驗(yàn),主要檢測(cè)了Ki67, Caspase 3, CD31,結(jié)果同樣顯示了18B具有腫瘤抑制作用。人肺癌細(xì)胞H460裸鼠皮下移植瘤實(shí)驗(yàn)中,0.25mg/kg、0.5mg/kg和1.0mg/kg組的瘤重抑制率范圍在17.76%-61.90%,各組存活率為100%,并且顯示出了一定的劑量效應(yīng)關(guān)系,總之,18B可以抑制體外培養(yǎng)的12種不同的腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng),可產(chǎn)生誘導(dǎo)BGC-823細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期阻滯,能夠下調(diào)CDK1、BCL-2、Survivin、TGF-β的表達(dá),上調(diào)BAD和TNF-α的表達(dá),體內(nèi)能夠抑制S180細(xì)胞,BGC-823細(xì)胞以及H460細(xì)胞皮下移植瘤的生長(zhǎng)。經(jīng)典泌尿系統(tǒng)抗菌藥物硝羥喹啉(Nitroxoline)由于近期研究發(fā)現(xiàn)其具有抑制血管新生,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,抑制細(xì)胞侵襲的能力而重新獲得了研究者們的關(guān)注。而這些研究成果使得硝羥喹啉成為了具有重新利用成為抗腫瘤藥物的潛力。老藥新用是一種從已上市銷售的藥物中篩選新用途的方法。對(duì)于研發(fā)抗腫瘤藥物來說是一種全新的策略。由于“老藥”具有較穩(wěn)定的安全性和藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù),使其能夠快速推進(jìn)至臨床研究階段。而在我們的研究中,主要通過建立腎癌和膀胱癌原位腫瘤模型對(duì)硝羥喹啉進(jìn)行了臨床前抗腫瘤藥效學(xué)評(píng)價(jià)工作。原位腫瘤模型由于能夠模擬臨床患者的病理生理過程,較其他模型具有更大的實(shí)用意義。我們將人腎癌腫瘤組織塊穿刺接種到腎實(shí)質(zhì)組織中,建立腎癌原位腫瘤模型；用留置針機(jī)械摩擦損傷膀胱粘膜,及隨后用人膀胱癌細(xì)胞懸液暴露法,建立膀胱癌原位腫瘤模型。體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,硝羥喹啉能夠有效抑制多種腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng),且具有一定的劑量依賴關(guān)系。藥物在80μM時(shí)能夠達(dá)到最大抑制作用,抑制率在75%-99%,對(duì)于人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞同樣能達(dá)到97%的抑制率。然而該濃度的硝羥喹啉對(duì)正常細(xì)胞的抑制作用不到40%,提示了硝羥喹啉的安全性。由于硝羥喹啉在體內(nèi)主要以硫酸鹽的形式存在,因此我們探究了硝羥喹啉硫酸鹽是否具有同樣的抗腫瘤效果。結(jié)果顯示,硝羥喹啉硫酸鹽對(duì)T24及HUVEC細(xì)胞顯示了一定的抑制效果。但是,其最大生長(zhǎng)抑制率相比硝羥喹啉要低30%,其IC50則要高2-3倍。在體內(nèi)研究結(jié)果中,硝羥喹啉對(duì)腎癌和膀胱癌原位腫瘤模型的瘤重抑制率在46%-85%,顯示了較強(qiáng)的抗腫瘤作用。而免疫組化結(jié)果顯示硝羥喹啉主要通過抑制腫瘤血管新生和腫瘤細(xì)胞增殖來減緩腎癌膀胱癌的腫瘤病程。綜上所述,硝羥喹啉具有較好的抗腫瘤活性,并且得益于該藥物為人所熟知的安全性和藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù),硝羥喹啉已經(jīng)被我國(guó)批準(zhǔn)進(jìn)入二期臨床研究。
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R965

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 李露爽;余銀芳;劉旭海;張娟娟;張理波;顏曉玲;;一復(fù)方顆粒對(duì)胃粘膜保護(hù)作用研究[J];江西中醫(yī)藥;2014年04期

2 張鵬;呂國(guó)義;;麻醉藥物半數(shù)有效劑量測(cè)量方法的研究進(jìn)展[J];繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育;2015年09期

3 周文靜;柴智;閆潤(rùn)紅;周然;;雷公藤醇提物對(duì)大鼠藥物代謝酶CYP2C19活性的影響[J];山西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2014年05期

4 張凌;劉長(zhǎng)安;李文宏;柳芳林;翟興英;;草烏與瓜蔞白及半夏配伍的急性毒性研究[J];時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥;2014年11期

5 董培良;于棟華;包順茹;劉樹民;;山精膠囊對(duì)實(shí)驗(yàn)性高脂血癥大鼠血脂的影響[J];中醫(yī)藥信息;2014年04期

6 安美順;王增濤;金光洙;;紫茜抗癌膠囊對(duì)大鼠的長(zhǎng)期毒性研究[J];亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥;2014年17期

7 蔡睿華;于曉飛;蔡鐘欽;;腦通定膠囊對(duì)大鼠血栓形成和溶解及血液流變學(xué)的影響[J];浙江中醫(yī)雜志;2014年10期

8 康黎靜;謝家駿;易娟娟;趙琳;;若干藥物的大鼠皮膚類過敏試驗(yàn)[J];中成藥;2014年10期

9 索朗扎西;范云鵬;麻武仁;崔恩慧;智曉燕;許營(yíng)營(yíng);馮偉;宋曉平;;錦珠草顆粒對(duì)人工感染雞大腸桿菌病的防治試驗(yàn)[J];中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào);2015年02期

10 周文靜;柴智;王永輝;李艷彥;閆潤(rùn)紅;史靜超;周然;;歸脾湯對(duì)雷公藤醇提物致肝損傷大鼠肝微粒體CYP3A4酶活性的影響[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志;2015年06期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 于飛;薏苡仁提取物抗腫瘤新靶點(diǎn)及降血脂抗氧化活性研究[D];天津大學(xué);2010年

2 孟祥虎;復(fù)方苦參凝膠殺精避孕及抗炎的實(shí)驗(yàn)研究[D];華中科技大學(xué);2014年

3 呂青遠(yuǎn);葫蘆素B磷脂/膽鹽混合納米膠束口腔速溶膜給藥系統(tǒng)的構(gòu)建與評(píng)價(jià)研究[D];吉林大學(xué);2015年

4 姜穎娟;甘石青黛膏的部分藥學(xué)研究及其治療神經(jīng)性皮炎的臨床觀察[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2015年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

1 邵一婷;乙型肝炎肝硬化（代償期）中醫(yī)證候的研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2014年

2 王斌;脫管散初步安全性評(píng)價(jià)的實(shí)驗(yàn)研究[D];甘肅中醫(yī)學(xué)院;2014年

3 錢曉波;烤煙中西柏三烯醇、糖苷類物質(zhì)的檢測(cè)及其與煙葉油潤(rùn)性的關(guān)系[D];中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué);2014年

4 周欣;加味黃芪桂枝五物湯治療實(shí)驗(yàn)性類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的主要藥效學(xué)研究[D];云南中醫(yī)學(xué)院;2014年

5 索朗扎西;中藥錦珠草顆粒對(duì)雞大腸桿菌病的防治試驗(yàn)[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2014年

6 張凱;羥肟酸類組蛋白去乙�；敢种苿┑脑O(shè)計(jì)、合成及活性評(píng)價(jià)[D];蘭州大學(xué);2012年

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本文編號(hào)：1258051