本文關鍵詞：重組人胰高血糖素樣肽-1類似物的分離純化和鑒定

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【摘要】：將合成的人胰高血糖素樣肽-1[recombinant human glucagon-like peptide-1(7~37),rhGLP-1]類似物基因插入到原核表達質粒pGEX-4T-3中,構建成rhGLP-1類似物與谷胱甘肽巰基轉移酶(glutathione-S-transferases,GST)的融合表達載體pGEX-rhGLP-1類似物,轉化大腸桿菌BL21(DE3)獲得重組菌株。IPTG誘導表達的菌體經(jīng)高壓均質機破碎后,離心收集包涵體,經(jīng)尿素變性、Glutathione-Sepharose 4B親和層析、腸激酶酶切、SP-Sepharose FF層析和反相層析RP-C18脫鹽后凍干,得到純度大于96%的rhGLP-1類似物,經(jīng)質譜測定,分子量與理論值一致。生物學活性分析表明,rhGLP-1類似物具有促進表達有GLP-1受體的HEK293細胞c AMP增加的活性。
【作者單位】： 廣東東陽光藥業(yè)有限公司;
【關鍵詞】： 重組人胰高血糖素樣肽- 融合蛋白 純化 生物學活性
【基金】：廣東省引進創(chuàng)新科研團隊計劃資助項目(201101Y0104990178)
【分類號】：R914
【正文快照】： 人胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)是一種生理性肽類腸道激素,胰高血糖素原在腸粘膜L細胞內(nèi)被酶解為含37個氨基酸殘基的GLP-1(1~37)。GLP-1(l~37)不具有生物活性,需進一步水解切除N末端6個氨基酸殘基后成為具有生物學活性的GLP-1(7~37),在攝入葡萄糖或進食數(shù)分鐘后釋放[1]。GLP-1的主

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本文編號：1074929