發(fā)布時間：2017-10-08 16:41

  本文關(guān)鍵詞：聲帶細胞外基質(zhì)干預和人羊膜上皮細胞移植后聲帶瘢痕修復再生的研究

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【摘要】：目的應用聲帶細胞外基質(zhì)干預(膠原酶和透明質(zhì)酸注射)和人羊膜上皮細胞(human amniotic epithelial cells, hAEC)在聲帶瘢痕內(nèi)的移植,觀測聲帶固有層及主要細胞外基質(zhì)變化的特點,探索其對聲帶瘢痕修復再生的作用。方法對20只新西蘭兔(40側(cè)聲帶)中的38側(cè)聲帶施行全身麻醉直接喉鏡下聲帶銳性損傷,形成聲帶瘢痕。分離培養(yǎng)實驗用hAEC,慢病毒綠色熒光蛋白基因轉(zhuǎn)染作標記。將hAEC移植入10側(cè)瘢痕聲帶,即hAEC移植組；聲帶細胞外基質(zhì)干預(注射膠原酶和透明質(zhì)酸)10側(cè)瘢痕聲帶,即基質(zhì)干預組；hAEC移植同時細胞外基質(zhì)干預10側(cè)瘢痕聲帶,即復合組；瘢痕未處理8側(cè)聲帶,即瘢痕組。2側(cè)正常聲帶作為對照組。術(shù)后1個月、2個月時示蹤觀察hAEC在聲帶內(nèi)的生長、分布及活性情況；術(shù)后1、2、3、6個月采用HE染色、Masson染色及免疫組化染色觀察聲帶形態(tài)學變化及聲帶固有層膠原、纖維連接蛋白的分布及含量變化。結(jié)果hAEC原代培養(yǎng)4 d后呈鋪路石樣生長,移植入瘢痕聲帶后可在固有層內(nèi)持續(xù)存活2個月；術(shù)后1、2個月免疫熒光顯示角蛋白(上皮細胞標志性蛋白)熒光陽性；術(shù)后6個月光鏡下觀察并半定量分析示：瘢痕組較正常組膠原量明顯增加、排列紊亂,hAEC移植組、基質(zhì)干預組及復合組膠原量和排列較瘢痕組改善,hAEC移植組、基質(zhì)干預組二者相似,復合組優(yōu)于前兩組,但均未及正常；免疫組化染色示瘢痕組較正常組纖維連接蛋白平均光密度明顯增加,hAEC移植組、基質(zhì)干預組及復合組纖維連接蛋白平均光密度介于瘢痕組和正常對照組之間,hAEC移植組與基質(zhì)干預組相差不明顯,復合組優(yōu)于前兩組。結(jié)論聲帶細胞外基質(zhì)干預和hAEC注射移植復合作用于兔瘢痕聲帶后,具有更好地促進聲帶細胞外基質(zhì)分泌、合理分布及部分有序化排列的功能,促進聲帶瘢痕的修復再生。
【關(guān)鍵詞】：聲帶 瘢痕 羊膜 上皮細胞 細胞移植 再生 細胞外基質(zhì) 兔
【學位授予單位】：復旦大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R767.4
【目錄】：

• 中英文縮寫對照4-5
• 中文摘要5-6
• 英文摘要6-8
• 前言8-10
• 第一部分：人羊膜上皮細胞的分離、培養(yǎng)及生物學標記10-15
• 1.材料10
• 2.方法10-11
• 3.結(jié)果11-12
• 4.討論12-14
• 5.結(jié)論14-15
• 第二部分：聲帶瘢痕模型的建立及實驗處理15-19
• 1.材料15-16
• 2.方法16-17
• 3.結(jié)果17
• 4.討論17-18
• 5.結(jié)論18-19
• 第三部分：人羊膜上皮細胞在瘢痕聲帶內(nèi)的存活19-24
• 1.材料19
• 2.方法19
• 3.結(jié)果19-22
• 4.討論22-23
• 5.結(jié)論23-24
• 第四部分：聲帶形態(tài)學觀察和組織學觀測24-35
• 1.材料24
• 2.方法24-27
• 3.結(jié)果27-32
• 4.討論32-34
• 5.結(jié)論34-35
• 全文總結(jié)35-44
• 參考文獻44-40
• 綜述40-46
• 參考文獻44-46
• 致謝46-47
• 論文發(fā)表47
• 學術(shù)活動47
• 獲獎情況47-48

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 黃冬雁,楊偉炎,王榮光;透明質(zhì)酸在聲帶中的作用[J];國外醫(yī)學.耳鼻咽喉科學分冊;2005年05期

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本文編號：995174