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miR-200c調控PIN1對喉癌Hep-2細胞生物學行為的影響

發(fā)布時間:2021-05-16 06:06
  前言:喉癌是頭頸部常見惡性腫瘤之一,約95%為鱗狀細胞癌,主要起源于喉粘膜上皮組織,喉鱗狀細胞癌具有較高的死亡率和預后不良。目前,喉癌的發(fā)生發(fā)展及預后的眾多分子機制尚不完全清楚。因此,探究喉癌發(fā)生發(fā)展的分子機制,尋找其診斷及預后的生物分子標記物至關重要。miRNAs(microRNAs)是近年來發(fā)現的一類長度約為22個核苷酸的單鏈非編碼RNA,通過特異性地結合靶基因mRNA的3’UTR而發(fā)揮作用。研究表明,mi RNA既可以作為癌基因下調抑癌基因的活性,也可以作為抑癌基因下調癌基因的活性。miR-200c是miR-200家族(miR-200a、miR-200b、miR-200c、miR-429和miR-141)成員之一,位于12號染色體上。研究表明,miR-200c在多種類型的癌中對上皮-間充質細胞轉化、細胞侵襲、轉移、增殖、凋亡、自噬和抗治療過程都起到決定性的作用,而且在不同腫瘤中發(fā)揮不同的作用。目前,miR-200c是否參與喉癌的發(fā)生和發(fā)展尚不明確。前期工作中,我們發(fā)現過表達PIN1加劇了中心體擴增、細胞異常分裂和細胞遷移。通過Targetscan等軟件預測發(fā)現,PIN1是miR-... 

【文章來源】:中國醫(yī)科大學遼寧省

【文章頁數】:54 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 實驗材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 細胞系
        2.1.2 組織標本
        2.1.3 主要試劑
        2.1.4 主要儀器
        2.1.5 生物信息學網址和計算機分析軟件
    2.2 實驗方法
        2.2.1 細胞培養(yǎng)
        2.2.2 質粒提取
        2.2.3 基因的瞬時轉染
        2.2.4 Real-timePCR檢測
        2.2.5 WesternBlot
        2.2.6 PIN1基因3'-非翻譯區(qū)-熒光素酶表達載體構建及活性分析
        2.2.7 CCK8檢測
        2.2.8 Transwell實驗
        2.2.9 免疫熒光實驗
        2.2.10 細胞凋亡實驗
        2.2.11 統(tǒng)計學數據分析
3 實驗結果
    3.1 miR-200c參與喉癌的發(fā)生和發(fā)展
    3.2 miR-200c 抑制喉癌 Hep-2 細胞遷移、減弱中心體異常擴增
    3.3 miR-200c靶基因的預測和鑒定
    3.4 miR-200c 通過調控 PIN1 抑制喉癌 Hep-2 細胞的遷移和中心體異常擴增
4 討論
5 結論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
    參考文獻
在學期間科研成績
致謝
個人簡介


【參考文獻】:
期刊論文
[1]miR-200及其作用機制[J]. 蘇娟,張慶瑜.  國際腫瘤學雜志. 2011 (07)



本文編號:3189127

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