【摘要】：目的 觀察慢性高眼壓大鼠不同時(shí)期的眼壓、視網(wǎng)膜形態(tài)學(xué)及Brn-3a的表達(dá)變化。 方法 (1)SD雌性大鼠35只,隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組,大鼠左眼為模型眼,右眼為對(duì)照眼,采用Shareef-Sharma模型,烙閉大鼠左眼3支上鞏膜靜脈,建立慢性高眼壓大鼠動(dòng)物模型,分別于術(shù)前、術(shù)后30min、術(shù)后1d,3d,7d, 14d,28d,測(cè)量雙眼眼壓。 (2)分別于造模后1d、3d、5d、7d、14d、28d隨機(jī)過(guò)量麻醉處死,每組5只,正常對(duì)照組5只,行3點(diǎn)鐘位縫線標(biāo)記,立即摘除大鼠眼球,浸泡于4%多聚甲醛的固定液中。48 h后沿角鞏膜緣切除眼前節(jié),剝離晶狀體,余下部分逐節(jié)脫水、透明、石蠟包埋,做4μm厚切片,烘干備用,做視網(wǎng)膜石蠟切片,常規(guī)蘇木素-伊紅染色鏡下觀察視網(wǎng)膜各層組織學(xué)改變,甲苯胺藍(lán)染色計(jì)數(shù)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(RGCs),用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)各個(gè)時(shí)間段Brn-3a的表達(dá)情況。 結(jié)果 35只大鼠(35眼)術(shù)前的基線眼壓是(13.61±1.60)mmHg, 4W時(shí)的眼壓幾乎是正常眼壓的1.59倍,且在4W內(nèi)眼壓維持穩(wěn)定。光鏡下正常大鼠的視網(wǎng)膜從內(nèi)向外依次為神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層(GCL)、內(nèi)核層(INL)、感光細(xì)胞層(ONL)。GCL的細(xì)胞呈單層排列,較為整齊,胞核清楚數(shù)目相對(duì)較少,INL和ONL呈多層排列,且細(xì)胞排列緊密,數(shù)目相對(duì)較多。造模鼠眼視細(xì)胞內(nèi)外節(jié)斷裂,RGCs層明顯空泡變且排列稀疏、細(xì)胞體積大小不一,核仁不清或無(wú),核內(nèi)染色質(zhì)稀少且分布不均,神經(jīng)纖維層水腫。RGCs計(jì)數(shù),正常對(duì)照組(n=5)RGCs是29.08±1.98(個(gè)/高倍視野),模型組與正常對(duì)照組相比,除1d組外均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。RGCs層Brn-3a蛋白表達(dá)陽(yáng)性的細(xì)胞在細(xì)胞核著色,與正常對(duì)照組相比,各模型組Brn-3a蛋白表達(dá)差異均有顯著意義(p0.01)。 結(jié)論 采用Shareef-Sharma模型成功地建立大鼠慢性高眼壓動(dòng)物模型,其眼壓中等程度升高;模型組中RGCs的丟失與高眼壓持續(xù)的時(shí)間存在高度相關(guān)性,高眼壓時(shí)間越長(zhǎng),RGCs的丟失越多;Brn-3a~+細(xì)胞僅存在于視網(wǎng)膜的GCL,Brn-3a的表達(dá)隨著時(shí)間的推移、RGCs的凋亡而逐漸減少。
【圖文】：

圖 1 實(shí)驗(yàn)期間雙眼眼壓值比較Fig1 Comparison of IOP of Oculus Uterque during the experiment

11圖 2 高眼壓模型的建立（A、B 分別為暴露的大鼠眼球、正常的大鼠上鞏膜靜脈，，C、D 為烙閉成功的上鞏膜靜脈）Fig2 establishment of chronic glaucoma model
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R775.9

【參考文獻(xiàn)】

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1 路雪婧,段俊國(guó),廖品正,張富文;持續(xù)高眼壓對(duì)大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的損傷[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2005年09期

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本文編號(hào)：2547106