【摘要】： 目的:觀察靶向survivin基因的siRNA對(duì)喉癌細(xì)胞株Hep-2增殖和凋亡的影響,為喉癌的基因治療提供有效靶點(diǎn)及技術(shù)。方法:使用陽離子脂質(zhì)體LipofectamineTM2000將靶向survivin基因的siRNA轉(zhuǎn)染至喉癌細(xì)胞株Hep-2;MTT[3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽]法檢測(cè)survivin-siRNA對(duì)喉癌細(xì)胞株Hep-2增殖的影響;轉(zhuǎn)染survivin-siRNA后,RT-PCR檢測(cè)喉癌細(xì)胞株Hep-2 survivin基因mRNA表達(dá)的變化;Western Blot檢測(cè)survivin基因蛋白表達(dá);流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)喉癌細(xì)胞株Hep-2凋亡情況。結(jié)果:各濃度survivin-siRNA轉(zhuǎn)染組細(xì)胞增殖抑制率和凋亡率均明顯高于對(duì)照組(P0.05),survivin mRNA和蛋白表達(dá)有不同程度減弱,并且有明顯的濃度依賴性,隨著濃度的上升表達(dá)率下降。結(jié)論:利用RNA干擾技術(shù)沉默survivin基因表達(dá)可以顯著抑制喉癌細(xì)胞株Hep-2細(xì)胞增殖,并在一定程度上誘導(dǎo)其自發(fā)凋亡,不同濃度survivin-siRNA轉(zhuǎn)染能下調(diào)survivin mRNA和蛋白表達(dá),靶向survivin基因的RNA干擾技術(shù)在喉癌的基因治療中具有一定價(jià)值。
【圖文】：

2 SiRNA 對(duì) survivin 基因 mRNA 表達(dá)的抑制作用 Sp-2 細(xì)胞 mRNA 表達(dá)有明顯抑制作用，，抑制率明顯高于空白和非特異性 siRNA 對(duì)照組(P < 0. 05)；0.2μmol/L、0.4μmol/Lsurvivin mRNA 表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P < 0. 05)，而空白對(duì)非特異性siRNA 對(duì)照組內(nèi)survivin mRNA 水平無明顯變化(圖rvivin-siRNA 作用于 Hep-2 細(xì)胞 24h 后 survivin mRNA 表達(dá)明誘導(dǎo)survivin mRNA 特異性降解。

2.3 SiRNA 轉(zhuǎn)染 Hep-2 細(xì)胞后 survivin 蛋白表達(dá)變化 各濃度染組 survivin 蛋白表達(dá)有不同程度下調(diào),并且有明顯的濃度依賴性，隨率下降，0.8μmol/L 濃度轉(zhuǎn)染組最明顯，而在空白對(duì)照組、空脂質(zhì)體對(duì)siRNA 對(duì)照組內(nèi) survivin 蛋白表達(dá)無明顯改變(圖 2.3)。
【學(xué)位授予單位】：寧波大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R739.65

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前8條

1 劉光偉,龔守良;細(xì)胞凋亡信號(hào)傳導(dǎo)途徑的研究進(jìn)展[J];吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2004年03期

2 邸斌,李曉明,路秀英,馬婧,賀占國;Survivin基因在喉癌組織中的表達(dá)[J];中國耳鼻咽喉頭頸外科;2005年02期

3 王彥君,孔維佳,熊新高,張松,孫大為;Survivin和VEGF蛋白在喉癌組織中的表達(dá)及其相關(guān)性研究[J];臨床耳鼻咽喉科雜志;2005年18期

4 王貽兵;劉屹立;王平;付曉亮;孫志熙;;RNA干擾抑制PC-3細(xì)胞survivin基因表達(dá)并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[J];中華男科學(xué)雜志;2007年11期

5 朱洪源;潘兆虎;許麗敏;毛鑫禮;陳霞;;COX-2與Survivin在不同喉腔病變組織中的表達(dá)及其與喉癌發(fā)生發(fā)展過程的病理關(guān)系[J];中國中西醫(yī)結(jié)合耳鼻咽喉科雜志;2007年05期

6 趙厚育,陳乾美,任婕,林尚澤;Survivin和CD44 V6在喉癌組織中的表達(dá)及意義[J];中國耳鼻咽喉顱底外科雜志;2004年05期

7 李秋;文艷君;吳揚(yáng);羅彥;盧鈾;;糖化重組生存素腺病毒疫苗抗腫瘤作用的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國癌癥雜志;2007年05期

8 劉洋,俞琳琳,崔永華,冀予心;Survivin反義寡核苷酸誘導(dǎo)人喉癌Hep-2細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)[J];中華耳鼻咽喉頭頸外科雜志;2005年08期

本文編號(hào)：2524328