本文選題：頰黏膜上皮干細胞 + CFSE��； 參考：《眼科新進展》2014年06期

【摘要】：目的培養(yǎng)人頰黏膜上皮細胞和分離上皮干細胞,在角膜緣干細胞微環(huán)境下誘導(dǎo)頰黏膜上皮干細胞轉(zhuǎn)分化,為前者獲取足夠的種子細胞。方法應(yīng)用Epilife培養(yǎng)基培養(yǎng)頰黏膜上皮細胞,使用CFSE標(biāo)記,觀察CFSE標(biāo)記率及標(biāo)記細胞與未標(biāo)記細胞的生物學(xué)特性。采用免疫熒光檢測第2代細胞P63、CK12、CK13的表達。應(yīng)用酶差速脫壁法聯(lián)合差速貼壁法分離培養(yǎng)頰黏膜上皮干細胞,觀察體外培養(yǎng)生物學(xué)特性。采用免疫熒光檢測第2l 代純化細胞P63、CK12、CK13的表達。結(jié)果頰黏膜上皮細胞在Epilife培養(yǎng)基中生長良好。CFSE標(biāo)記率可達100%,標(biāo)記細胞與未標(biāo)記細胞生物學(xué)特性相似。經(jīng)聯(lián)合分離法獲得的第2代細胞免疫熒光P63、K13陽性,K12陰性,而未經(jīng)聯(lián)合分離法獲得的第2代細胞免疫熒光CK13陽性,P63、CK12陰性。結(jié)論人頰黏膜上皮細胞在Epilife培養(yǎng)基中生長良好。CFSE是理想的頰黏膜上皮細胞熒光標(biāo)記物。酶差速脫壁法聯(lián)合差速貼壁法純化了頰黏膜上皮干細胞,為轉(zhuǎn)分化為角膜上皮干細胞獲取了足夠的種子細胞。
[Abstract]:Objective to culture and isolate epithelial stem cells from human buccal mucosa, and to induce the transdifferentiation of epithelial stem cells from buccal mucosa under the microenvironment of limbal stem cells, so as to obtain enough seed cells for the former. Methods buccal mucosal epithelial cells were cultured on Epilife medium. The labeling rate of CFSE and the biological characteristics of labeled cells and unlabeled cells were observed by CFSE labeling. The expression of P63, CK12, CK13 was detected by immunofluorescence. The buccal mucosal epithelial stem cells were isolated and cultured by enzyme differential dewalling method and differential adherent method, and the biological characteristics were observed in vitro. The expression of P63, CK12, CK13 was detected by immunofluorescence. Results the labeled rate of buccal mucosal epithelial cells in Epilife medium was 100%, and the biological characteristics of labeled cells were similar to those of unlabeled cells. The second generation of cell immunofluorescence (P63K13) was positive for K12 negative, but the second generation of cell immunofluorescence CK13 positive for P63 / CK12 was negative. Conclusion Human buccal epithelial cells grow well in Epilife medium. CFSE is an ideal fluorescent marker for buccal mucosal epithelial cells. The buccal epithelial stem cells were purified by enzyme differential dewalling method and differential adherent method, and sufficient seed cells were obtained for corneal epithelial stem cells to be transformed into corneal epithelial stem cells.
【作者單位】： 南華大學(xué)附屬第一醫(yī)院眼科;中山大學(xué)中山眼科中心;
【基金】：廣東省眼科學(xué)國家重點實驗室基金(編號:2012B031-800112)~~
【分類號】：R772.2

【參考文獻】

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1 劉雪梅;朱桂金;;人胚胎干細胞培養(yǎng)系統(tǒng)的研究進展[J];生命科學(xué);2007年03期

2 徐超;黃華榮;俞宏;趙小立;陸永良;戴利成;姚行;;分離MEF和ES細胞的差速貼壁法研究(簡報)[J];分子細胞生物學(xué)報;2006年05期

3 肇靜嫻,曾耀英,何賢輝,王南,狄靜芳,曾山;活體染料CFDA-SE在淋巴細胞增殖研究中的應(yīng)用[J];細胞與分子免疫學(xué)雜志;2003年02期

4 劉虎仙;賈赤宇;付小兵;胡大海;謝曉繁;;重復(fù)利用Ⅳ型膠原以差速貼壁法分選表皮干細胞[J];中國臨床康復(fù);2006年13期

【共引文獻】

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1 劉娟;王蔭榆;吳正鈞;郭本恒;;植物乳桿菌ST-Ⅲ菌株降膽固醇作用的研究[J];工業(yè)微生物;2008年05期

2 王濤;楊相澤;;天然生物可降解材料在眼表重建中的應(yīng)用[J];濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2014年02期

3 肖守斌;;干細胞技術(shù)相關(guān)問題與市場前景[J];湖南科技學(xué)院學(xué)報;2008年12期

4 趙令齋;曾耀英;曾祥鳳;林長樂;黃秀艷;王通;肇靜嫻;;白楊素對小鼠T細胞體外活化、增殖和細胞周期的影響[J];暨南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)與醫(yī)學(xué)版);2006年06期

5 林長樂;曾耀英;曾祥鳳;趙令齋;黃秀艷;葉雪儀;;鷹嘴豆芽素A對小鼠T淋巴細胞體外活化增殖和細胞周期的影響[J];暨南大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2007年02期

6 葉雪儀;曾耀英;肇靜嫻;狄靜芳;賀芳;周建國;趙令齋;;染料木黃酮與環(huán)孢菌素A聯(lián)合用藥對小鼠淋巴細胞體外免疫應(yīng)答的影響[J];暨南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2007年03期

7 臧寧;曾耀英;季煜華;葉雪儀;黃秀艷;趙令齋;周建國;;桑色素對小鼠T細胞增殖、周期和巨噬細胞分泌NO的影響[J];暨南大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2007年04期

8 楊志;曾耀英;黃秀艷;滕菲;李林;宋兵;姚滿林;;紅車軸草提取物對小鼠T淋巴細胞體外活化與增殖的影響[J];暨南大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2007年06期

9 姚滿林;曾耀英;黃秀艷;宋兵;李林;楊志;滕菲;;米諾環(huán)素對PDB刺激的小鼠淋巴細胞體外活化和增殖的影響[J];暨南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2008年03期

10 慕靜靜;曾耀英;黃秀艷;趙曉慧;;C_2-神經(jīng)酰胺對小鼠T淋巴細胞體外活化和增殖的影響[J];暨南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)與醫(yī)學(xué)版);2009年02期

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1 閆益波;小鼠胚胎干細胞體外誘導(dǎo)分化為肝細胞及細胞移植對急性肝損傷作用的研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

2 段秀梅;熒光染料CFDA-SE標(biāo)記在檢測淋巴細胞增殖及細胞介導(dǎo)的細胞毒活性中的應(yīng)用研究[D];吉林大學(xué);2007年

3 郭翔;降膽固醇益生乳酸菌篩選及其功能機理的研究[D];江南大學(xué);2009年

4 徐曉輝;組織工程人角膜上皮—基質(zhì)復(fù)合物（半角膜）體外重建及其動物移植的實驗研究[D];中國海洋大學(xué);2013年

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2 王南;槲皮素對小鼠T細胞行為的藥理學(xué)作用[D];暨南大學(xué);2003年

3 王曉祺;CFDA-SE標(biāo)記細胞的實驗研究及流式細胞術(shù)檢測細胞毒方法的建立[D];吉林大學(xué);2005年

4 彭桉平;紫杉醇對小鼠T細胞行為及皮膚移植排斥的影響[D];暨南大學(xué);2005年

5 杜麗蕊;小檗堿對小鼠淋巴細胞的藥理作用及其機制的研究[D];暨南大學(xué);2005年

6 溫茜;雙功能分子hIL-2/mGM-CSF蛋白的改建、表達、純化及功能的初步研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2006年

7 韓雅婷;Nanog基因轉(zhuǎn)染表皮干細胞及對其生物學(xué)特性影響的研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2006年

8 江穎娟;喜樹堿對淋巴細胞體外行為的藥理學(xué)作用[D];暨南大學(xué);2006年

9 周建國;三七提取物對腦缺血小鼠脾臟細胞的保護作用及其作用機制[D];暨南大學(xué);2007年

10 臧寧;桑色素對小鼠T細胞行為和DTH、膿毒癥免疫調(diào)節(jié)作用的研究[D];暨南大學(xué);2007年

【二級參考文獻】

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1 姜祖韻,吳蓉蓉,袁毅君,陳良標(biāo),趙小立,陸永良,姚行,戴利成,張銘;高效建立129S1/SvImJ小鼠胚胎干細胞方法的探討[J];浙江大學(xué)學(xué)報(理學(xué)版);2005年05期

2 郭雨霽,高英茂,邴魯軍;無血清培養(yǎng)條件下誘導(dǎo)胚胎干細胞向多巴胺能神經(jīng)元定向分化的實驗研究[J];解剖學(xué)報;2004年04期

3 趙明,任彩萍,蔣星軍,楊旭宇,張宏波,單文姣,周亮,馮湘玲;無飼養(yǎng)層培養(yǎng)人胚胎干細胞方法的建立[J];生命科學(xué)研究;2005年02期

4 湯鋒武,李宗金,范存剛,盧士紅,劉斌,韓忠朝;小鼠胚胎干細胞在單層粘附培養(yǎng)中向神經(jīng)細胞的分化[J];中國生物工程雜志;2004年12期

5 王建,趙惠萍,謝常青,林戈,楊勝,聶東宋,王綺如,盧光t;人類胚胎干細胞向造血細胞和內(nèi)皮細胞誘導(dǎo)分化的初步研究[J];中國實驗血液學(xué)雜志;2005年02期

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本文編號：1778143