目的:通過SD大鼠左肺全切建立肺動脈高壓模型,尋找能將miR-19a有效轉(zhuǎn)導(dǎo)入肺動脈的方法,研究miR-19a差異性表達對大鼠肺血管重建及肺高壓形成程度的影響,明確mi R-19a與VEGF、BMPR2的調(diào)控關(guān)系,從而探討出診斷及治療動脈型肺動脈高壓的潛在靶點及手段。方法:1)建立左側(cè)肺葉全切除肺動脈高壓SD大鼠模型,使用腺相關(guān)病毒載體攜帶miR-19a并經(jīng)氣管導(dǎo)管導(dǎo)入大鼠肺動脈,第三周行快速冰凍切片,觀察肺動脈綠色熒光蛋白表達（eGFP）,第八周時行qRT-PCR監(jiān)測miR-19a含量;2)30只6-8周齡雄性SD大鼠,隨機均分為5組,每組6只,C為正常對照組,行假手術(shù);P0組行單純左側(cè)肺葉全切除手術(shù);P1組行左側(cè)肺葉全切除手術(shù),并在術(shù)畢時通過氣管導(dǎo)管滴入過表達mi R-19a腺相關(guān)病毒病毒（AAV）,滴度為1*10¹² v.g./ml;P2組行左側(cè)肺葉全切除手術(shù),并在術(shù)畢通過氣管導(dǎo)管注入等量載有miR-19a封閉序列的AAV;P3組行左側(cè)肺葉全切除手術(shù),并在術(shù)畢通過氣管導(dǎo)管注入等量的空載AAV。飼養(yǎng)8周后,測各組平均肺動脈壓力（mPAP）,并處死動物取肺組織做... 

【文章來源】：西南醫(yī)科大學四川省

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

1插管通氣后消毒

松解左下肺韌帶后，用眼科鑷牽拉出左全肺組織，顯露肺門，結(jié)扎，切除左肺全葉。（圖2.1.2,圖 2.1.3）試水實驗無漏氣，查無滲血，逐層關(guān)胸。術(shù)畢恢復(fù)正常體位，呼吸機繼續(xù)予以支持 60 分鐘，待大鼠痛覺反射恢復(fù)，自主呼吸恢復(fù)，進行下一步操作。術(shù)后皮下注射青霉素（用 N.S 配 8 萬單位，0.1ml/只），以預(yù)防感染。對照 C 組僅單純開胸，同樣注射青霉素。圖 2.1.1 插管通氣后消毒 圖 2.1.2 牽拉左肺，結(jié)扎肺門 圖 2.1.3 切下左肺組織

氣管導(dǎo)管（50ml 空針針頭磨鈍后使用）放入口腔，沿著舌根往內(nèi)深入，對準聲門，吸氣相時將輕柔氣管導(dǎo)管導(dǎo)入氣道，若進入氣管向下插時可感覺導(dǎo)管與氣管軟骨環(huán)的特殊摩擦感，固定導(dǎo)管并連接呼吸機（潮氣量 15ml/kg，呼吸頻率 80 次/分，吸呼比 1:1.5-2.0），可見胸廓隨之起伏。取右側(cè)臥位，消毒手術(shù)區(qū)域（圖 2.1.1），沿著左側(cè)第 3 肋間后外側(cè) 1.0cm 的切口切開皮膚，逐層分離胸前肌及肋間肌，進入胸腔后，減小潮氣量，松解左下肺韌帶后，用眼科鑷牽拉出左全肺組織，顯露肺門，結(jié)扎，切除左肺全葉。（圖2.1.2,圖 2.1.3）試水實驗無漏氣，查無滲血，逐層關(guān)胸。術(shù)畢恢復(fù)正常體位，呼吸機繼續(xù)予以支持 60 分鐘，待大鼠痛覺反射恢復(fù)，自主呼吸恢復(fù)，進行下一步操作。術(shù)后皮下注射青霉素（用 N.S 配 8 萬單位，0.1ml/只），以預(yù)防感染。對照 C 組僅單純開胸，同樣注射青霉素。

【參考文獻】：
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本文編號：3318249