泡沫化巨噬細胞滯留在斑塊內(nèi)已經(jīng)成為動脈粥樣硬化（Atherosclerosis,AS）損傷的標(biāo)志性事件。本研究證實,ox-LDL誘導(dǎo)巨噬細胞形成巨噬源性泡沫細胞后,神經(jīng)導(dǎo)向因子netrin-1及其受體UNC5b的表達上調(diào),導(dǎo)致巨噬源性泡沫細胞遷移、能力下降,從而滯留斑塊內(nèi),促進AS的進展。然而,netrin-1和UNC5b影響泡沫細胞遷移能力的機制目前還不是很清楚。UNC5b是巨噬細胞膜上的受體糖蛋白,巨噬細胞泡沫化后UNC5b巖藻糖基化修飾是否改變,與泡沫細胞運動能力下降是否相關(guān),目前還不是很清楚。本課題利用糖生物學(xué)和分子生物學(xué)技術(shù),深入探討UNC5b巖藻糖基化修飾對泡沫細胞移動能力的影響以及相關(guān)分子機制。進而,闡明UNC5b糖基化修飾與泡沫巨噬細胞運動能力的關(guān)系,探究泡沫化巨噬細胞游出動脈內(nèi)膜,促進斑塊消退的可能途徑,為血管炎癥損傷疾病的防治提供一個新的治療靶點及思路。第一部分ox-LDL誘導(dǎo)的巨噬細胞泡沫化后UNC5b表達變化及運動能力的改變目的:以Raw264.7巨噬細胞和腹膜巨噬細胞為研究對象,ox-LDL誘導(dǎo)泡沫細胞模型,研究UNC5b是否能夠抑制泡沫化巨噬細胞的遷移、運動... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：108 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

ox-LDL對Raw264.7巨噬細胞存活率的影響（*p<0.05）

圖 2 ox-LDL 對 Raw264.7 巨噬細胞內(nèi)脂滴數(shù)量的影響。A:濃度梯度 ox-LDL 對細內(nèi)脂滴數(shù)量的影響；B: 時間梯度 ox-LDL 對細胞內(nèi)脂滴數(shù)量的影響。Figure 2 ox-LDL enhances the lipid droplets of Raw264.7 macrophages.A: Raw264.7 macrophages were treated with 0, 25, 50 and 100 μg/ml ox-LDL for 24 hand their adipogenesis was analyzed by Oil Red O staining. B: Raw264.7 macrophagwere treated with 50 μg/ml ox-LDL for 0, 6, 12 and 24 h, and their adipogenesis wasanalyzed by Oil Red O staining.膽固醇酯是構(gòu)成細胞的重要成分，在正常細胞內(nèi)膽固醇一直處于動態(tài)衡中，但細胞內(nèi)如果積累的大量的游離膽固醇，會對細胞造成損害甚至死亡巨噬細胞內(nèi)如果積累大量的游離膽固醇和脂質(zhì)則會導(dǎo)致巨噬細胞泡沫化，致巨噬細胞遷移運動能力下降。AS 斑塊內(nèi)的這種泡沫化巨噬細胞過度聚集AS 的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。因此檢測了巨噬細胞泡沫化后，細胞內(nèi)的游離固醇酯比例。結(jié)果顯示，ox-LDL 誘導(dǎo) Raw264.7 巨噬細胞 24 h，隨著 ox-LD

圖 3 濃度梯度 ox-LDL 對細胞內(nèi)膽固醇酯比例的影響（* >50%）。Figure 3 Effects of different concentrations of ox-LDLA on the cholester(* >50%).-LDL 誘導(dǎo) Raw264.7 巨噬細胞泡沫化后，遷移運動能力巨噬細胞吞噬大量脂質(zhì)形成巨噬源性泡沫細胞。泡沫細胞滯留S 損害的標(biāo)志性事件。在 AS 斑塊內(nèi)已經(jīng)形成的泡沫化的巨噬細力明顯減弱，導(dǎo)致滯留在斑塊內(nèi)。巨噬源性泡沫細胞滯留斑塊內(nèi)脂質(zhì)核心形成，招募更多的吞噬細胞加重炎癥反應(yīng)，這也可消退的原因之一。因此，在體外用 ox-LDL 誘導(dǎo) Raw264.7 巨噬細胞，利用 Transwell 實驗和劃痕實驗來檢測其遷移運動能力的示，Raw264.7 巨噬細胞經(jīng) ox-LDL 誘導(dǎo)泡沫化后 Transwell 實驗


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