【摘要】：研究載脂蛋白C3對內(nèi)皮細胞緊密連接中ZO-1表達的作用。采用細胞培養(yǎng)的方法,通過qRT-PCR、免疫熒光、流式細胞術(shù)、Western blotting等技術(shù)檢測APOC3作用狀態(tài)下內(nèi)皮細胞內(nèi)相關(guān)分子ZO-1的表達。結(jié)果顯示,APOC3通過TNF-α引起血管內(nèi)皮緊密連接中重要蛋白ZO-1表達上升,NF-κB也參與其中,引起內(nèi)皮功能紊亂。這說明抑制APOC3引起的ZO-1表達改變有可能成為心血管疾病的一個新的治療思路與靶點。
【圖文】：

內(nèi)皮細胞ＴＮＦ－α表達對于內(nèi)皮細胞中ＺＯ－１表達的影響。結(jié)果表明，當(dāng)采用ｓｉＲＮＡ敲低細胞內(nèi)ＴＮＦ－α表達后，ＺＯ－１在ｍＲＮＡ水平和蛋白水平的表達量較直接使用ＡＰＯＣ３作用內(nèi)皮細胞有所下降。并且在ｑＲＴ－ＰＣＲ和免疫熒光檢測中，采用ｓｉＲＮＡ抑制細胞內(nèi)ＴＮＦ－α的表達后，內(nèi)皮細胞中ＺＯ－１的表達水平甚至低于未經(jīng)處理的內(nèi)皮細胞（圖１～３）。該結(jié)果表明抑制內(nèi)皮細胞中ＡＰＯＣ３誘導(dǎo)的ＴＮＦ－α表達可下調(diào)內(nèi)皮細胞中ＺＯ－１的表達。圖１ＨＵＶＥＣ中ＺＯ－１表達情況（ｑＲＴ－ＰＣＲ檢測ｍＲＮＡ水平）注：空白對照：未經(jīng)處理的ＨＵＶＥＣ；ＡＰＯＣ３：ＨＵＶＥＣ與ＡＰＯＣ３（１００μｇ／ｍＬ）共孵育２４ｈ；ＡＰＯＣ３＋ｓｉ－ＴＮＦ－α：ＨＵ－ＶＥＣ中轉(zhuǎn)染ＴＮＦ－αｓｉＲＮＡ，之后與ＡＰＯＣ３（１００μｇ／ｍＬ）共孵育２４ｈ。＊＊：與未處理組相比Ｐ＜０．０１圖２ＨＵＶＥＣ中ＺＯ－１表達情況（流式細胞術(shù)檢測蛋白水平）注：空白對照：未經(jīng)處理的ＨＵＶＥＣ；ＡＰＯＣ３：ＨＵＶＥＣ與ＡＰＯＣ３（１００μｇ／ｍＬ）共孵育２４ｈ；ＡＰＯＣ３＋ｓｉ－ＴＮＦ－α：ＨＵＶＥＣ中轉(zhuǎn)染ＴＮＦ－αｓｉＲＮＡ，，之后與ＡＰＯＣ３（１００μｇ／ｍＬ）共孵育２４ｈ。＊＊：與未處理組相比Ｐ＜０．０１；＊：與未處理組相比Ｐ＜０．０５；＃＃：與ＡＰＯＣ３共孵育組相比Ｐ＜０．０５·４８０·《現(xiàn)代免疫學(xué)》２０１７年第３７卷第６期

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