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血管損傷反應(yīng)對(duì)血管平滑肌合酶Ⅰ和轉(zhuǎn)錄釋放因子表達(dá)的影響及機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2019-01-07 16:15
【摘要】:目的探討聚合酶Ⅰ和轉(zhuǎn)錄釋放因子(polymeraseⅠand transcript release factor,PTRF or Cavin~(-1))在損傷血管后血管再狹窄病理過程的作用及分子機(jī)制。方法將200~220 g雄性Sprague Dawley大鼠采用數(shù)字表法隨機(jī)分為假手術(shù)組和血管損傷組,血管損傷組制備頸動(dòng)脈損傷動(dòng)物模型。用蘇木精伊紅染色顯示損傷后頸動(dòng)脈的結(jié)構(gòu),免疫熒光、Western blotting檢測(cè)損傷后血管的Cavin~(-1)蛋白表達(dá),real-time RT-PCR方法檢測(cè)損傷后血管的Cavin~(-1) mRNA表達(dá),免疫組織化學(xué)、Western blotting、免疫共沉淀法檢測(cè)頸動(dòng)脈泛素化蛋白的表達(dá)。大鼠動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞實(shí)驗(yàn)分為(1)空白對(duì)照組(control,CTRL);(2)CHX組:用放線菌酮(cycloheximide,CHX,25μmol/L)預(yù)處理1 h;(3)CHX+MG組:用CHX預(yù)處理1 h后,接著用MG 132(蛋白酶體抑制劑,10μmol/L)處理24 h;(4)CHX+CQ組:用CHX預(yù)處理1 h后,接著用氯喹(chloroquin,CQ,10μmol/L)處理24 h。應(yīng)用Western blotting檢測(cè)細(xì)胞Cavin~(-1)蛋白濃度。結(jié)果動(dòng)物模型中,球囊損傷后,血管壁明顯增厚,Cavin~(-1)表達(dá)顯著下降(P0.05),Cavin~(-1) mRNA表達(dá)差異不明顯,泛素化蛋白表達(dá)顯著上調(diào)(P0.05)。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中,應(yīng)用CHX預(yù)處理可明顯降低平滑肌細(xì)胞Cavin~(-1)的表達(dá)(P0.05),而CHX+MG可以明顯對(duì)抗CHX上述作用過程(P0.05)。結(jié)論球囊損傷頸動(dòng)脈后,血管的Cavin~(-1)蛋白表達(dá)下調(diào),其機(jī)制可能與增加的泛素化-蛋白酶體降解途徑有關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the role and molecular mechanism of polymerase 鈪,

本文編號(hào):2403864

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