【摘要】：研究目的及背景：在前期研究中,我們已經成功制備了針對血管緊張素Ⅱ受體1型(AT1R)胞外段第二環(huán)的短肽疫苗ATRQβ-001,該疫苗能夠顯著降低模式動物的血壓,具有良好的靶器官保護作用。大量有關腎素-血管緊張素系統(tǒng)(RAS)的研究表明,不僅僅在血壓的調控方面,在動脈粥樣硬化的病理進展過程中,RAS也同樣起著十分重要的作用。其中大部分生物效應是由血管緊張素Ⅱ受體1型(AT1R)的激活所介導的。本研究主要評價疫苗干預后的ApoE-/-小鼠動脈粥樣斑塊的病變程度,并與傳統(tǒng)血管緊張素受體阻斷劑(ARB)對比,深入探究該疫苗對動脈粥樣硬化保護作用的機制以及與傳統(tǒng)化藥的不同作用特性,為動脈粥樣硬化的防治提供一種新的手段。研究方法：以5周齡雄性ApoE-/-小鼠作為模式動物,給予西方飲食,對比不同干預方式的作用下(A:ATRQβ-001疫苗免疫組；B：纈沙坦灌胃組；C：Qp載體免疫組：D： 空白對照組),動脈硬化的病變情況。主要包含以下幾個方面：1.檢測疫苗免疫后Anti-ATR抗體滴度及維持情況;2.在體水平評估各干預組動脈粥樣斑塊的病變程度及病理特點,包括油紅染色評價斑塊大小,組化及HE染色評估斑塊穩(wěn)定程度,斑塊區(qū)域炎癥反應程度,炎癥因子水平。TUNEL凋亡染色及免疫熒光評價凋亡程度,局部區(qū)域巨噬細胞的極化。放射免疫法測定RAS激活水平等；3.離體水平評價Anti-ATR抗體對血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)誘導的炎癥反應、細胞凋亡的抑制作用；4.離體環(huán)境下研究Anti-ATR抗體對巨噬細胞脂質代謝的干預作用。結果：1. ATRQβ-001疫苗可以刺激模式動物產生高滴度的Anti-ATR抗體,抗體滴度經過3次加強免疫后維持在較高水平,直到實驗研究結束；2.ATRQβ-001疫苗能有效阻斷AT1R的激活,減少高脂喂養(yǎng)下ApoE-/-小鼠的動脈粥樣斑塊的形成,穩(wěn)定粥樣斑塊, 降低斑塊區(qū)域炎癥水平(VCAM-1,MCP-1,IL-1p等)及血管凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體(LOX-1)表達量,減少細胞凋亡發(fā)生,同時,可以促進斑塊區(qū)域內巨噬細胞向M2型方向分化；3.在離體環(huán)境下,Anti-ATR抗體可以減少由AngⅡ誘導的內皮細胞的凋亡,抑制巨噬細胞對氧化性低密度脂蛋白的內吞酯化,促進攝取脂質的水解排出；4.與化藥組相比,ATRQβ-001疫苗組在有效阻斷AT1R的同時,沒有反饋激活循環(huán)中的RAS。在實驗結束后,疫苗組動物未見明顯免疫性損傷表現(xiàn)(心、腎病理切片),疫苗的安全性得到初步驗證�？偨Y：ATRQβ-001疫苗可以有效減少高脂喂養(yǎng)下ApoE-/-小鼠動脈粥樣斑塊的形成,穩(wěn)定斑塊。其具體機制主要是通過對局部AT1R的抑制,降低由AngⅡ引起的斑塊區(qū)域炎癥浸潤及凋亡的發(fā)生,抑制斑塊區(qū)域泡沫細胞的形成,調節(jié)局部巨噬細胞的分化極性來實現(xiàn)。除此之外,和傳統(tǒng)化藥相比,不反饋性激活循環(huán)RAS也是它的一個獨特的優(yōu)勢。
[Abstract]:Objective and background: in previous studies, we have successfully prepared a short peptide vaccine against the second ring of extracellular segment of angiotensin 鈪，

本文編號：2144864