本文關(guān)鍵詞：miR-21調(diào)控內(nèi)皮祖細胞衰老等生物學(xué)功能的研究

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【摘要】：目的:探討mi R-21在大鼠內(nèi)皮祖細胞衰老過程中的生物學(xué)作用;探討mi R-21是否通過調(diào)控靶基因Hmga2而實現(xiàn)其在EPCs中生物學(xué)作用。方法:1.密度梯度離心法獲取SD大鼠骨髓來源的單核細胞(BMMNCs),借助差速貼壁法和EPCs專用培養(yǎng)基定向誘導(dǎo)培養(yǎng)EPCs并培養(yǎng)14~28天,光學(xué)顯微鏡下觀察EPCs的細胞形態(tài)變化,CCK-8法分析EPCs的增殖情況、繪制生長曲線,應(yīng)用流式細胞儀、乙酰低密度脂蛋白、與荊豆凝集素吞噬實驗鑒定細胞表型,用Matrigel成管試驗檢測成血管能力;2.mi R-21的模擬物和抑制物轉(zhuǎn)染P10代EPCs,檢測mi R-21對EPCs增殖情況、運動遷移能力、成血管能力的影響,用細胞衰老β半乳糖苷酶染色檢測mi R-21對EPCs衰老的影響;3.探查mi R-21的可能靶基因Hmga2,PCR技術(shù)檢測m RNA的表達;Western Blot檢測靶蛋白的表達變化。結(jié)果:1.密度梯度離心法獲得SD大鼠MNCs經(jīng)體外培養(yǎng)后,表達相應(yīng)的內(nèi)皮細胞特異抗原,包括CD133、CD34以及VEGFR-2,能夠吞噬Dil-ac LDL與UEA-1結(jié)合,具有增殖和成血管能力,細胞純度較高;2.使用mi R-21模擬物和抑制物轉(zhuǎn)染EPCs48小時后,證實mi R-21的抑制物能夠促進EPCs的增殖能力(p0.05)、遷移能力增強(p0.05)、成血管能力(p0.05),細胞衰老β半乳糖苷酶染色證實mi R-21的抑制物能夠降低EPCs衰老進程;3.mi R-21表達上調(diào)后EPCs中Hmga2蛋白合成減少(p0.05)。結(jié)論:mi R-21表達下調(diào)能夠抑制EPCs的衰老,并促進EPCs的增殖、遷移、成血管能力,Hmga2可能是mi R-21的靶基因。
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R543.6

【參考文獻】

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1 李曉強,段鵬飛,孟慶友,聶中林,余朝文,周為民,錢愛民,朱禮瑋;亞急性、慢性下肢深靜脈血栓43例的治療[J];中華普通外科雜志;2004年12期

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本文編號：1150570