發(fā)布時(shí)間：2025-06-04 05:32

　　肝纖維化是指由多種慢性疾病引起的肝臟持續(xù)創(chuàng)傷修復(fù)反應(yīng)而導(dǎo)致的細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix,ECM）過度沉積。嚴(yán)重的肝纖維化導(dǎo)致肝硬化并引起肝功能衰竭,門靜脈高壓甚至需要肝臟移植治療。長(zhǎng)期以來廣泛持續(xù)的肝纖維化被認(rèn)為是不可逆轉(zhuǎn)的,而越來越多的研究證據(jù)表明,肝纖維化甚至肝硬化都有逆轉(zhuǎn)的可能。對(duì)肝纖維化細(xì)胞及分子機(jī)制的研究表明,多種細(xì)胞參與了肝纖維化的形成,其中激活的肝星狀細(xì)胞（hepatic stellate cells,HSCs）被認(rèn)為是促進(jìn)ECM過度沉積的主要細(xì)胞,而多種細(xì)胞因子參與了肝星狀細(xì)胞的激活,其中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β₁（transforming growth factor,TGF-β₁）被認(rèn)為是最關(guān)鍵的因素之一。其可激活HSCs和調(diào)節(jié)ECM的合成和降解平衡。以干擾HSCs中TGF-β₁及其細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路為靶點(diǎn)的抗肝纖維化治療已成為當(dāng)今研究的熱點(diǎn)之一。而在肝纖維化及其膠原合成過程中,除TGF-β₁及其細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路外,尚有其他信號(hào)途徑參與。前列腺素E₂

【文章頁數(shù)】：122 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
英文縮略詞表
中文摘要
英文摘要
1 前言
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和細(xì)胞
        2.1.2 藥物及試劑
        2.1.3 儀器與設(shè)備
    2.2 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與方法
        2.2.1 豬血清誘導(dǎo)大鼠免疫性肝纖維化模型的建立
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)分組及給藥方案
        2.2.3 大鼠肝星狀細(xì)胞(HSCs)及的分離與培養(yǎng)
        2.2.4 大鼠HSCs細(xì)胞增殖和膠原合成的檢測(cè)方法
        2.2.5 血清轉(zhuǎn)氨酶活性測(cè)定
        2.2.6 羥脯氨酸(Hyp)含量測(cè)定
        2.2.7 血清透明質(zhì)酸(HA)、層連蛋白(LN)含量的測(cè)定
        2.2.8 血清Ⅲ型前膠原(PCⅢ)、Ⅳ型膠原(CⅣ)測(cè)定
        2.2.9 MDA含量測(cè)定
        2.2.10 SOD活性測(cè)定
        2.2.11 GSH-px活性測(cè)定
        2.2.12 TNF-α和IL-1β水平測(cè)定
        2.2.13 血清TGF-β₁水平的測(cè)定
        2.2.14 PGE₂水平測(cè)定
        2.2.15 肝臟病理組織學(xué)觀察及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)
        2.2.16 肝臟免疫組織化學(xué)法檢測(cè)肝臟組織TGF-β₁表達(dá)
        2.2.17 蛋白免疫印跡法檢測(cè)Smad3、Smad7及EP₂蛋白表達(dá)
        2.2.18 PI染色、流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡分析
        2.2.19 Caspase-3活性檢測(cè)
        2.2.20 HSCs細(xì)胞內(nèi)cAMP水平的測(cè)定
        2.2.21 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
3.結(jié)果
    3.1 AGS-Ⅳ對(duì)豬血清誘導(dǎo)肝纖維化的保護(hù)作用
        3.1.1 AGS-Ⅳ對(duì)豬血清誘導(dǎo)肝纖維化大鼠的保護(hù)作用
        3.1.2 AGS-Ⅳ對(duì)對(duì)豬血清誘導(dǎo)肝纖維化大鼠肝臟病理組織學(xué)的影響
        3.1.3 AGS-Ⅳ對(duì)豬血清誘導(dǎo)肝纖維化大鼠肝勻漿Hyp影響
        3.1.4 AGS-Ⅳ對(duì)豬血清誘導(dǎo)肝纖維化大鼠血清HA、LN、PCⅢ和CⅣ含量的影響
        3.1.5 AGS-Ⅳ對(duì)豬血清誘導(dǎo)肝纖維化大鼠肝勻漿MDA,SOD和GSH-Px水平的影響
        3.1.6 AGS-Ⅳ對(duì)豬血清誘導(dǎo)肝纖維化大鼠血清TGF-β₁水平的影響
        3.1.7 AGS-Ⅳ對(duì)豬血清誘導(dǎo)肝纖維化大鼠肝臟組織TGF-β₁表達(dá)的影響
        3.1.8 AGS-Ⅳ對(duì)肝纖維化大鼠HSCs增殖及膠原合成的影響
    3.2 AGS-Ⅳ對(duì)HSCs增殖、凋亡及膠原合成的影響及對(duì)HSCsTGF-β₁/Smads信號(hào)通路的影響
        3.2.1 體外不同濃度AGS-Ⅳ對(duì)HSCs的毒性作用
        3.2.2 AGS-Ⅳ對(duì)PDGF-BB刺激體外培養(yǎng)HSCs增殖的影響
        3.2.3 AGS-Ⅳ誘導(dǎo)HSCs凋亡的作用
        3.2.4 AGS-Ⅳ對(duì)HSCs caspase-3活性的影響
        3.2.5 AGS-Ⅳ對(duì)TGF-β₁誘導(dǎo)HSCs膠原合成的影響
        3.2.6 AGS-Ⅳ對(duì)HSCs中Smad3及Smad7表達(dá)的影響
    3.3 PGE₂-EP₂-cAMP在豬血清誘導(dǎo)肝纖維化大鼠和HSCs膠原合成中的作用及AGS-Ⅳ對(duì)其影響
        3.3.1 豬血清誘導(dǎo)肝纖維化大鼠血清PGE₂水平的變化
        3.3.2 豬血清誘導(dǎo)肝纖維化大鼠HSCs表達(dá)EP₂水平的改變
        3.3.3 降低PGE₂及EP₂表達(dá)對(duì)豬血清誘導(dǎo)肝纖維化大鼠肝臟組織學(xué)影響
        3.3.4 PGE₂水平的降低對(duì)豬血清誘導(dǎo)肝纖維化大鼠血清ALT活性、TNF-α和IL-1β水平的影響
        3.3.5 PGE₂及EP₂受體激活劑對(duì)HSCs膠原合成的影響
        3.3.6 PGE₂及EP₂受體激動(dòng)劑HSCs cAMP水平的影響
        3.3.7 AGS-Ⅳ對(duì)豬血清誘導(dǎo)肝纖維化大鼠HSCs中EP₂受體表達(dá)的影響
        3.3.8 AGS-Ⅳ對(duì)TGF-β₁刺激HSCs中EP₂受體表達(dá)的影響
        3.3.9 AGS-Ⅳ對(duì)TGF-β₁刺激HSCs cAMP水平的影響
4.討論
    4.1 AGS-Ⅳ對(duì)豬血清誘導(dǎo)肝纖維化大鼠的保護(hù)作用
    4.2 AGS-Ⅳ對(duì)HSCs增殖、凋亡及膠原合成的影響
    4.3 AGS-Ⅳ對(duì)HSCsTGF-β₁/Smads信號(hào)通路的影響
    4.4 血清PGE₂水平及HSCs中EP₂表達(dá)的變化及其對(duì)豬血清誘導(dǎo)肝纖維化大鼠影響
5.結(jié)論
    5.1 AGS-Ⅳ對(duì)豬血清誘導(dǎo)大鼠肝纖維化具有良好的保護(hù)作用
    5.2 AGS-Ⅳ可抑制HSCs的增殖、誘導(dǎo)HSCs凋亡,并通過調(diào)節(jié)TGFβ/Smads信號(hào)通路抑制其膠原合成
    5.3 PGE₂-EP₂-cAMP在豬血清誘導(dǎo)肝纖維化大鼠及HSCs膠原合成中的作用及AGS-Ⅳ對(duì)其影響
參考文獻(xiàn)
本研究的創(chuàng)新點(diǎn)
個(gè)人簡(jiǎn)介
致謝
綜述:肝纖維化及以肝星狀細(xì)胞TGF-β₁信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)為靶點(diǎn)的治療



本文編號(hào)：4049390