本文關(guān)鍵詞：急性缺氧對(duì)SD乳鼠耳蝸螺旋神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元鉀電流的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:研究急性缺氧(acute hypoxia)對(duì)短期分離培養(yǎng)的SD乳鼠耳蝸螺旋神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元(spiral ganglion neurons,SGNs)鉀通道電流的影響。從聽(tīng)覺(jué)神經(jīng)元信息傳遞功能變化的角度,為缺氧性?xún)?nèi)耳損害導(dǎo)致聽(tīng)覺(jué)障礙提供進(jìn)一步的理論依據(jù)。方法:(1)短期分離培養(yǎng)SD乳鼠SGNs并鑒定。(2)應(yīng)用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)觀察急性缺氧對(duì)SGNs外向電流的作用。(3)分別應(yīng)用不同的通道阻斷劑TEA和4-AP觀察急性缺氧對(duì)SGNs外向電流的影響。(4)應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)急性缺氧時(shí)與鉀通道相關(guān)的胞內(nèi)第二信使c AMP和c GMP水平的變化。結(jié)果:(1)酶解分離可獲得生存狀態(tài)良好的神經(jīng)元,經(jīng)免疫熒光鑒定為SGNs。(2)SGNs外向電流為電壓門(mén)控外向整流電流,主要包括對(duì)TEA敏感的大電導(dǎo)鈣激活鉀通道(Large conductance Ca2+-activated K+channe,BKCa)電流和對(duì)4-AP敏感的電壓依賴(lài)性鉀離子通道(Voltage-gated K+channels,KV)電流。(3)當(dāng)鉗制電壓在-60m V時(shí),急性缺氧電壓依賴(lài)性地增強(qiáng)SGNs外向電流,主要增強(qiáng)0~+60 m V電壓區(qū)間的激活電流幅度。缺氧致5min時(shí),外向電流幅度增強(qiáng)最大,+60m V電流幅度與對(duì)照組基礎(chǔ)電流相比由(971.23±50.25)p A增加到(2361±207.4)p A(n=6,P0.01)。缺氧5-10min時(shí),增強(qiáng)幅度呈下降趨勢(shì)。缺氧11-15min對(duì)外向電流的增強(qiáng)作用基本消失,與正常對(duì)照組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(n=6,P0.05)。(4)背景灌流TEA(1 mmol/L),缺氧引起的SGNs外向電流增強(qiáng)作用明顯降低,灌流4-AP(1 mmol/L)后,對(duì)缺氧引起的SGNs外向電流的增強(qiáng)無(wú)明顯作用。(5)分別檢測(cè)缺氧5 min,15 min,20 min后SGNs中c AMP和c GMP的含量變化。缺氧5 min組與正常對(duì)照組相比,c AMP濃度明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。缺氧15 min組與正常對(duì)照組相比,c AMP濃度變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);缺氧20 min組與正常組相比,c AMP水平下降(P0.01)。c GMP濃度隨著缺氧時(shí)間的延長(zhǎng),總體呈下降趨勢(shì)(P0.01),但在20 min后有部分回升(P0.01,缺氧15 min vs缺氧20 min)。結(jié)論:SD乳鼠SGNs急性缺氧可能通過(guò)激活大電導(dǎo)鈣激活鉀通道(BKCa),增強(qiáng)K+外向電流,使神經(jīng)元膜電位超極化,細(xì)胞興奮性降低,從而影響SGNs傳導(dǎo)功能。該變化可能與細(xì)胞內(nèi)第二信使c AMP和c GMP相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：急性缺氧 SGN 大電導(dǎo)鈣激活鉀通道 cAMP cGMP
【學(xué)位授予單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R764.4
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-8
• 前言8-11
• 材料和方法11-18
• 1 材料11-13
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物11
• 1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑、耗材11-12
• 1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器12-13
• 2 方法13-18
• 2.1 SGNs 的分離與原代培養(yǎng)13
• 2.2 SGNs免疫熒光鑒定13-14
• 2.3 溶液及主要實(shí)驗(yàn)藥品的配置14-15
• 2.4 玻璃微電極制備15
• 2.5 細(xì)胞急性缺氧模型的制備15
• 2.6 全細(xì)胞膜片鉗記錄技術(shù)15-16
• 2.7 酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)16-17
• 2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法17-18
• 結(jié)果18-28
• 1 SGNs培養(yǎng)與免疫熒光鑒定結(jié)果18-20
• 1.1 SGNs 的培養(yǎng)18
• 1.2 SGNs 的免疫熒光鑒定18-20
• 2 全細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)結(jié)果20-26
• 2.1 SGNs外向電流的主要成分20-22
• 2.2 缺氧時(shí)程對(duì)SGNs外向電流的影響22-23
• 2.3 四乙胺（TEA）阻斷缺氧增強(qiáng)的外向電流23-25
• 2.4 氨基吡啶（4-AP）對(duì)缺氧增強(qiáng)的外向電流無(wú)明顯作用25-26
• 3 ELISA檢測(cè)缺氧不同時(shí)間胞內(nèi)cAMP和cGMP的含量變化實(shí)驗(yàn)結(jié)果26-28
• 3.1 胞內(nèi)第二信使cAMP濃度隨缺氧時(shí)間的變化26
• 3.2 胞內(nèi)第二信使cGMP濃度隨缺氧時(shí)間的變化26-28
• 討論28-32
• 結(jié)論和展望32-33
• 參考文獻(xiàn)33-37
• 文獻(xiàn)綜述37-45
• 參考文獻(xiàn)42-45
• 致謝45-46
• 作者簡(jiǎn)介46-47
• 導(dǎo)師評(píng)閱表47

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

1 陳秀;陳莉芬;吳萬(wàn)福;胡長(zhǎng)林;;缺氧對(duì)離體培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元興奮性的影響[J];重慶醫(yī)學(xué);2011年13期

2 王鴻南,王希軍,宋江順;急性缺氧對(duì)豚鼠聽(tīng)性腦干反應(yīng)的影響[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2000年03期

3 王麗萍;王蘋(píng);杜波;杜寶東;;缺氧對(duì)體外培養(yǎng)耳蝸螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞及神經(jīng)纖維的影響[J];臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志;2008年22期

4 李新芝;司軍強(qiáng);張忠雙;趙磊;李麗;馬克濤;;急性缺氧增強(qiáng)豚鼠小腦前下動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞外向電流并抑制縫隙連接[J];生理學(xué)報(bào);2011年06期

5 陸彤;王如興;蔣彬;;電壓門(mén)控型鉀離子通道家族[J];中國(guó)心臟起搏與心電生理雜志;2010年03期

6 楊鳳瓊;鄧驥;聶楊;;179例窒息新生兒聽(tīng)力篩查臨床分析[J];中國(guó)婦幼保健;2012年29期

  本文關(guān)鍵詞：急性缺氧對(duì)SD乳鼠耳蝸螺旋神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元鉀電流的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：326055