【摘要】：目的探討mi R-155對人晶狀體上皮細胞(HLEpi C)和SD大鼠高糖誘導的細胞凋亡的抑制作用。方法采用細胞實驗MTT法檢測mi R-155的最佳藥物濃度及不同濃度葡萄糖培養(yǎng)基對細胞增殖的影響,并進行晶狀體體外培養(yǎng)實驗驗證,動物實驗組包括:5.5 mol/L正常糖組(LG),25 mol/L甘露醇組(M),25 mol/L高糖培養(yǎng)基組(HG),高糖培養(yǎng)基處理的mi R-155(30 nmol/L)給藥組。確定最佳藥物濃度后,建立細胞實驗組,將HLEpi C用正常糖組(LG)處理至30%-40%的密度,并設置不同的培養(yǎng)組進行藥物處理。培養(yǎng)組包括:正常糖組(LG),25 mol/L甘露醇組(M),25 mol/L高糖培養(yǎng)基組(HG),高糖培養(yǎng)基處理30 nmol/L的mi R-155的激動劑mimic和藥物對照CTm組。Western blot檢測不同處理組細胞凋亡蛋白Bax、Bcl-2、caspase-3和procaspase-9的表達是否有差異。通過細胞劃痕實驗觀察mimic對HLEpi C細胞遷移的影響。結(jié)果動物實驗表明,當mi R-155的激動劑mimic濃度為30 nmol/L時,可以改變由高葡萄糖引起的晶狀體濁度的變化。細胞實驗結(jié)果表明,隨著培養(yǎng)基中葡萄糖濃度的增高,細胞促凋亡率越高,當30 nmol/L的mimic作用于細胞時,對HLEpi C的增殖和遷移具有顯著影響。在western blot實驗中,mimic能顯著抑制高糖誘導的HLEpi C凋亡和SD大鼠晶狀體蛋白的凋亡,改變凋亡相關(guān)蛋白Bax、Bcl-2、caspase-3以及凋亡起始蛋白caspase-9的前體蛋白procaspase-9表達量,使促凋亡率明顯低于高糖對照組。結(jié)論mi R-155可抑制高糖誘導的HLEpi C和SD大鼠細胞凋亡。
【圖文】：

17圖 1 miR-155 對 HLEpiC 細胞形態(tài)的影響Fig 1 Effect of miR-155 on HLEpiC cell morphology55 對 HLEpiC 細胞增殖的影響TT 檢測不同梯度藥物濃度對由高糖誘導的 HLEpiC 的改善情結(jié)果可以證明，在 48 h 時，藥物已經(jīng)發(fā)揮作用，根據(jù)數(shù)據(jù)處理藥濃度為 100 nM、60 nM、30 nM、15 nM、7.5 nM。高糖可以，與高糖培養(yǎng)對照組相比，mimic 用藥濃度為 30nM 時數(shù)據(jù)分析 數(shù)據(jù)分析結(jié)果如下：mimic 用藥 30 nM（F=24.135,P=0.001

安徽醫(yī)科 大學碩士學位 論文（ F=8.397,P=0.02 ） ,100 nM （ F=13.119,P=0.007 ） ； CTm 用 藥 30 nM（F=6.118,P=0.038）,60 nM（F=7.919,P=0.023）,100 nM（F=11.114,P=0.01）。隨著 mimic 藥物濃度的增加，改善作用增強，在藥物濃度為 30 nM 的時候，藥物作用效果最好，，隨著藥物濃度的繼續(xù)增加，藥物的作用效果開始下降。實驗重復 3 次以上。
【學位授予單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R776.1

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本文編號：2677196