本文選題：視網(wǎng)膜母細胞瘤 + miR-b��； 參考：《眼科》2017年04期

【摘要】：目的探討mi R-130b在人視網(wǎng)膜母細胞瘤(retinoblastoma,RB)中的作用,并闡明其分子機制。設(shè)計實驗研究。研究對象人RB癌組織及細胞系。方法采用熒光定量PCR檢測40例RB患者癌組織及相應癌旁組織中mi R-130b的表達情況。采用噻唑藍比色法(MTT)和蛋白印跡法檢測mi R-130b對RB細胞增殖及凋亡能力的影響。通過生物信息學分析預測mi R-130b的靶基因,并利用雙熒光素酶報告基因?qū)嶒灪偷鞍子≯E驗證。主要指標細胞生存率、細胞凋亡率及熒光素酶活性。結(jié)果mi R-130b在人RB癌組織的表達量明顯高于配對的癌旁組織(P=0.023);mi R-130b在HXO-Rb44(P=0.008)和Y79(P=0.012)細胞系中的表達量亦高于正常視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細胞(ACBRI-181)。體外功能實驗發(fā)現(xiàn),轉(zhuǎn)染mi R-130b抑制物可顯著抑制HXO-Rb44(P=0.004)和Y79(P=0.001)細胞的增殖,并增加HXO-Rb44(P=0.011)和Y79(P=0.027)細胞凋亡。生物信息學分析發(fā)現(xiàn)"與張力蛋白同源10號染色體缺失的磷酸酶"(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome 10,PTEN)是mi R-130b的靶基因。雙熒光素酶報告基因試驗和蛋白印跡結(jié)果顯示,mi R-130b可直接與PTEN m NRA 3’-非編碼區(qū)結(jié)合,并抑制其翻譯,并最終降低HXO-Rb44(P=0.038)和Y79(P=0.025)細胞中PTEN蛋白表達水平。結(jié)論 mi R-130b在RB組織表達上調(diào),mi R-130b通過下調(diào)PTEN的表達可促進RB細胞的增殖并減少其凋亡,提示mi R-130b可作為RB基因治療的一個新的分子靶點。
[Abstract]:Objective to investigate the role of mi R-130b in human retinoblastoma (RB) and to elucidate its molecular mechanism. Design experimental research. Human RB cancer tissues and cell lines were studied. Methods the expression of miR-130b in 40 patients with RB and its adjacent tissues was detected by fluorescence quantitative PCR. The effects of miR-130b on the proliferation and apoptosis of RB cells were detected by MTT and Western blot. The target gene of mi R-130b was predicted by bioinformatics analysis, and the double luciferase reporter gene experiment and Western blotting were used. Main outcome measures cell survival rate apoptosis rate and luciferase activity. Results the expression of miR-130b in human RB cancer tissues was significantly higher than that in matched paracancerous tissues (P0. 023). The expression of miR-130b in HXO-Rb44 (P0. 008) and Y79 (P0. 012) cell lines was also higher than that in normal retinal vascular endothelial cells (ACBRI-181). In vitro functional experiments showed that the transfection of mi R-130b inhibitor significantly inhibited the proliferation of HXO-Rb44 (P0. 004) and Y79 (P0. 001) cells, and increased the apoptosis of HXO-Rb44 (P0. 011) and Y79 (P0. 027) cells. Bioinformatics analysis showed that "phosphatase" (phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome 10) was the target gene of mi R-130b. The results of double luciferase reporter gene assay and Western blotting showed that PTEN R-130b could bind directly to PTEN m NRA3- non-coding region, inhibit its translation, and ultimately reduce the expression of PTEN protein in HXO-Rb44 (Pt0.038) and Y79 (Pn0.025) cells. Conclusion the up-regulation of miR-130b expression in RB can promote the proliferation of RB cells and decrease its apoptosis by down-regulating the expression of PTEN, suggesting that miR-130b may be a new molecular target for RB gene therapy.
【作者單位】： 河南省濮陽市油田總醫(yī)院眼科;
【分類號】：R739.7

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