本文選題：內(nèi)耳　切入點：中耳　出處：《吉林大學》2015年博士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：Scleraxis（SCX）是一個堿性螺旋環(huán)螺旋（basic helix-loop-helix, bLHL）轉錄因子，它在肌腱和韌帶的祖細胞以及這些韌帶的分化細胞中表達。本課題組在SCX轉基因報告鼠的18.5天的胚胎中檢測到SCX基因在耳蝸的齒間細胞（Interdentalcell）、聽毛細胞和支持細胞中表達。為了進一步了解SCX基因在內(nèi)耳的功能，對SCX-null小鼠進行了聽覺腦干誘發(fā)電位檢查，發(fā)現(xiàn)有50%的基因缺陷鼠聽閾升高。然而SCX-null小鼠在耳蝸形態(tài)及細胞模式上沒有異常。通過進一步測試發(fā)現(xiàn)所有的聽閾提高都伴隨著中耳感染。脊椎動物的中耳傳遞振動至骨膜，砧骨和鐙骨肌通過不同的肌腱插入錘骨和鐙骨以調(diào)節(jié)中耳的肌肉反射。這個反射是中耳保護機制的主要部分。目前為止還沒有對這些韌帶發(fā)育及功能的報道。在胚胎第14.5天時SCX在韌帶祖細胞開始表達，在胚胎16.5到18.5天時分化成鐙骨肌和砧骨肌的肌腱。由于SCX基因缺失，肌腱祖細胞在發(fā)育過程中無法伸長導致SCX-null小鼠的鐙骨和砧骨肌腱明顯變短。SCX-GFP轉基因小鼠首次描述了中耳韌帶由開始形成至成熟的整個過程。SCX-null是第一個從基因水平導致中耳韌帶分化異常的小鼠模型，這個模型將會有利于中耳韌帶和肌肉的形成和功能的研究。 哺乳動物的內(nèi)耳是控制聽覺和平衡的特殊感覺器官。耳蝸及前庭感覺上皮包含機械敏感的毛細胞和相關的支持細胞。毛細胞和/或他們支配的神經(jīng)元的損傷是引起聽力損失和平衡功能障礙的最頻繁因素。對于哺乳動物內(nèi)耳分子分布及細胞命運等方面的進一步了解將有助于基因和細胞治療的發(fā)展。這包括細胞譜系和細胞跨邊界遷移分析（如感覺區(qū)域與非感覺區(qū)域）。本研究的目的是利用逆轉錄病毒對胚胎11.5天(E11.5)小鼠耳部聽囊進行譜系分析。復制缺陷型逆轉錄病毒編碼人類堿性磷酸酶（PLAP）和可變的24bp寡核苷酸標記被微量注射入E11.5小鼠聽囊。從產(chǎn)后內(nèi)耳切片挑取PLAP陽性細胞并進行嵌套PCR。共享相同的序列標記的PLAP陽性細胞被認為來源于共同的祖細胞。在耳蝸和前庭感覺上皮、神經(jīng)節(jié)、螺旋緣和血管紋共檢測了三十五多細胞克隆，每個克隆平均有3.4個細胞。前庭的毛細胞，支持細胞和壺腹的非感覺上皮細胞相關聯(lián)。耳蝸的外毛細胞與其相鄰的支持細胞相關聯(lián)。相比之下，螺旋神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元、齒間細胞和Claudius’細胞均與同類型細胞相關聯(lián)，這些克隆分散距離高達幾百微米。這些數(shù)據(jù)為哺乳動物內(nèi)耳祖細胞發(fā)育的研究作出了貢獻。 氯胺酮結合美托咪定（medetomidine，MK）或右美托咪（dexmedetomidine，DK）作為全身麻醉藥物被廣泛用于實驗室動物。本實驗研究的主要目的是評估MK或DK的使用對胚胎發(fā)育，尤其是內(nèi)耳發(fā)育的影響。25妊娠小鼠被隨機分為5組，在胚胎8.5日齡時對實驗組母鼠進行腹腔內(nèi)注射或皮下注射氯胺酮與MK或DK的混合溶液。正常飼養(yǎng)至母鼠分娩，統(tǒng)計出生后的幼鼠個數(shù)，以及幼鼠在出生后第0天，第15天和第30天的體重。耳功能檢測分為兩個部分:聽力水平和平衡能力的檢測。聽力水平檢測采用聽性腦干反應測試（ABR），該測試應用于檢查耳蝸的發(fā)育和功能；前庭平衡功能的檢測采用接觸反射和游泳測試。結果表明，不同的注射方式，即腹腔注射和皮下注射對實驗結果沒有顯著影響（P0.05）。MK和DK不同的處理組之間也沒有明顯的差異（P0.05）。另外氯胺酮聯(lián)合MK和DK的處理組與正常對照組在胚胎發(fā)育和耳朵功能方面均未發(fā)現(xiàn)明顯差異。所有的幼鼠體重正常生長。處理組的ABR閾值與對照組差異不明顯（P0.05）。藥物處理后的幼鼠能夠表現(xiàn)出正常的接觸反射和游泳的行為，，并且免疫組織化學結果顯示顯示在所有六個內(nèi)耳感覺區(qū)形態(tài)正常�？傊�，這項研究并沒有發(fā)現(xiàn)氯胺酮結合美托咪定或右美托咪對一般的胚胎發(fā)育和后代耳功能產(chǎn)生任何影響。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R764

【共引文獻】

相關期刊論文 前10條

1 袁亞娣;謝昊;;牙周膜細胞分化相關因子Scleraxis的研究進展[J];國際口腔醫(yī)學雜志;2008年04期

2 徐玲;張富強;蔣欣泉;;牙組織工程干細胞的研究進展[J];國際口腔醫(yī)學雜志;2009年05期

3 郭淑娟;吳亞菲;;牙囊細胞分化的調(diào)控機制[J];國際口腔醫(yī)學雜志;2010年04期

4 杜宇;凌均h

本文編號：1599172