目的觀察人參皂甙Rg1對體外培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞劃痕損傷后細(xì)胞表面相關(guān)蛋白(Nestin,GLT1,NG2,AQP4,GFAP,Vimentin)表達(dá)的影響及其可能的分子機(jī)制,并探討其在脊髓損傷修復(fù)中的意義,為脊髓損傷的臨床治療提供新的思路。方法從24 h齡SD大鼠腦組織中取材獲得星形膠質(zhì)細(xì)胞(astrocyte,AS),進(jìn)行體外培養(yǎng)、純化及傳代;免疫熒光法檢測培養(yǎng)的AS細(xì)胞純度,純度達(dá)95%以上的細(xì)胞繼續(xù)用于后續(xù)實(shí)驗(yàn);CCK-8法測定人參皂甙Rg1在10、20、40、80 μg/ml濃度梯度下對AS細(xì)胞劃傷后活性的影響,得出人參皂甙Rg1對AS作用的最適濃度:劃痕法制作體外星形膠質(zhì)細(xì)胞劃傷模型,由此設(shè)置對照組與實(shí)驗(yàn)組(Rg1組),分析觀察對比兩組細(xì)胞損傷后形態(tài)學(xué)變化及劃痕愈合速度;并利用Western blot測定比較AS損傷后其表面蛋白Nestin、GLT1、NG2、AQP4、GFAP、Vimentin表達(dá)的變化;再利用PI3K/Akt 信號通路抑制劑 LY294002 干預(yù) Rg1 實(shí)驗(yàn)組(Rg1+LY294002 組),Western Blot測定各組中PI3K、p-PI3K、Ak...

【文章頁數(shù)】：43 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２劃痕損傷后星形膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)變化及劃痕區(qū)域面積變化（ｘ４００），從左至右??０、１２、２４、４８、７２?ｈ

〇??圖１?ＡＳ形態(tài)觀察及免疫熒光鑒定??Ａ原代培養(yǎng)的ＡＳ：?Ｂ原代培養(yǎng)的ＡＳ?７滅；Ｃ傳代后ＡＳ：?Ｄ?ＡＳ的免疫熒光??鑒定（紅色為ＧＦＡＰ染色；藍(lán)色為ＤＡＰ丨染色）??

圖１?ＡＳ形態(tài)觀察及免疫熒光鑒定??Ａ原代培養(yǎng)的ＡＳ：?Ｂ原代培養(yǎng)的ＡＳ?７滅；Ｃ傳代后ＡＳ：?Ｄ?ＡＳ的免疫熒光??鑒定（紅色為ＧＦＡＰ染色；藍(lán)色為ＤＡＰ丨染色）??

人參皂甙Ｒｇｌ調(diào)控星形膠質(zhì)細(xì)胞表面蛋〖Ｉ表達(dá)及在其在脊髓損傷中的意義?附圖??附圖??

圖３?Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ檢測ＡＳ表面相關(guān)蛋ｆｔ表達(dá)及＇定量分析

附圖?人參皂甙Ｒｇｌ調(diào)控星形膠質(zhì)細(xì)胞表面蛋白表達(dá)及在其在脊髓損傷中的Ｊ：義??ａｑｐ４?，．??ＧＦＡＰ?％?Ｉ．丨—？?ＮＧ２??Ｖｉｍｅｎｔｉｎ?—？?ＧＬＴ１?著編＿??Ｐ－ａｃｔｉｎ?０－ａｃｔｉｎ?ｍｍｍｍ??ｃｏｎｔｒｏｌ?Ｒｇ１?ｃｏｎｔｒｏｌ?Ｒｇ１??Ａ?Ｂ??....

圖４?Ｒｇｌ對ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ通路蛋白磷酸化的影響

附圖?人參皂甙Ｒｇｌ調(diào)控星形膠質(zhì)細(xì)胞表面蛋白表達(dá)及在其在脊髓損傷中的Ｊ：義??ａｑｐ４?，．??ＧＦＡＰ?％?Ｉ．丨—？?ＮＧ２??Ｖｉｍｅｎｔｉｎ?—？?ＧＬＴ１?著編＿??Ｐ－ａｃｔｉｎ?０－ａｃｔｉｎ?ｍｍｍｍ??ｃｏｎｔｒｏｌ?Ｒｇ１?ｃｏｎｔｒｏｌ?Ｒｇ１??Ａ?Ｂ??....

本文編號：4021899