目前缺乏針對人類表皮生長因子受體2陽性(HER2+)和三陰性(TNBC)乳腺癌的治療藥物,導(dǎo)致這兩種雌激素受體陰性(ER-)乳腺癌的死亡率居高不下。他莫昔芬(TAM)是目前使用最廣泛的選擇性靶向雌激素受體藥物,在臨床中常被用于雌激素受體陽性(ER+)乳腺癌的輔助治療以及乳腺癌發(fā)病高危女性的預(yù)防性治療。然而,由于其在臨床上主要用于ER+乳腺癌患者的治療以及大多數(shù)患者在使用后會出現(xiàn)耐藥性等問題,其應(yīng)用范圍大大受限。1,25-二羥基維生素D3(1,25D)作為首個被發(fā)現(xiàn)的人體內(nèi)生物活性最高的維生素D代謝物,能調(diào)節(jié)包括ER-乳腺癌在內(nèi)的多種乳腺癌細胞周期與凋亡,并抑制雌激素的合成與活性。因此,為探究1,25-二羥基維生素D3與他莫昔芬聯(lián)用對ER-乳腺癌細胞作用,本實驗通過HER2+乳腺癌細胞系SK-BR-3和三陰性乳腺癌細胞系HCC1806進行體外和體內(nèi)實驗,探究1,25-二羥基維生素D3聯(lián)合他莫昔芬對ER-乳腺癌的細胞增殖、周期、凋亡及其相關(guān)分子機制和腫瘤生長的作用。得出的主要結(jié)論如下:(1)運用活細胞計數(shù)、CCK-8增殖實驗和細胞表型三種實驗方法,分析1,25-二羥基維生素D3聯(lián)合他莫昔芬對...

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
中英文縮略詞對照表
1 緒論
    1.1 乳腺癌
        1.1.1 乳腺癌的流行病學(xué)特征
        1.1.2 乳腺癌的病因
        1.1.3 乳腺癌的鑒定與治療
    1.2 他莫昔芬
        1.2.1 他莫昔芬的代謝及應(yīng)用現(xiàn)狀
        1.2.2 他莫昔芬與乳腺癌
    1.3 1,25-二羥基維生素D
        1.3.1 1,25-二羥基維生素D3的來源
        1.3.2 1,25-二羥基維生素D3的功能
        1.3.3 維生素D3與乳腺癌
    1.4 立題依據(jù)與研究內(nèi)容
        1.4.1 立題依據(jù)
        1.4.2 研究內(nèi)容
2 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 細胞株
        2.1.2 實驗動物
        2.1.3 實驗動物飼料
        2.1.4 主要試劑
        2.1.5 主要儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 細胞的培養(yǎng)
        2.2.2 細胞實驗藥物劑量
        2.2.3 CCK-8細胞增殖實驗
        2.2.4 細胞計數(shù)實驗
        2.2.5 PI單染實驗
        2.2.6 Annexin V-PI雙染實驗
        2.2.7 動物實驗
        2.2.8 免疫組化（IHC）實驗
        2.2.9 蛋白免疫印跡法分析
        2.2.10 數(shù)據(jù)分析
3 結(jié)果與討論
    3.1 1,25-二羥基維生素D3和他莫昔芬對ER-乳腺癌細胞增殖的影響
        3.1.1 1,25-二羥基維生素D3對ER-乳腺癌細胞增殖的影響
        3.1.2 他莫昔芬對ER-乳腺癌細胞增殖的影響
        3.1.3 1,25-二羥基維生素D3聯(lián)合他莫昔芬對ER-乳腺癌細胞增殖的影響
    3.2 1,25-二羥基維生素D3和他莫昔芬對ER-乳腺癌細胞周期的影響
        3.2.1 1,25-二羥基維生素D3聯(lián)合他莫昔芬對HER2+乳腺癌細胞周期的調(diào)控作用
        3.2.2 1,25-二羥基維生素D3聯(lián)合他莫昔芬對三陰性乳腺癌細胞周期的調(diào)控作用
    3.3 1,25-二羥基維生素D3和他莫昔芬對ER-乳腺癌細胞凋亡的影響
        3.3.1 1,25-二羥基維生素D3聯(lián)合他莫昔芬對HER2+乳腺癌細胞凋亡的調(diào)控作用
        3.3.2 1,25-二羥基維生素D3聯(lián)合他莫昔芬對三陰性乳腺癌細胞凋亡的調(diào)控作用
    3.4 1,25-二羥基維生素D3聯(lián)合他莫昔芬的機制研究
        3.4.1 1,25-二羥基維生素D3聯(lián)合他莫昔芬對細胞周期相關(guān)蛋白表達的影響
        3.4.2 1,25-二羥基維生素D3聯(lián)合他莫昔芬對細胞凋亡相關(guān)蛋白表達的影響
        3.4.3 1,25-二羥基維生素D3聯(lián)合他莫昔芬對p53 信號的影響
        3.4.4 1,25-二羥基維生素D3聯(lián)合他莫昔芬對AKT信號的影響
    3.5 1,25-二羥基維生素D3聯(lián)合他莫昔芬在體內(nèi)的抗腫瘤作用
        3.5.1 1,25-二羥基維生素D3聯(lián)合他莫昔芬對腫瘤生長的作用
        3.5.2 1,25-二羥基維生素D3聯(lián)合他莫昔芬對腫瘤細胞凋亡的作用
主要結(jié)論與展望
致謝
參考文獻
附錄:作者在攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文



本文編號：4011034