發(fā)布時間：2024-04-01 23:03

　　研究目的:骨性關(guān)節(jié)炎最重要的細胞病理學變化包括軟骨細胞肥大化、軟骨細胞凋亡、軟骨細胞被成骨細胞替代。細胞外基質(zhì)(extracellular matrix,ECM)由以膠原為主要成分向以鈣磷酸鹽為主要成分轉(zhuǎn)化,導致軟骨細胞外基質(zhì)被骨組織所替代,并最終形成骨性關(guān)節(jié)炎的主要組織學特點。鎂是人體內(nèi)常量元素,是細胞內(nèi)含量僅次于鈣離子的二價陽離子,它在維持人體的正常生理功能、促進細胞和生物酶活性中發(fā)揮了至關(guān)重要的作用,其參與多種酶促反應、蛋白合成和能量代謝;調(diào)控骨組織生長和維持神經(jīng)肌肉的興奮性;保持胃腸道和激素功能的穩(wěn)定性。Ca²⁺和Mg²⁺作為人體內(nèi)含量最大的兩種二價陽離子,細胞外液的平衡調(diào)控著細胞外微環(huán)境中鈣鹽沉積和組織鈣化水平;同時生理性的骨形成、骨吸收和病理性的異位骨化、軟骨細胞鈣化也受到這兩種離子的調(diào)控影響。目前發(fā)現(xiàn),鈣化的肌腱組織和韌帶中,鈣含量較正常組織增高,且隨著肌腱退變和鈣化的嚴重程度而加劇,而鎂的含量則隨著肌腱老化和退變而下降;近年研究表明,Mg²⁺與細胞外基質(zhì)的鈣化過程密切相關(guān),涉及很多常見的病理狀態(tài),如骨質(zhì)疏...

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖1.細胞外高濃度Mg2+抑制OM中ATDC5外基質(zhì)鈣化

中國醫(yī)科大學博士學位論文3結(jié)果3.1高濃度Mg2+抑制ATDC5軟骨細胞外基質(zhì)鈣化當OM培養(yǎng)基中鎂離子含量在1.6mM/L或更高濃度時，ATDC5細胞外基質(zhì)鈣化程度受到顯著的抑制（圖1a），與在OM中培養(yǎng)的ATDC5細胞相比，隨著Mg2+濃度的增加，....

圖2.高濃度Mg2+的OM培養(yǎng)基和單純OM培養(yǎng)基，可以調(diào)控促軟骨形成，軟骨細胞肥大

肥大化及鈣化的主要調(diào)控因素，此外X型膠原蛋白由肥大軟骨細胞表達，其高表達是軟骨細胞肥大化的主要標志。在本研究中我們發(fā)現(xiàn)，OM培養(yǎng)基和含有高濃度Mg2+的OM培養(yǎng)基中，Runx2和膠原蛋白X的表達出現(xiàn)顯著差異。MGP與鈣離子具有高親和力，于其他含Gla基團的蛋....

圖3Westernblot結(jié)果顯示，培養(yǎng)7d后，成骨誘導培養(yǎng)基可激活ATDC5中軟骨細胞肥大化

中國醫(yī)科大學博士學位論文3.3高濃度Mg2+調(diào)控ATDC5軟骨細胞蛋白表達Runx2，MMP13，Col1α1和Col10α1蛋白表達與我們在Real-timePCR中發(fā)現(xiàn)的結(jié)果一致。成骨誘導培養(yǎng)基可以激活ATDC5軟骨細胞肥大化，增加Runx2轉(zhuǎn)錄因子....

圖4.磷酸化的ERK敏感且易于降解，因此我們選擇在OM培養(yǎng)基和OM+2.4mM/LMg2+培養(yǎng)基中培養(yǎng)細胞24小時后，收集ATDC5細胞總蛋白，并進行蛋白質(zhì)印跡檢測

3.4高濃度Mg抑制ATDC5信號通路ERK1/2蛋白磷酸化表達及自噬相關(guān)蛋白表達骨發(fā)育和骨質(zhì)疏松癥已經(jīng)被越來越多的研究所證實，自噬過程已經(jīng)被證實參與ECM鈣化形成[23]。骨細胞中自噬的抑制導致骨量的下降，而低水平自噬表達影響骨重建相關(guān)，表明自噬對于鈣化過程是必....

本文編號：3945443