目的:構(gòu)建新西蘭大耳兔膝關(guān)節(jié)軟骨損傷模型,通過觀察不同干預(yù)情況下兔膝關(guān)節(jié)軟骨損傷的修復(fù)水平,探索Runx2基因轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是否可以促進(jìn)膝關(guān)節(jié)軟骨損傷的修復(fù),以期為廣大膝關(guān)節(jié)軟骨損傷患者提供更有效的臨床治療方案。方法:新西蘭大耳兔20只,雄性,體重約2.5~2.7kg。適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后進(jìn)行膝關(guān)節(jié)軟骨損傷造模手術(shù),造模成功后隨機(jī)分為4組,每組5只,分別為A:空白對照組、B:透明質(zhì)酸鈉組、C:單純骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞組、D:Runx2轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞組,分別于第4、8周進(jìn)行膝關(guān)節(jié)取材,取材后對各組標(biāo)本進(jìn)行軟骨組織修復(fù)肉眼觀察;通過RT-PCR實(shí)驗(yàn)檢測各組損傷部位修復(fù)物中Ⅱ型膠原（ColII）、蛋白聚糖（Agg）、Ⅹ型膠原（Col-x）、Ⅰ型膠原（Col-I）及Runx2的m RNA表達(dá)量;通過Western Blot實(shí)驗(yàn)分別檢測各組的II型膠原蛋白表達(dá)量;對各組標(biāo)本軟骨切片分別進(jìn)行HE染色、Masson染色,分析各組修復(fù)物性質(zhì)和修復(fù)機(jī)制。結(jié)果:1、膝關(guān)節(jié)軟骨損傷造模成功后,各實(shí)驗(yàn)組軟骨缺損部分都得到不同程度的修復(fù),通過組織學(xué)肉眼觀察發(fā)現(xiàn),干預(yù)4周后,與空白對照組相比,透明質(zhì)酸鈉組損傷... 

【文章頁數(shù)】：38 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
Abbreviation Inde
摘要
Abstract
第一章 導(dǎo)言
第二章 文獻(xiàn)綜述
    2.1 軟骨缺損概述
        2.1.1 軟骨缺損的病理表現(xiàn)
        2.1.2 軟骨損傷的治療方法
    2.2 Runx2基因研究進(jìn)展
    2.3 Runx2基因在軟骨損傷修復(fù)的作用
    2.4 小結(jié)與探討
第三章 實(shí)驗(yàn)材料及方法
    3.1 實(shí)驗(yàn)整體技術(shù)路線圖
    3.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器和試劑
    3.3 實(shí)驗(yàn)對象
    3.4 模型建立
        3.4.1 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)
        3.4.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        3.4.3 膝關(guān)節(jié)軟骨損傷模型建立
    3.5 實(shí)驗(yàn)分組
    3.6 取材及檢測指標(biāo)
    3.7 數(shù)據(jù)處理方法
第四章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.1 軟骨損傷修復(fù)肉眼觀
    4.2 RT-PCRmRNA表達(dá)情況
    4.3 相關(guān)蛋白的表達(dá)情況
    4.4 組織病理學(xué)表現(xiàn)
        4.4.1 蘇木精—伊紅染色
        4.4.2 Masson染色
第五章 分析與討論
    5.1 軟骨的自我修復(fù)能力
    5.2 Runx2轉(zhuǎn)染組與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞組的對比
    5.3 Runx2轉(zhuǎn)染組與透明質(zhì)酸鈉組的對比
    5.4 各組修復(fù)物組成成分構(gòu)成
    5.5 展望
第六章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3698808