亞低溫通過調(diào)節(jié)自噬/凋亡以及TLR4通路影響腦外傷后小膠質(zhì)細胞活化的研究
發(fā)布時間:2022-01-04 17:11
炎癥反應(yīng)在創(chuàng)傷性顱腦損傷(traumatic brain injury,TBI)后的繼發(fā)性損傷起著很重要的作用,其中小膠質(zhì)細胞的活化是腦內(nèi)炎癥反應(yīng)的主要標志。亞低溫治療可以在TBI的急性期起到一定的腦保護作用,然而其療效尚不夠肯定。由于參與TBI后小膠質(zhì)細胞激活的機制極為復(fù)雜,亞低溫腦保護的確切機制還有待闡明。我們的前期研究已經(jīng)證實,TBI可誘導神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細胞的自噬和凋亡。本研究評估了中重度TBI和亞低溫對小膠質(zhì)細胞活化的影響,并研究了小膠質(zhì)細胞自噬/凋亡負性調(diào)節(jié)和toll樣受體4(tolllike receptor 4,TLR4)通路在其中可能發(fā)揮的作用。本研究使用清潔級SD大鼠,由液壓沖擊損傷裝置(fluid percussion injury,FPI)誘導中重度TBI模型,并通過全身麻醉下在冰浴降溫4小時來實現(xiàn)亞低溫。TBI后24小時處死所有大鼠,檢測損傷區(qū)大腦皮層及同側(cè)海馬的小膠質(zhì)細胞自噬/凋亡以及TLR4通路的相關(guān)指標。本研究結(jié)果顯示在TBI后亞低溫治療可以減少活化的小膠質(zhì)細胞的數(shù)量,抑制細胞自噬并促進小膠質(zhì)細胞凋亡,這可能是通過自噬和細胞凋亡之間的負性調(diào)節(jié)實現(xiàn)的。TL...
【文章來源】:上海交通大學上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:58 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
損傷區(qū)皮質(zhì)及同側(cè)海馬HE染色Figure1-1HEstainingoftheinjuredcortexandipsilateralhippocampus.在TBI后24小時,SNG,SHG,TNG和THG大鼠的損傷區(qū)皮質(zhì)和同側(cè)海馬的HE染色(放大倍數(shù),×100)
上海交通大學碩士學位論文11圖1-2損傷區(qū)皮質(zhì)及同側(cè)海馬Iba-1陽性細胞免疫熒光分析Figure1-2ImmunofluorescenceanalysisofIba-1-positivecellsintheinjuredcortexandipsilateralhippocampus(a)損傷區(qū)皮質(zhì)Iba-1陽性細胞(白色箭頭)激光共聚焦照片。(放大倍數(shù),×630)(b)同側(cè)海馬Iba-1陽性細胞(白色箭頭)激光共聚焦照片。(放大倍數(shù),×630)(c)損傷區(qū)皮質(zhì)和同側(cè)海馬中Iba-1陽性細胞的數(shù)量統(tǒng)計。條形圖中的數(shù)據(jù)以平均值±標準差表示。****P<0.001。隨機選擇至少10個視野(放大倍數(shù),×630)計數(shù)本研究通過免疫組織化學染色和高分辨率激光共聚焦顯微鏡觀察,通過統(tǒng)計不同組中,10個隨機高倍鏡視野下cleavedcaspase3陽性細胞數(shù)的差異,評估TBI后24h大鼠腦內(nèi)損傷區(qū)皮質(zhì)與同側(cè)海馬中的神經(jīng)細胞總體凋亡程度的變化。在TBI后的24h,TNG組中大鼠腦內(nèi)損傷區(qū)皮質(zhì)與同側(cè)海馬中的cleavedcaspase3陽性細胞數(shù),較SNG組中的相應(yīng)腦區(qū)顯著增加,表明大鼠腦內(nèi)神經(jīng)細胞的總體凋亡水平顯著上升(TNG組:損傷區(qū)皮質(zhì):23.2±2.39,P<0.001;同側(cè)海馬:23.1±2.47,P<0.001)。而在亞低溫治療后,THG組中大鼠腦內(nèi)損傷區(qū)皮質(zhì)與同側(cè)海馬中的cleavedcaspase3陽性細胞數(shù),較TNG組中的相應(yīng)腦區(qū)顯著降低,表明大鼠腦內(nèi)神經(jīng)細胞的總體凋亡程度受到亞低溫治療的抑制(THG:損傷區(qū)
上海交通大學碩士學位論文12皮質(zhì):13.3±1.49,P<0.001;同側(cè)海馬:11.70±1.57,P<0.001)。SNG組和SHG組中的相關(guān)指標未見顯著差異。(圖1-3)圖1-3損傷區(qū)皮質(zhì)及同側(cè)海馬cleavedcaspase3陽性細胞免疫熒光分析Figure1-3Immunofluorescenceanalysisofcleavedcaspase3positivecellsintheinjuredcortexandipsilateralhippocampus(a)損傷區(qū)皮質(zhì)cleavedcaspase3陽性細胞(白色箭頭)激光共聚焦照片。(放大倍數(shù),×630)(b)同側(cè)海馬cleavedcaspase3陽性細胞(白色箭頭)激光共聚焦照片。(放大倍數(shù),×630)(c)損傷區(qū)皮質(zhì)和同側(cè)海馬中cleavedcaspase3陽性細胞的數(shù)量統(tǒng)計。條形圖中的數(shù)據(jù)以平均值±標準差表示。****P<0.001。隨機選擇至少10個視野(放大倍數(shù),×630)計數(shù)1.3.3TBI后小膠質(zhì)細胞自噬水平顯著上升,而亞低溫治療可以減弱這一效應(yīng)本研究通過免疫組織化學染色和高分辨率激光共聚焦顯微鏡觀察,通過統(tǒng)計不同組中,10個隨機高倍鏡視野下Iba-1/LC3和Iba-1/Beclin-1雙陽性細胞數(shù)的差異,評估TBI后24h大鼠腦內(nèi)損傷區(qū)皮質(zhì)與同側(cè)海馬中的小膠質(zhì)細胞自噬水
【參考文獻】:
期刊論文
[1]小膠質(zhì)細胞參與創(chuàng)傷性顱腦損傷過程的研究進展[J]. 康麗,李坪,于建云. 神經(jīng)解剖學雜志. 2012(04)
[2]小膠質(zhì)細胞活化對中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能的影響[J]. 賈濟,朱蕭玲,陳紹洋. 國際麻醉學與復(fù)蘇雜志. 2012 (01)
[3]小膠質(zhì)細胞Toll樣受體4信號轉(zhuǎn)導通路與中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷[J]. 孫振全,張詠梅. 國際腦血管病雜志. 2011 (12)
[4]小膠質(zhì)細胞的活化與細胞因子的研究進展[J]. 尹麗鶴,趙鋼. 神經(jīng)損傷與功能重建. 2008(06)
[5]創(chuàng)傷性顱腦損傷的流行病學概況[J]. 張小年,張皓,朱鏞連. 中國康復(fù)理論與實踐. 2005(12)
[6]顱腦外傷后繼發(fā)性腦損害發(fā)病機制的研究進展[J]. 毛青,江基堯. 中華神經(jīng)醫(yī)學雜志. 2005(02)
本文編號:3568736
【文章來源】:上海交通大學上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:58 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
損傷區(qū)皮質(zhì)及同側(cè)海馬HE染色Figure1-1HEstainingoftheinjuredcortexandipsilateralhippocampus.在TBI后24小時,SNG,SHG,TNG和THG大鼠的損傷區(qū)皮質(zhì)和同側(cè)海馬的HE染色(放大倍數(shù),×100)
上海交通大學碩士學位論文11圖1-2損傷區(qū)皮質(zhì)及同側(cè)海馬Iba-1陽性細胞免疫熒光分析Figure1-2ImmunofluorescenceanalysisofIba-1-positivecellsintheinjuredcortexandipsilateralhippocampus(a)損傷區(qū)皮質(zhì)Iba-1陽性細胞(白色箭頭)激光共聚焦照片。(放大倍數(shù),×630)(b)同側(cè)海馬Iba-1陽性細胞(白色箭頭)激光共聚焦照片。(放大倍數(shù),×630)(c)損傷區(qū)皮質(zhì)和同側(cè)海馬中Iba-1陽性細胞的數(shù)量統(tǒng)計。條形圖中的數(shù)據(jù)以平均值±標準差表示。****P<0.001。隨機選擇至少10個視野(放大倍數(shù),×630)計數(shù)本研究通過免疫組織化學染色和高分辨率激光共聚焦顯微鏡觀察,通過統(tǒng)計不同組中,10個隨機高倍鏡視野下cleavedcaspase3陽性細胞數(shù)的差異,評估TBI后24h大鼠腦內(nèi)損傷區(qū)皮質(zhì)與同側(cè)海馬中的神經(jīng)細胞總體凋亡程度的變化。在TBI后的24h,TNG組中大鼠腦內(nèi)損傷區(qū)皮質(zhì)與同側(cè)海馬中的cleavedcaspase3陽性細胞數(shù),較SNG組中的相應(yīng)腦區(qū)顯著增加,表明大鼠腦內(nèi)神經(jīng)細胞的總體凋亡水平顯著上升(TNG組:損傷區(qū)皮質(zhì):23.2±2.39,P<0.001;同側(cè)海馬:23.1±2.47,P<0.001)。而在亞低溫治療后,THG組中大鼠腦內(nèi)損傷區(qū)皮質(zhì)與同側(cè)海馬中的cleavedcaspase3陽性細胞數(shù),較TNG組中的相應(yīng)腦區(qū)顯著降低,表明大鼠腦內(nèi)神經(jīng)細胞的總體凋亡程度受到亞低溫治療的抑制(THG:損傷區(qū)
上海交通大學碩士學位論文12皮質(zhì):13.3±1.49,P<0.001;同側(cè)海馬:11.70±1.57,P<0.001)。SNG組和SHG組中的相關(guān)指標未見顯著差異。(圖1-3)圖1-3損傷區(qū)皮質(zhì)及同側(cè)海馬cleavedcaspase3陽性細胞免疫熒光分析Figure1-3Immunofluorescenceanalysisofcleavedcaspase3positivecellsintheinjuredcortexandipsilateralhippocampus(a)損傷區(qū)皮質(zhì)cleavedcaspase3陽性細胞(白色箭頭)激光共聚焦照片。(放大倍數(shù),×630)(b)同側(cè)海馬cleavedcaspase3陽性細胞(白色箭頭)激光共聚焦照片。(放大倍數(shù),×630)(c)損傷區(qū)皮質(zhì)和同側(cè)海馬中cleavedcaspase3陽性細胞的數(shù)量統(tǒng)計。條形圖中的數(shù)據(jù)以平均值±標準差表示。****P<0.001。隨機選擇至少10個視野(放大倍數(shù),×630)計數(shù)1.3.3TBI后小膠質(zhì)細胞自噬水平顯著上升,而亞低溫治療可以減弱這一效應(yīng)本研究通過免疫組織化學染色和高分辨率激光共聚焦顯微鏡觀察,通過統(tǒng)計不同組中,10個隨機高倍鏡視野下Iba-1/LC3和Iba-1/Beclin-1雙陽性細胞數(shù)的差異,評估TBI后24h大鼠腦內(nèi)損傷區(qū)皮質(zhì)與同側(cè)海馬中的小膠質(zhì)細胞自噬水
【參考文獻】:
期刊論文
[1]小膠質(zhì)細胞參與創(chuàng)傷性顱腦損傷過程的研究進展[J]. 康麗,李坪,于建云. 神經(jīng)解剖學雜志. 2012(04)
[2]小膠質(zhì)細胞活化對中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能的影響[J]. 賈濟,朱蕭玲,陳紹洋. 國際麻醉學與復(fù)蘇雜志. 2012 (01)
[3]小膠質(zhì)細胞Toll樣受體4信號轉(zhuǎn)導通路與中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷[J]. 孫振全,張詠梅. 國際腦血管病雜志. 2011 (12)
[4]小膠質(zhì)細胞的活化與細胞因子的研究進展[J]. 尹麗鶴,趙鋼. 神經(jīng)損傷與功能重建. 2008(06)
[5]創(chuàng)傷性顱腦損傷的流行病學概況[J]. 張小年,張皓,朱鏞連. 中國康復(fù)理論與實踐. 2005(12)
[6]顱腦外傷后繼發(fā)性腦損害發(fā)病機制的研究進展[J]. 毛青,江基堯. 中華神經(jīng)醫(yī)學雜志. 2005(02)
本文編號:3568736
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