第一部分褪黑素對人增生性瘢痕成纖維細胞DNA甲基化的影響目的:探討褪黑素對人增生性瘢痕成纖維細胞（HSFB）DNA甲基化的影響方法:1.收集人增生性瘢痕組織12例,組織塊法分離培養(yǎng)取第4代人增生性瘢痕成纖維細胞,用免疫細胞化學法（ICC）鑒定成纖維細胞。2.酶消化法消化細胞,接種于96孔板中,分別加入不同濃度褪黑素組(0、1x10^-5、1x10^-3、1mmol/L)。分組培養(yǎng)48h后,采用細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒（WST-1）檢測成纖維細胞增殖活性,倒置顯微鏡觀察其形態(tài)變化,選取合適濃度的褪黑素實驗組作為后續(xù)實驗組用藥濃度;3.實驗分成兩組:（1）對照組:細胞消化傳代后,加入4ml FBS,培養(yǎng)48h;（2）褪黑素組:細胞消化傳代后,加入含有褪黑素濃度為10^-3mmol/L的10%FBS 4ml,培養(yǎng)48小時后收集細胞;采用熒光定量聚合酶反應（realtime fluorescence quantitative PCR,RT-PCR）和免疫印跡法（Western Blot）檢測對照組與褪黑素組間成纖維細胞DNMT1 ... 

【文章來源】：暨南大學廣東省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

人增生性瘢痕成纖維細胞形態(tài)及鑒定（倒置相差顯微鏡x10A：組織塊法培養(yǎng)成纖維

暨南大學碩士學位論文16圖2不同濃度褪黑素對成纖維細胞形態(tài)的影響（倒置相差顯微鏡x10A：對照組B：1x10-5mmol/L褪黑素C:1x10-3mmol/L褪黑素D:1mmol/L褪黑素）3.褪黑素對增生性瘢痕成纖維細胞增殖的影響WST-1結(jié)果顯示：（1）對照組和褪黑素濃度為1x10-5mmol/L組相比，成纖維細胞的增殖活力無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；（2）與對照組相比，褪黑素濃度為1x10-3、1mmol/L對人瘢痕成纖維細胞的增殖具有抑制作用，成纖維細胞增殖活力明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；（3）褪黑素濃度為1mmol/L與濃度為1x10-5、1x10-3mmol/L的褪黑素組相比，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05。根據(jù)實驗結(jié)果所示，選取濃度為10-3mmol/L作為后續(xù)實驗組用藥濃度（如圖2，表2，圖3）；

表 3 褪黑素對 HSFB 中 DNMT1 mRNA 表達的影響（n=10，x±s）組別 DNMT1 mRNA 表達量對照組 1.00±0.082褪黑素組 1.86±0.094** 與對照組比較，P＜0.05

【參考文獻】：
期刊論文
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[6]深Ⅱ度燒傷早期及愈后增生性瘢痕組織中p16基因表達的甲基化調(diào)控[J]. 姚慶君,陳璧,胡大海,徐明達,董茂龍,王樹森.  第四軍醫(yī)大學學報. 2005(04)

博士論文
[1]褪黑素對神經(jīng)干細胞分化命運的影響及表觀遺傳學機制研究[D]. 李羨.山東大學 2017

碩士論文
[1]褪黑激素對增生性瘢痕形成影響的動物實驗研究[D]. 武明偉.暨南大學 2014
[2]褪黑激素對增生性瘢痕成纖維細胞轉(zhuǎn)化的影響及機制研究[D]. 杜高偉.暨南大學 2013
[3]褪黑素與增生性瘢痕關(guān)系的研究[D]. 張俊成.暨南大學 2010



本文編號：3538540