目的:建立CLARITY技術(shù)所需實驗平臺,并探索通過CLARITY技術(shù)制備透明腸組織所需要的實驗條件,建立可靠的透明腸組織的制備方法;通過對CLARITY技術(shù)制備的透明腸組織結(jié)構(gòu)的觀察,探討該技術(shù)用于胃腸動力領(lǐng)域研究的可行性。方法:1.CLARITY技術(shù)實驗平臺的建立所需儀器主要包括通風櫥、氮氣罐、真空泵、4℃冰箱、水浴箱、電泳槽、鉑電極、恒溫攪拌反應(yīng)浴、蠕動泵、電泳儀、標本盒、分流器和過濾器等,其中電泳設(shè)備的主要由電泳槽、鉑電極、恒溫攪拌反應(yīng)浴、蠕動泵、電泳儀等通過橡膠軟管路及電路連接組成。12.取7周齡熒光小鼠8只,分為對照組（A組）、實驗組（B組）兩組,A組為采用傳統(tǒng)小鼠組織切片;B組采用CLARITY技術(shù)制備小鼠透明組織。A組,截取長約2mm十二指腸遠端標本,4%多聚甲醛固定。將組織塊經(jīng)冰凍后,沿垂直于小腸長軸方向進行連續(xù)切片,觀察組織切片結(jié)構(gòu)。B組小鼠行水凝膠心臟灌注、胃腸組織水凝膠包埋、水凝膠電泳、折射率均勻化,通過雙光子顯微鏡觀察組織結(jié)構(gòu)。結(jié)果:1.通過參考相關(guān)文獻購買所需實驗器材,構(gòu)建并完善CLARITY技術(shù)實驗平臺,探索成熟的透明組織制備方法。2.兩組標本制備完成后,... 

【文章來源】：蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

CLARITY技術(shù)步驟示意圖

電泳設(shè)備A為恒溫攪拌反應(yīng)浴，B為蠕動泵，C為電泳儀

蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文 CLARITY 技術(shù)設(shè)備的構(gòu)建及其用于腸道組織結(jié)構(gòu)的研究7） 橡膠軟管及電線：橡膠軟管需耐高溫及腐蝕，用于 SDS 洗滌液與電泳槽之間的流通；電線及鱷魚夾用于電泳儀及電泳槽之間的連接。8） 分流器和過濾器：過濾器用于對緩沖液及標本雜質(zhì)的過濾。分流器則用于對緩沖液的分流，以便多個標本同時進行電泳。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]胃腸運動失調(diào)性疾病中Cajal間質(zhì)細胞功能失調(diào)機制研究進展[J]. 董方,賀晨宇,商建峰,陳東.  中華病理學(xué)雜志. 2017 (11)
[2]生物組織光學(xué)透明技術(shù)研究進展[J]. 李亞敏,薛成志,李貴葉,胡章立,阮雙琛,陳玲玲.  生物學(xué)雜志. 2017(06)
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本文編號：3538007