目的研究不同濃度右美托咪定對糖氧剝奪/再灌注（OGD/R）誘導神經(jīng)細胞凋亡的保護作用。方法應用全反式維甲酸（ATRA）和十四烷酰佛波醇乙酯酸（TPA）序貫誘導人源性神經(jīng)母細胞瘤（SH-SY5Y）分化為神經(jīng)細胞,均分為六組。選擇OGD12h/R12h構建OGD/R模型。D0、D1、D2、D3、D4、D5組在OGD開始即刻分別加入右美托咪定0、0.1、1、10、100、1 000μmol/L。于再灌注12h后,采用MTT法檢測細胞存活率,流式細胞凋亡法檢測細胞凋亡水平,以觀察不同濃度右美托咪定對OGD/R誘導神經(jīng)細胞凋亡的保護作用。隨后選擇保護效果確切組,應用Westernblot法檢測內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（endoplasmic reticulum,ER）應激特異性蛋白-中腦星形膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（mesencephalic astrocyte-derived neurotrophic factor,MANF）含量以及促凋亡蛋白Caspase-3活性和CHOP含量。結果與D0組比較,D1、D2組細胞存活率和細胞凋亡率差異無統(tǒng)計學意義;D4、D5組細胞存活率明顯下降,細胞凋亡率明顯升高（P<... 

【文章來源】：臨床麻醉學雜志. 2017,33(08)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：4 頁

【部分圖文】：

ａＰ＜０．０１圖１Ｄ０組與Ｄ３組神經(jīng)細胞ＭＡＮＦ、ｃａｓｐａｓｅ－３與ＣＨＯＰ表達水平的比較注：與Ｄ０組

蕊J‘砂n3組

ＭＡＮＦ及促凋亡蛋白的關系。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法檢測顯示：與Ｄ０組比較，右美托咪定１０μＭ明顯上調(diào)了ＭＡＮＦ的表達（Ｐ＜０．０１），并抑制了促凋亡蛋白ｃａｓｐａｓｅ－３和ＣＨＯＰ的表達（Ｐ＜０．０１）（圖１）。注：與Ｄ０組比較，ａＰ＜０．０１圖１Ｄ０組與Ｄ３組神經(jīng)細胞ＭＡＮＦ、ｃａｓｐａｓｅ－３與ＣＨＯＰ表達水平的比較Ｄ３組細胞存活率明顯高于，細胞凋亡率明顯低于Ｄ０組（Ｐ＜０．０１），Ｄ４、Ｄ５組細胞存活率明顯低于，細胞凋亡率明顯高于Ｄ０組（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）（表１，圖２）。表１六組ＯＧＤ／Ｒ后神經(jīng)細胞的存活率和凋亡率的比較（％）組別存活率凋亡率Ｄ０組５２．１５±０．９６４８．５５±１．５９Ｄ１組５１．７２±１．９６４８．３４±１．１８Ｄ２組５１．９７±０．３９５２．２１±０．９４Ｄ３組６４．７８±２．７６ａ３１．０９±０．８３ａＤ４組４５．６９±２．３０ｂ６１．２８±１．３１ａＤ５組１９．９３±４．２２ａ９６．８７±１．３８ａ注：與Ｄ０組比較，ａＰ＜０．０１，ｂＰ＜０．０５討論近些年來關于右美托咪定的神經(jīng)保護作用報道很多［８］，但具體的細胞水平的作用機制仍不明確。本研究根據(jù)以往的研究方法［６，９］，通過ＡＴＲＡ與ＴＰＡ序貫成功誘導ＳＨ－ＳＹ５Ｙ分化為成熟神經(jīng)元細胞表型，繼而以細胞實驗先期剝奪糖氧，后期再灌圖２ＯＧＤ／Ｒ后流式細胞凋亡檢測結果注復氧的ＯＧＤ／Ｒ模型模擬臨床缺血－再灌

【參考文獻】：
期刊論文
[1]中腦星形膠質(zhì)細胞來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子對糖氧剝奪/再灌注誘導的SH-SY5Y細胞損傷的保護作用[J]. 孫瑞,劉珺,沈玉君,沙曼琪,徐勝春,沈玉先.  中國藥理學通報. 2015(06)
[2]MANF對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激誘導的細胞凋亡的保護作用[J]. 陳瀅,李成錦,楊文,程里,安然,都建,沈玉君,馮利杰,沈玉先.  安徽醫(yī)科大學學報. 2013(11)
[3]體外誘導SH-SY5Y細胞凋亡的氧糖剝離再灌注模型的建立及評價[J]. 劉守躍,張影,胡林森,羅毅男,關文明.  吉林大學學報(醫(yī)學版). 2012(04)



本文編號：3511967