本文關(guān)鍵詞：艾拉光動(dòng)力聯(lián)合丹參對(duì)增生性瘢痕療效及機(jī)制的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究目的:觀察艾拉光動(dòng)力(5-Aminolevulinic acid photodynamic therapy,ALA-PDT)聯(lián)合丹參對(duì)于增生性瘢痕(Hyperplastic scar)來(lái)源的成纖維細(xì)胞(Fibroblast,FB)以及血管內(nèi)皮細(xì)胞(Vascular endothelial cell,VEC)的影響,以探討艾拉光動(dòng)力聯(lián)合丹參對(duì)增生性瘢痕的療效及機(jī)制。研究方法:1、收集增生性瘢痕的臨床標(biāo)本:本次實(shí)驗(yàn)研究所用標(biāo)本取自云南省第一人民醫(yī)院皮膚科符合瘢痕臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)的12例患者切除的瘢痕組織,取瘢痕組織進(jìn)行HE染色并于顯微鏡下觀察,證實(shí)與臨床診斷相一致。2、分離、培養(yǎng)增生性瘢痕來(lái)源的FB和VEC,選取生長(zhǎng)狀態(tài)較好的同代對(duì)數(shù)期FB和VEC用于實(shí)驗(yàn)研究。3、實(shí)驗(yàn)分組:丹參注射液取1.5mg/ml、3mg/ml、6mg/ml、12mg/ml以及24mg/ml五個(gè)濃度,激光取5J/cm2,10J/cm2,50J/cm2,100J/cm2,150J/cm2五個(gè)照射劑量,5-氨基酮戊酸(5-Aminolevulinic acid,ALA)取0.015mmol/L,0.15mmol/L,1.5mmol/L,15mmol/L,150mmol/L,1500mmol/L六個(gè)濃度,分別作用于FB和VEC,在酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀上選取490nm波長(zhǎng)測(cè)量各個(gè)測(cè)量孔的OD值,找到丹參注射液、ALA的最佳作用濃度和激光的最佳照射劑量。在最佳藥物濃度聯(lián)合最佳激光照射劑量作用于FB和VEC,通過(guò)倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài),在酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀選取490nm波長(zhǎng)測(cè)量各個(gè)測(cè)量孔的OD值。4、取上清液通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)測(cè)定α-SMA、TGF-β1、VEGF的濃度變化。采用蛋白免疫印跡(Western Blotting)法檢測(cè)TGF-β1、α-SMA蛋白含量的變化。5、SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)計(jì)量資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,均以P0.05為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:丹參注射液抑制增生性瘢痕FB增殖的最佳濃度為12mg/ml,抑制增生性瘢痕VEC增殖的最佳濃度為6mg/ml。激光對(duì)增生性瘢痕FB和VEC作用的最佳光照劑量均為100J/cm2。ALA對(duì)增生性瘢痕FB和VEC作用的最佳藥物濃度均為1.5mmol/L。ALA-PDT聯(lián)合丹參組作用于增生性瘢痕FB的OD490nm值為0.51±0.02,ALA-PDT聯(lián)合丹參組作用于增生性瘢痕VEC的OD490nm值為0.62±0.02,ALA-PDT聯(lián)合丹參組對(duì)增生性瘢痕FB和VEC的抑制作用均明顯高于丹參組、ALA單獨(dú)處理組和激光單獨(dú)處理組(P0.01)。丹參組、ALA單獨(dú)處理組、激光單獨(dú)處理組和ALA-PDT聯(lián)合丹參組均能抑制α-SMA、TGF-β1、VEGF的分泌。ALA-PDT聯(lián)合丹參組α-SMA濃度為19.60±1.68 ng/ml,TGF-β1濃度為13.47±0.25 pg/ml,VEGF濃度為54.63±1.42 pg/ml。ALA-PDT聯(lián)合丹參組對(duì)α-SMA、TGF-β1、VEGF分泌的抑制作用明顯高于空白對(duì)照組、丹參組、ALA單獨(dú)處理組和激光單獨(dú)處理組(P0.01)。丹參組、ALA單獨(dú)處理組、激光單獨(dú)處理組和ALA-PDT聯(lián)合丹參組均能減少α-SMA、TGF-β1蛋白的合成量。在ALA-PDT聯(lián)合丹參作用下,α-SMA蛋白含量下調(diào)81%,TGF-β1蛋白含量下調(diào)64%,ALA-PDT聯(lián)合丹參組α-SMA、TGF-β1蛋白合成量明顯低于空白對(duì)照組、丹參組、ALA單獨(dú)處理組和激光單獨(dú)處理組。結(jié)論:1、艾拉光動(dòng)力聯(lián)合丹參能夠改變體外培養(yǎng)的增生性瘢痕來(lái)源的FB的形態(tài),并能抑制FB的增殖,其干預(yù)效果有一定的濃度依賴(lài)性。2、艾拉光動(dòng)力聯(lián)合丹參能夠改變體外培養(yǎng)的增生性瘢痕來(lái)源的VEC的形態(tài),并能抑制VEC的增殖,其干預(yù)效果有一定的濃度依賴(lài)性。3、艾拉光動(dòng)力聯(lián)合丹參能夠抑制α-SMA、TGF-β1、VEGF的分泌。4、艾拉光動(dòng)力聯(lián)合丹參能夠減少α-SMA和TGF-β1蛋白合成量。5、艾拉光動(dòng)力聯(lián)合丹參能夠?qū)υ錾择：郛a(chǎn)生較好的療效。
【關(guān)鍵詞】：艾拉光動(dòng)力 丹參 增生性瘢痕 療效研究 機(jī)制研究
【學(xué)位授予單位】：云南中醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R622
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 英文縮略詞一覽表10-11
• 引言11-15
• 第一部分艾拉光動(dòng)力聯(lián)合丹參對(duì)增生性瘢痕的療效及機(jī)制研究15-49
• 一、實(shí)驗(yàn)材料15-17
• 二、實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果17-43
• 1.目的17
• 2.實(shí)驗(yàn)方法17-24
• 3.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理24
• 4.實(shí)驗(yàn)結(jié)果24-43
• 三、討論43-48
• 四、結(jié)論48-49
• 參考文獻(xiàn)49-54
• 第二部分 本課題國(guó)內(nèi)外目前研究狀況(文獻(xiàn)綜述)54-60
• 參考文獻(xiàn)58-60
• 附錄60-65
• 攻讀學(xué)位期間論文發(fā)表及參與課題情況65-66
• 致謝66-67
• 附件67-72

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本文編號(hào)：304506