慢病毒介導(dǎo)骨形態(tài)發(fā)生蛋白2轉(zhuǎn)染兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞粘附脫鈣骨基質(zhì)修復(fù)股骨大段缺損
發(fā)布時(shí)間:2020-07-12 00:47
【摘要】:目的:研究兔股骨大段缺損中植入慢病毒介導(dǎo)人骨形態(tài)發(fā)生蛋白2轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞粘附脫鈣骨基質(zhì)后的修復(fù)效果,探尋修復(fù)股骨大段缺損的新途徑。方法:選取48只新西蘭大白兔,股骨中段截骨鋼板內(nèi)固定法制備兔左側(cè)股骨大段缺損模型。造模成功后,隨機(jī)分成A、B、C、D組,每組12只。A組無修復(fù)材料植入,B、C、D分別植入脫鈣骨基質(zhì)、脫鈣骨基質(zhì)/BMSCs、慢病毒載體介導(dǎo)hBMP-2/BMSCs/脫鈣骨基質(zhì)。造后2、4、8及12周各組分別處死3只兔子,通過蘇木精-伊紅染色技術(shù)、生物力學(xué)分析、X射線技術(shù)評(píng)價(jià)股骨大段缺損修復(fù)的情況。結(jié)果:(1)X射線示A、B、C、D組均有不同的骨痂修復(fù)形成,且Lane-Sandhu X射線評(píng)分ABCD組(P0.05);(2)生物力學(xué)分析結(jié)果表明造模后8、12周時(shí)C、D組組間及同正常股骨比較,均有顯著意義(P0.05);(3)蘇木精-伊紅染色顯示A組可見少量排列紊亂的骨小梁和大量的纖維組織;B組脫鈣骨基質(zhì)支架已降解,可見部分排列紊亂的骨小梁和大量的纖維組織;C組骨小梁已基本連接成線,開始塑形為皮質(zhì)骨,髓腔再通不明顯;D組已基本形成新的骨皮質(zhì),有髓腔再通。結(jié)論:骨缺損區(qū)域植入慢病毒載體介導(dǎo)hBMP-2/BMSCs/脫鈣骨基質(zhì)后能夠促進(jìn)骨傳導(dǎo)、骨誘導(dǎo)和骨生成,對(duì)兔股骨大段缺損有較好的修復(fù)效果。
【學(xué)位授予單位】:桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號(hào)】:R687.3
【圖文】:
圖 1 三點(diǎn)彎曲試驗(yàn)的股骨標(biāo)本Fig. 2 three point bending of the femur specimen1.2.6 蘇木精-伊紅染色分別于造模后 2、4、8、12 周骨標(biāo)本中段 20mm 長(zhǎng)標(biāo)本(C、D不嚴(yán)重,故不影響其 HE 染色),EDTA 脫鈣液中脫鈣 30d,梯度乙片,行蘇木精-伊紅染色。于顯微鏡骨標(biāo)本修復(fù)區(qū)域支架材料降解程度1.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
見圖 2C;D 組骨痂開始塑形,部分多余骨痂被吸收,髓腔再通;D 組骨缺損修復(fù)完成,見圖2D。A、B、C、D 組 4、8、12 周的 Lane-Sandhu X 射線評(píng)分均有顯著差異(P < 0.05),D 組 2 周的 Lane-Sandhu X 射線評(píng)分與 A、B、C 組相比有明顯差異(P < 0.05),見表 1。提示在兔股骨大段缺損修復(fù)中慢病毒介導(dǎo) hBMP-2/BMSCs/脫鈣骨基質(zhì)效果優(yōu)于單純脫鈣骨基質(zhì)和 BMSCs/脫鈣骨基質(zhì)。隨時(shí)間推移,各組 Lane-Sandhu X 射線評(píng)分依次增高,提示骨缺損的修復(fù)有一定的時(shí)間依賴性。4 周8 周12 周A B C D圖 2 造模后 4/8 和 12 周各組兔股骨 X 射線結(jié)果Fig. 2 X-ray observation at 4、8、12 weeks after operation
A 組 B 組 C 組 D 組 圖 3 造模后各時(shí)間點(diǎn)每組兔股骨標(biāo)本組織學(xué)觀察(蘇木Fig. 3 Observation of bone trabeculars after 4、8、12 we圖注:圖中“*”示纖維組織,“▲”示骨小梁,“●”示髓腔。3 討論在以往的骨缺損修復(fù)實(shí)驗(yàn)中,研究者骨或脛骨缺損、兔股骨缺損中植入帶有間玻璃等組織工程骨對(duì)缺損進(jìn)行修復(fù),并取同時(shí)存在支架材料降解的問題[19-21]。在外者將其直接負(fù)載在支架材料上或者將目的
本文編號(hào):2751172
【學(xué)位授予單位】:桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號(hào)】:R687.3
【圖文】:
圖 1 三點(diǎn)彎曲試驗(yàn)的股骨標(biāo)本Fig. 2 three point bending of the femur specimen1.2.6 蘇木精-伊紅染色分別于造模后 2、4、8、12 周骨標(biāo)本中段 20mm 長(zhǎng)標(biāo)本(C、D不嚴(yán)重,故不影響其 HE 染色),EDTA 脫鈣液中脫鈣 30d,梯度乙片,行蘇木精-伊紅染色。于顯微鏡骨標(biāo)本修復(fù)區(qū)域支架材料降解程度1.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
見圖 2C;D 組骨痂開始塑形,部分多余骨痂被吸收,髓腔再通;D 組骨缺損修復(fù)完成,見圖2D。A、B、C、D 組 4、8、12 周的 Lane-Sandhu X 射線評(píng)分均有顯著差異(P < 0.05),D 組 2 周的 Lane-Sandhu X 射線評(píng)分與 A、B、C 組相比有明顯差異(P < 0.05),見表 1。提示在兔股骨大段缺損修復(fù)中慢病毒介導(dǎo) hBMP-2/BMSCs/脫鈣骨基質(zhì)效果優(yōu)于單純脫鈣骨基質(zhì)和 BMSCs/脫鈣骨基質(zhì)。隨時(shí)間推移,各組 Lane-Sandhu X 射線評(píng)分依次增高,提示骨缺損的修復(fù)有一定的時(shí)間依賴性。4 周8 周12 周A B C D圖 2 造模后 4/8 和 12 周各組兔股骨 X 射線結(jié)果Fig. 2 X-ray observation at 4、8、12 weeks after operation
A 組 B 組 C 組 D 組 圖 3 造模后各時(shí)間點(diǎn)每組兔股骨標(biāo)本組織學(xué)觀察(蘇木Fig. 3 Observation of bone trabeculars after 4、8、12 we圖注:圖中“*”示纖維組織,“▲”示骨小梁,“●”示髓腔。3 討論在以往的骨缺損修復(fù)實(shí)驗(yàn)中,研究者骨或脛骨缺損、兔股骨缺損中植入帶有間玻璃等組織工程骨對(duì)缺損進(jìn)行修復(fù),并取同時(shí)存在支架材料降解的問題[19-21]。在外者將其直接負(fù)載在支架材料上或者將目的
【參考文獻(xiàn)】
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1 陳佳濱;李強(qiáng);茹嘉;武成聰;寧寅寬;蔡偉良;;腺病毒介導(dǎo)BMP-2和EGFP基因轉(zhuǎn)染兔骨髓基質(zhì)干細(xì)胞及種植脫鈣骨的體外觀察[J];中國(guó)骨質(zhì)疏松雜志;2014年08期
2 陳佳濱;武成聰;李強(qiáng);茹嘉;寧寅寬;蔡偉良;;轉(zhuǎn)基因技術(shù)及骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在骨缺損修復(fù)中的應(yīng)用與展望[J];臨床醫(yī)學(xué)工程;2013年11期
3 李強(qiáng);孫正義;嚴(yán)冬雪;劉文忠;姚新德;;脫鈣骨基質(zhì)材料的生物學(xué)表現(xiàn):降解性能、孔隙率及其黏附性能特征[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2007年31期
本文編號(hào):2751172
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