【摘要】：糖尿病創(chuàng)面的延遲愈合及不愈合一直是醫(yī)學尚未攻克的難題,針對這類難愈性創(chuàng)面,目前臨床上正需要一種敷料,在早期覆蓋創(chuàng)面同時能促進創(chuàng)面內新生血管生成,促進創(chuàng)面愈合。甲磺酸去鐵胺作為一種鐵離子螯合劑在促軟組織修復方面具有一定潛力,但目前在創(chuàng)面修復領域運用較少,且具體效果及作用機制尚不明朗。本研究成功制備了以海藻酸鈉SA為主鏈,甲磺酸去鐵胺DFO為側鏈的改性海藻酸鈉SA-DFO,研究了其基本性質,自修復行為,同時分別通過體內和體外實驗評估其對創(chuàng)面愈合的作用。在SA-DFO制備中分別給予不同量的DFO會影響其支鏈數,我們按制備時加入SA與DFO不同的比例將SA-DFO分為三組:SA-DFO1(SA:DFO=10:3),SA-DFO2(SA:DFO=5:2),SA-DFO3(SA:DFO=2:1)。三組SA-DFO遇水后均會快速形成凝膠狀,該水凝膠具有自我修復功能的同時能緩慢釋放其側鏈DFO。在體外實驗中,我們證實此水凝膠的釋放產物對人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)、骨髓來源間充質干細胞(BMSC)與小鼠成纖維細胞(L929)不具有細胞毒性且對HUVEC具有一定促生長作用,同時凝膠釋放產物有助于HUVEC、BMSC與L929的遷移,HUVEC的成管作用,創(chuàng)面修復相關生長因子的釋放,以及促進成纖維細胞與內皮細胞成血管相關基因的表達。體外實驗中,我們通過腹腔注射鏈脲佐菌素誘導SD大鼠糖尿病模型,之后于其背部切取2*2cm的全層皮膚缺損建立糖尿病創(chuàng)面模型,再分別予以各組處理。結果證實SA-DFO水凝膠處理的糖尿病創(chuàng)面,創(chuàng)面愈合程度明顯優(yōu)于海藻酸鈉組與空白組,同時創(chuàng)緣組織中肉芽組織形成、成熟,上皮再生,新生血管發(fā)生情況均優(yōu)于海藻酸鈉組與空白組。此外,體內外實驗結果皆顯示三組SA-DFO中SA-DFO2水凝膠各項結果最優(yōu)。這些結果說明載甲磺酸去鐵胺海藻酸鈉水凝膠在兼顧創(chuàng)面覆蓋的同時確實有利于糖尿病皮膚全層缺損創(chuàng)面新生血管生成及創(chuàng)面的愈合,且三組SA-DFO水凝膠中以SA-DFO2水凝膠為相對最佳藥物釋放濃度。相信這一結果可推動SA-DFO水凝膠敷料的后續(xù)臨床研究與推廣,也為載藥水凝膠敷料在軟組織創(chuàng)面修復中的運用作出一份貢獻。
【學位授予單位】：上海交通大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R587.2;R641
【圖文】：

上海交通大學博士學位論文的SA-DFO水凝膠,取面積1cm2的水凝膠左右置于載玻片上,沿中線切開后再次合攏,等待 30 min 后浸泡至-196℃的液氮中進行冷凍,凍干后得到 SA-DFO 水凝膠自修復后的形貌。2.3 結果與討論2.3.1 載甲磺酸去鐵胺海藻酸鈉水凝膠的制備SA-DFO 的合成方法采用的是酰胺化法（圖 2-1），調低溶液的 pH 有助于酰胺化反應的進行。合成的 SA-DFO 分子結構中，SA 為主鏈，DFO 為側鏈。SA-DFO 大體外觀呈白色纖維狀，遇水半小時內可成透明凝膠狀，即完成載甲磺酸去鐵胺海藻酸鈉水凝膠的制備。SA-DFO 合成時若 DFO 量低于 SA-DFO1 的，則產物遇水不能成膠。

圖 2-2 SA-DFO 水凝膠及 CaAlg 水凝膠的截斷破壞-愈合實驗(a)SA-DFO(b)CaAlgFig.2-2 Cut broken-recovery experiments of SA-DFA hydrogel and CaAlg hydrogel2.3.4 載甲磺酸去鐵胺海藻酸鈉水凝膠掃描電子顯微鏡測試圖2-3是不同SA-DFO 水凝膠樣品自修復前后的 SEM 照片,展示了其自修復前后的微觀形貌。其中圖 2-3(a,c,e)是 SA-DFO1、SA-DFO2、SA-DFO3 水凝膠自修復前的照片,圖 2-3(b,d,f)則是 SA-DFO1、SA-DFO2、SA-DFO3 水凝膠自修復后的照片。從圖 2-3 中可以看出,SA-DFO 水凝膠在電鏡下成纖維編織狀結構，纖維直徑約 80-15μm，且隨著 SA-DFO 水凝膠合成時 DFO 的增加，纖維越粗，排列越疏松無序。在凝膠自修復過程之前,可見三組照片中均有裂縫,寬度在 200-500μm 不等。復拼接半小時后,SA-DFO 水凝膠電鏡照片中的裂縫基本消失，但微觀下可見三組水凝膠修復情況亦存差異性。SA-DFO1 展現(xiàn)出最好的自修復能力，其自修復后電鏡照片顯示凝膠材料微觀形貌基本恢復平整且連續(xù)。SA-DFO2 材料表面仍可見數道細小裂紋，說明SA-DFO2 修復能力稍弱。而 SA-DFO3 材料表面仍具有較多不規(guī)則連接，可見其自

【參考文獻】

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本文編號：2721707