【摘要】：目的:建立兔下肢缺血模型,應(yīng)用自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化為的血管內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞,聯(lián)合半乳糖凝集素-3移植于下肢缺血模型中,觀察下肢缺血模型中血管新生的效果,探討自體血管內(nèi)皮細(xì)胞移植治療兔下肢缺血的可行性。方法:(1)采用骨髓穿刺的方法在16只新西蘭大白兔右下肢獲取骨髓標(biāo)記并記錄,密度梯度離心聯(lián)合貼壁培養(yǎng)法分離純化得到骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,采用第3代生長(zhǎng)性狀穩(wěn)定的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,VEGF聯(lián)合bFGF定向誘導(dǎo)分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD_(31)和vWF的表達(dá)率。(2)采用新西蘭大白兔左下肢髂總動(dòng)脈部結(jié)扎的方法建立新西蘭大白兔左下肢缺血模型(3)將建立下肢缺血模型的16只新西蘭大白兔隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組(n=8)和對(duì)照組(n=8),在缺血模型建立后第16天,在缺血下肢均勻選取15個(gè)點(diǎn),實(shí)驗(yàn)組注射自體血管內(nèi)皮細(xì)胞及半乳糖凝集素-3,對(duì)照組注射生理鹽水,3周后行DSA造影觀察缺血下肢血管。(4)造影結(jié)束后處死新西蘭大白兔并留取缺血下肢標(biāo)本,HE染色并計(jì)數(shù)毛細(xì)血管密度及毛細(xì)血管數(shù)/肌纖維數(shù)比值。結(jié)果:(1)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD_(31)表達(dá)率為97.3±0.8%,vWF表達(dá)率為95.7%±1.1%,新西蘭大白兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成功定向分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞。(2)DSA造影顯示實(shí)驗(yàn)組下肢血管明顯多于對(duì)照組(P0.05)。(3)HE染色結(jié)果實(shí)驗(yàn)組毛細(xì)血管密度及毛細(xì)血管數(shù)/肌纖維數(shù)比值均高于對(duì)照組(P0.05)。結(jié)論:(1)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞可以定向分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞作為組織工程的種子細(xì)胞。(2)自體血管內(nèi)皮細(xì)胞聯(lián)合半乳糖凝集素-3移植比對(duì)照組更多的介導(dǎo)缺血下肢的新生血管生成。
【圖文】：

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本文編號(hào)：2610956