【摘要】：目的:采用SD大鼠建立手術(shù)腦損傷(SBI)模型。模型建立后向胸腺內(nèi)分別注射抗原卵清蛋白(OVA)或髓鞘堿性蛋白(MBP)擬誘導(dǎo)免疫耐受,以治療SBI所致的繼發(fā)性腦損傷。探討胸腺內(nèi)注射“旁觀者抗原”O(jiān)VA擬誘導(dǎo)免疫耐受經(jīng)“旁觀者抑制效應(yīng)”途徑治療SBI所致的繼發(fā)性腦損傷的療效。探討胸腺內(nèi)注射腦抗原MBP擬誘導(dǎo)免疫耐受治療手術(shù)腦損傷所致的繼發(fā)性腦損傷的療效,并比較兩種治療效果的優(yōu)劣。方法:采用隨機法將32只雄性SD大鼠(體重270~300g)分為4組,每組8只。A組:SBI+胸腺內(nèi)注射OVA組(OVA組);B組:SBI+胸腺內(nèi)注射MBP組(MBP組);C組:SBI+胸腺內(nèi)注射生理鹽水組(對照組);D組:假手術(shù)組。各組SD大鼠于SBI后第1、3、7、14、21 d,采用ELISA檢測血清促炎因子IL-2、抗炎因子IL-4;流式細(xì)胞儀檢測血CD4+T/CD8+T細(xì)胞比值;行改良大鼠神經(jīng)功能評分(MNSS);頭MRI檢測腦水腫體積。SBI后第21 d做腦切片F(xiàn)as L免疫組化,腦切片TUNEL熒光染色。結(jié)果:1、胸腺內(nèi)注射OVA建立免疫耐受與對照組相比,OVA組IL-2濃度在SBI后第3、7、14 d下降(P0.05);而IL-4濃度在SBI后第7、14 d升高(P0.05)。OVA組CD4+T/CD8+T細(xì)胞比值在SBI后第7、14 d與對照組比較降低(P0.05),且OVA組CD4+T/CD8+T細(xì)胞比值在SBI后第3、7、14 d持續(xù)降低。與對照組相比,SBI后第21 d OVA組大鼠腦細(xì)胞Fas L表達(dá)量增加(P0.05)且腦細(xì)胞凋亡比例降低(P0.05)。與對照組相比,OVA組腦水腫體積在SBI后第14、21 d減小(P0.05)。與對照組相比,OVA組大鼠MNSS評分僅在SBI后第14d降低(P0.05)。2、胸腺內(nèi)注射MBP建立免疫耐受與對照組相比,在SBI后第3、7、14 d,MBP組IL-2濃度降低、IL-4濃度升高(P0.05)。MBP組CD4+T/CD8+T細(xì)胞比值與對照組對比,在SBI后第7、14 d下降(P0.05),并且在SBI后第3、7、14 d,MBP組CD4+T/CD8+T細(xì)胞比值持續(xù)下降。與對照組比較,SBI后第21 d,MBP組腦細(xì)胞Fas L表達(dá)量增加(P0.05),并且腦細(xì)胞凋亡比例下降(P0.05)。與對照組比較,MBP組大鼠腦水腫體積在3、7、14、21 d降低(P0.05)。MBP組大鼠MNSS評分在SBI后3、7、14、21 d低于對照組(P0.05)。3、胸腺內(nèi)注射OVA或MBP建立免疫耐受的強度及療效對比(1)、兩種抗原誘導(dǎo)建立疫耐受的強度OVA組和MBP組在SBI后第3、7、14 d分別與對照組相比,前2者都能降低IL-2濃度(P0.05);OVA組在SBI后第7、14 d與對照組相比能提高IL-4濃度(P0.05);MBP組在SBI后第3、7、14 d與對照組比較能升高IL-4濃度(P0.05)。與對照組比較,OVA組、MBP組CD4+T/CD8+T細(xì)胞比值都在SBI后7、14 d降低(P0.05)。因此,兩種抗原對降低促炎因子、升高抗炎因子、降低CD4+T/CD8+T細(xì)胞比值的水平?jīng)]有統(tǒng)計學(xué)差異(P㧐0.05)。(2)、兩種抗原治療SBI的效果OVA組、MBP組在SBI后第21 d大鼠腦細(xì)胞Fas L表達(dá)量與對照組比較都增高(P0.05),且MBP組Fas L表達(dá)量明顯大于OVA組(P0.05)。與對照組比較,OVA組、MBP組TUNEL示SBI后第21 d腦細(xì)胞凋亡比例降低(P0.05),且MBP組腦細(xì)胞凋亡比例低于OVA組(P0.05)。與對照組比較,OVA組腦水腫體積在SBI后第14、21d減小(P0.05)。MBP組腦水腫體積在SBI后第3、7、14、21 d減小(P0.05)。MBP組腦水腫體積在SBI后第3、7、14、21 d小于OVA組(P0.05)。在SBI后第14 d,OVA組與對照組比較大鼠MNSS評分降低(P0.05)。MBP組大鼠MNSS在SBI后第3、7、14、21d低于對照組(P0.05)。MBP組大鼠MNSS在SBI后第3、7 d低于OVA組(P0.05)。結(jié)論:1、開顱手術(shù)可促進(jìn)炎癥反應(yīng),增強免疫反應(yīng),進(jìn)而導(dǎo)致腦細(xì)胞凋亡,導(dǎo)致腦水腫,加重神經(jīng)功能障礙。胸腺內(nèi)注射“旁觀者抗原”O(jiān)VA可致誘導(dǎo)免疫耐受,通過免疫耐受的“旁觀者抑制效應(yīng)”途徑降低炎癥反應(yīng)及過度的免疫反應(yīng),進(jìn)而減輕腦水腫,促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)。2、與本課題組前期研究結(jié)果一致,胸腺內(nèi)注射腦抗原MBP可致免疫耐受,通過免疫耐受途徑可以降低大鼠炎癥反應(yīng)、降低過度的免疫反應(yīng),減少腦細(xì)胞凋亡,進(jìn)而減輕腦水腫,促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)。
[Abstract]:Objective: To establish a model of brain injury (SBI) in rats with SD rats. After the model is established, the antigen ovalbumin (OVA) or the myeloid basic protein (MBP) is injected into the thymus to induce the immune tolerance to treat the secondary brain damage caused by the SBI. Objective To study the effect of intrathymic injection of 鈥渂ystander antigen鈥，

本文編號：2385319