背景:作為骨組織工程的修復(fù)材料,應(yīng)具有良好的生物相容性及降解吸收性,許多學者在此方面也做了較深入的研究,但中藥復(fù)合細胞生物支架的研究較少。目的:參照《醫(yī)療器械生物學評價標準》,對兔骨髓間充質(zhì)干細胞-海螵蛸生物復(fù)合支架進行體外細胞毒性檢測,評估復(fù)合支架的毒性等級,為臨床應(yīng)用生物支架提供實驗依據(jù)。方法:依照ISO標準按"材料面積∶浸提介質(zhì)體積=3-6 cm²:1 mL"制作骨髓間充質(zhì)干細胞-海螵蛸生物復(fù)合支架材料浸提液。制備L-929細胞懸液,將細胞濃度調(diào)整至1×10～7L^-1進行接種培養(yǎng),設(shè)置陽性對照組（含苯酚的DMEM培養(yǎng)液）、實驗組（材料浸提液）、陰性對照組（新鮮DMEM培養(yǎng)液）。培養(yǎng)24,48,72 h采用MTT法檢測L-929細胞吸光度值,計算各組細胞的相對增殖率,評估復(fù)合支架毒性等級。結(jié)果與結(jié)論:實驗組、陰性對照組、陽性對照組吸光度值在不同時間點不完全相同（P=0.000 <0.01）,各時間點內(nèi)比較,實驗組與陰性對照組吸光度值均明顯高于陽性對照組（P<0.01）;兔骨髓間充質(zhì)干細胞-海螵蛸生物支架細胞毒性為1級。結(jié)果說明...

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圖1 骨髓間充質(zhì)干細胞-海螵蛸復(fù)合支架

骨髓間充質(zhì)干細胞復(fù)合海螵蛸支架(課題組前期制備)[10]，見圖1;L-929細胞(貴陽中醫(yī)學院基礎(chǔ)實驗中心)；DMEM培養(yǎng)液(Hyclone公司)；胎牛血清、0.25%胰蛋白酶(Gibco公司)；CO2培養(yǎng)箱(美國AHELDON公司)；苯酚(上海國藥集團)；四甲基偶氮唑鹽(天津S....

圖2 不同時間點各組細胞相對增殖率

課題組將祖國傳統(tǒng)中醫(yī)藥與前沿骨組織工程學相結(jié)合，尋求細胞/中藥支架復(fù)合材料構(gòu)建的可行性，課題組對兔骨髓間充質(zhì)干細胞-海螵蛸復(fù)合支架材料做過系列研究[10,17]，檢測出海螵蛸孔隙率>80%，孔徑>100μm有利于血管、營養(yǎng)物質(zhì)的滲入及新生骨組織的形成，且其內(nèi)部所含的甲殼素成分有利....

本文編號：4033178