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間充質(zhì)源性種子細(xì)胞復(fù)合異體脫細(xì)胞軟骨構(gòu)建軟骨組織的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2024-12-11 22:01
  目的 軟骨缺損一直是臨床工作的一大難題,自體軟骨來源少,異體軟骨吸收明顯,均限制了同種軟骨組織的應(yīng)用,近年組織工程的研究發(fā)展為這一難題的解決帶來了新的機(jī)遇,大量軟骨組織工程的研究,帶動(dòng)了人工軟骨時(shí)代的到來。本實(shí)驗(yàn)體外誘導(dǎo)外周血源性間充質(zhì)干細(xì)胞獲得軟骨種子細(xì)胞,分離異體兔肋軟骨獲取脫細(xì)胞軟骨,兩者共同培養(yǎng)以構(gòu)建新型軟骨組織,為臨床修復(fù)器官缺損及再造提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。 材料與方法 創(chuàng)建新西蘭兔創(chuàng)傷模型,提取兔外周血間充質(zhì)干細(xì)胞,體外行干細(xì)胞原代培養(yǎng)、傳代、凍存、復(fù)蘇及誘導(dǎo)分化成軟骨。體外誘導(dǎo)培養(yǎng)生長(zhǎng)良好的第三代間充質(zhì)干細(xì)胞14d獲得軟骨種子細(xì)胞,顯微鏡下觀察各期細(xì)胞生長(zhǎng)特性及形態(tài)特征,制作種子細(xì)胞爬片行甲苯胺藍(lán)染色、Ⅱ型膠原免疫細(xì)胞化學(xué):聯(lián)合中性去垢劑—酶法獲得同種異體兔肋軟骨脫細(xì)胞支架,制備石蠟切片行HE染色、甲苯胺藍(lán)染色、Ⅱ型膠原免疫細(xì)胞化學(xué),鏡下觀察染色結(jié)果;制備掃描電鏡樣本,掃描電鏡下觀察支架形態(tài)與結(jié)構(gòu)。自體間充質(zhì)源性軟骨種子細(xì)胞與異體脫細(xì)胞軟骨體外復(fù)合培養(yǎng)7d獲得復(fù)合軟骨,將復(fù)合軟骨植入自體實(shí)驗(yàn)兔皮下,根據(jù)植入材料的差異分為A、B、C、D四組(A組:植入異體新鮮軟骨B組:植...

【文章頁數(shù)】:60 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
符號(hào)說明
前言
實(shí)驗(yàn)一 兔外周血間充質(zhì)干細(xì)胞體外分離培養(yǎng)凍存及分化成軟骨特性的實(shí)驗(yàn)研究
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
實(shí)驗(yàn)二 兔肋軟骨脫細(xì)胞基質(zhì)的制備
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
實(shí)驗(yàn)三 間充質(zhì)源性軟骨種子細(xì)胞復(fù)合脫細(xì)胞軟骨構(gòu)建軟骨組織的實(shí)驗(yàn)研究
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
討論
結(jié)論
附圖
參考文獻(xiàn)
致謝
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本文編號(hào):4016345

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