【摘要】：背景:在軟骨組織工程材料中,以透明質(zhì)酸為代表的多聚糖材料因具備良好的材料細(xì)胞作用界面,有利于軟骨細(xì)胞的生長(zhǎng),成為近年來(lái)的研究熱點(diǎn)。目的:探究負(fù)載軟骨細(xì)胞的透明質(zhì)酸可注射材料修復(fù)大鼠軟骨缺損的可行性。方法:取90只SD大鼠,制備軟骨缺損模型,造模后第2天隨機(jī)分3組干預(yù),實(shí)驗(yàn)組關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射負(fù)載軟骨細(xì)胞的透明質(zhì)酸水凝膠,對(duì)照組關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射透明質(zhì)酸水凝膠,空白對(duì)照組不進(jìn)行干預(yù)。注射后1,3,6周取修復(fù)部位軟骨組織,進(jìn)行蘇木精-伊紅染色、Masson染色、掃描電鏡觀察及血紅素氧合酶表達(dá)、膠原水平檢測(cè)。結(jié)果與結(jié)論:①蘇木精-伊紅染色:注射后6周,空白對(duì)照組以肉芽組織填充修復(fù)區(qū);對(duì)照修復(fù)部位被黃白色修復(fù)組織填滿,與正常軟骨邊界明顯,表面不平整,淋巴細(xì)胞較3周時(shí)減少;實(shí)驗(yàn)組修復(fù)組織呈半透明狀,與正常軟骨邊界模糊,淋巴細(xì)胞較3周時(shí)明顯減少;②Masson染色:注射后6周,實(shí)驗(yàn)組修復(fù)區(qū)膠原纖維合成狀況最佳,其次為對(duì)照組,均強(qiáng)于空白對(duì)照組;③掃描電鏡觀察:注射后6周,空白對(duì)照組修復(fù)區(qū)膠原纖維排列不規(guī)則,部分?jǐn)嗔?對(duì)照組修復(fù)區(qū)膠原纖維排列較整齊,仍可見部分?jǐn)嗔?實(shí)驗(yàn)組實(shí)驗(yàn)部位膠原纖維排列整齊,與正常軟骨邊緣分界不明;④血紅素氧合酶表達(dá)與膠原水平:注射后6周,實(shí)驗(yàn)組血紅素氧合酶表達(dá)高于對(duì)照組、空白對(duì)照組(P0.05);實(shí)驗(yàn)組注射后1,3,6周的膠原水平高于對(duì)照組、空白對(duì)照組(P0.05);⑤結(jié)果表明:負(fù)載軟骨細(xì)胞的透明質(zhì)酸可注射材料可促進(jìn)大鼠軟骨缺損的修復(fù)。
【圖文】：

饣質(zhì)跏奔?20±15)min，平均出血量(10±2)mL，90只大鼠中2只因麻醉、1只因術(shù)中操作失誤出現(xiàn)大失血死亡，2只因術(shù)后感染被剔除觀察范圍，均于術(shù)后補(bǔ)充完整。注射后觀察6周，所有存活大鼠傷口愈合情況良好，未出現(xiàn)神經(jīng)損傷、切口裂開等術(shù)后并發(fā)癥。2.2各組光學(xué)顯微鏡下組織學(xué)觀察結(jié)果空白對(duì)照組注射后1周時(shí)修復(fù)部位可見少許肉芽紅色組織，偶見淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)；3周時(shí)組織變白，邊界清晰，淋巴細(xì)胞較前增多；6周時(shí)肉芽組織顯著增加，已填滿修復(fù)部位，淋巴細(xì)胞明顯減少。對(duì)照組注射后1周時(shí)已被白色的再生組織充滿，與正常圖1各組注射后不同時(shí)間點(diǎn)軟骨缺損處病理學(xué)觀察結(jié)果(蘇木精-伊紅染色，×200)Figure1Pathologicalobservationineachgroupatdifferenttimeafterinjection(hematoxylin-eosinstaining,×200)圖注：注射后6周時(shí)，空白對(duì)照組肉芽組織填滿修復(fù)部位，淋巴細(xì)胞較3周時(shí)明顯減少；對(duì)照組修復(fù)部位被黃白色修復(fù)組織填滿，與正常軟骨邊界明顯，表面不平整，淋巴細(xì)胞較3周時(shí)減少；實(shí)驗(yàn)組修復(fù)組織呈半透明狀，與正常軟骨邊界模糊，淋巴細(xì)胞較3周時(shí)明顯減少。圖2各組注射后6周時(shí)軟骨缺損區(qū)Msaaon染色結(jié)果(×200)Figure2Massonstainingresultsat6weeksafterinjectionineachgroup(×200)圖注：圖中A為空白對(duì)照組，膠原纖維合成情況不佳，骨細(xì)胞不成熟；B為對(duì)照組，骨細(xì)胞開始成熟；C為實(shí)驗(yàn)組，成熟骨細(xì)胞較多。圖3各組注射后6周軟骨缺損區(qū)掃描電鏡觀察結(jié)果(×2000)Figure5Scanningelectronmicroscopeobservationofthedefectregionat6weeksafterinjectionineachgroup(×2000)圖注：圖中A為空白對(duì)照組，膠原纖維排列不規(guī)則，部分?jǐn)嗔�；B為對(duì)照組，膠原纖維排列較整齊，仍可見部分?jǐn)嗔�；C為實(shí)驗(yàn)組，膠原纖維排列整齊，與正常軟骨邊緣分界?

唬嘬馨拖赴鉷饗?減少。對(duì)照組注射后1周時(shí)已被白色的再生組織充滿，與正常圖1各組注射后不同時(shí)間點(diǎn)軟骨缺損處病理學(xué)觀察結(jié)果(蘇木精-伊紅染色，×200)Figure1Pathologicalobservationineachgroupatdifferenttimeafterinjection(hematoxylin-eosinstaining,×200)圖注：注射后6周時(shí)，空白對(duì)照組肉芽組織填滿修復(fù)部位，淋巴細(xì)胞較3周時(shí)明顯減少；對(duì)照組修復(fù)部位被黃白色修復(fù)組織填滿，與正常軟骨邊界明顯，表面不平整，淋巴細(xì)胞較3周時(shí)減少；實(shí)驗(yàn)組修復(fù)組織呈半透明狀，與正常軟骨邊界模糊，淋巴細(xì)胞較3周時(shí)明顯減少。圖2各組注射后6周時(shí)軟骨缺損區(qū)Msaaon染色結(jié)果(×200)Figure2Massonstainingresultsat6weeksafterinjectionineachgroup(×200)圖注：圖中A為空白對(duì)照組，膠原纖維合成情況不佳，骨細(xì)胞不成熟；B為對(duì)照組，骨細(xì)胞開始成熟；C為實(shí)驗(yàn)組，成熟骨細(xì)胞較多。圖3各組注射后6周軟骨缺損區(qū)掃描電鏡觀察結(jié)果(×2000)Figure5Scanningelectronmicroscopeobservationofthedefectregionat6weeksafterinjectionineachgroup(×2000)圖注：圖中A為空白對(duì)照組，膠原纖維排列不規(guī)則，部分?jǐn)嗔眩籅為對(duì)照組，膠原纖維排列較整齊，仍可見部分?jǐn)嗔眩籆為實(shí)驗(yàn)組，，膠原纖維排列整齊，與正常軟骨邊緣分界不明。空白對(duì)照組對(duì)照組實(shí)驗(yàn)組注射后1周注射后3周注射后6周ABCABC

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