本文關(guān)鍵詞：心之病絡(luò)孫絡(luò)絀急的中醫(yī)微觀病理特征研究

  更多相關(guān)文章： 心臟 絡(luò)病 孫絡(luò)絀急 微血管痙攣 病理特征

【摘要】：目的建立心之病絡(luò)孫絡(luò)絀急的大鼠模型，并通過研究不同觀察時(shí)間點(diǎn)內(nèi)大鼠整體、器官、組織、細(xì)胞以及分子水平的病理變化，以闡明“孫絡(luò)-微血管”病變之孫絡(luò)絀急的病理演變規(guī)律，為脈絡(luò)病變的臨床微觀辨證用藥提供理論依據(jù)。方法（1）選取雄性SD大鼠30只，隨機(jī)分為空白組，造模5min組、造模10min組、造模20min組以及造模30min組，每組6只。通過股靜脈注射pit的方法建立心之病絡(luò)孫絡(luò)絀急的病理模型。采用激光多普勒技術(shù)檢測(cè)造模前后心肌表面血流量變化，隨后取心肌組織行分別Naga-Olsen染色、電鏡觀察各組大鼠心肌組織病理變化，并檢測(cè)各組心肌組織claudin-5、occludin蛋白表達(dá)。另取雄性SD大鼠6只，檢測(cè)造模前后心肌微血管通透性變化。（2）選取雄性SD大鼠30只，隨機(jī)分為空白組，造模5min組、造模10min組、造模20min組以及造模30min組，每組6只。造模后檢測(cè)血漿ET-1、NO、AngⅡ、TXB2以及6-Keto-PGF1α濃度，并檢測(cè)各組心肌組織iNOS、eNOS、ET-1mRNA表達(dá)。（3）選取雄性SD大鼠30只，隨機(jī)分為空白組，造模5min組、造模10min組、造模20min組以及造模30min組每組6只，造模后采用TUNEL方法檢測(cè)各組大鼠心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)，并檢測(cè)各組微血管新生、凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)。 結(jié)果 1、與空白組比較，模型組大鼠心臟表面血流量在各時(shí)間點(diǎn)均有不同程度的減少（P0.05或P0.01），并且隨著時(shí)間的推移，血流量呈現(xiàn)出逐漸恢復(fù)的趨勢(shì)。Nagar-Olsen染色顯示，造模后10min開始心肌組織可見大片紅染的陽性反應(yīng)區(qū)。缺血表現(xiàn)尤以模型10min組和模型20min組最為明顯。電鏡觀察顯示各模型組微血管內(nèi)皮細(xì)胞間緊密連接清晰致密，微血管內(nèi)皮細(xì)胞核不規(guī)則，染色質(zhì)不均勻、邊集，，呈現(xiàn)明顯凋亡現(xiàn)象。模型各組吞飲小泡數(shù)量明顯增加。造模后10min開始微血管通透性開始增加并持續(xù)至觀察時(shí)間結(jié)束。 2、與空白組比較，各模型組血漿ET-1水平均顯著升高（P0.01），且于5min時(shí)達(dá)到高峰。血漿TXB2在造模5min組顯著升高（P0.01），而在30min組時(shí)其水平明顯下降（P0.05）。血漿6-keto-PGF1α水平在造模10min后開始顯著下降（P0.05或P0.01），并在30min時(shí)達(dá)到低峰（P0.01）。TXB2/6-keto-PGF1α在造模后5min至20min顯著增高（P0.01或P0.05），并于5min時(shí)達(dá)到高峰，而在30min時(shí)恢復(fù)至正常水平。AngⅡ水平在造模后5min內(nèi)并無顯著變化，而在造模后10min開始其水平顯著升高（P0.05），并呈遞增趨勢(shì)，于30min時(shí)達(dá)到高峰（P0.01）。各模型下血清NO濃度表現(xiàn)為不同程度的升高�；虮磉_(dá)方面，iNOS mRNA表達(dá)在造模后5min組、10min組顯著上調(diào)（P0.01），而在造模后30min組時(shí)其表達(dá)顯著下調(diào)（P0.01），而eNOSmRNA在各時(shí)間點(diǎn)表達(dá)均明顯下降（P0.05），ET-1mRNA在各組均有不同程度的升高。 3、空白組大鼠未見明顯陽性凋亡細(xì)胞，各模型組凋亡細(xì)胞數(shù)量明顯增加（P0.05），并且隨缺血時(shí)間延長，凋亡細(xì)胞數(shù)量逐漸升高。與空白組比較，Bax蛋白表達(dá)在造模后20min開始明顯升高（p0.01）。各模型組bcl-2蛋白表達(dá)無明顯變化。p53方面，與空白組比較，模型組大鼠在前20min內(nèi)無明顯變化，而在30min時(shí)顯著增強(qiáng)（p0.05）。與空白組比較，各模型組CD34、VEGF、PDGF、Ang2蛋白表達(dá)均未有明顯變化（p0.05）。 結(jié)論 1.孫絡(luò)絀急病變急性期，心肌表面血流量即可明顯減少。 2.孫絡(luò)絀急病變急性期，心肌表面微血管通透性顯著升高，微血管內(nèi)皮細(xì)胞緊密連接結(jié)構(gòu)完整，緊密連接蛋白表達(dá)未見明顯升高，吞飲小泡數(shù)量顯著增加，提示孫絡(luò)絀急急性期微血管內(nèi)皮細(xì)胞可能通過吞飲小泡的大量釋放來使其通透性發(fā)生改變。 3.孫絡(luò)絀急病變急性期微血管內(nèi)皮細(xì)胞正常調(diào)節(jié)分泌功能紊亂，微血管舒縮因子TXA2、PGI2、ET-1、NO異常分泌、基因異常表達(dá)，動(dòng)態(tài)平衡遭到破壞。孫絡(luò)絀急發(fā)生后RAS系統(tǒng)可被激活并在進(jìn)一步心肌損傷過程中逐漸發(fā)揮重要作用。多種舒縮因子動(dòng)態(tài)變化也提示多種復(fù)雜機(jī)制相互作用共同參與誘導(dǎo)著孫絡(luò)絀急發(fā)生發(fā)展過程。 4.孫絡(luò)絀急病理?xiàng)l件下，機(jī)體可能通過調(diào)節(jié)局部細(xì)胞凋亡相關(guān)因子的表達(dá)啟動(dòng)凋亡程序，促進(jìn)細(xì)胞凋亡。 5.孫絡(luò)絀急急性期觀察時(shí)間內(nèi)未發(fā)現(xiàn)明顯微血管新生現(xiàn)象。
【關(guān)鍵詞】：心臟 絡(luò)病 孫絡(luò)絀急 微血管痙攣 病理特征
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R-332;R259
【目錄】：

• 英文縮略詞表6-7
• 中文摘要7-10
• Abstract10-13
• 前言13-15
• 第一部分 心之病絡(luò)孫絡(luò)絀急模型大鼠心肌表面血流量及通透性變化研究15-26
• 1 材料與方法15-18
• 1.1 動(dòng)物15
• 1.2 試劑與儀器15-16
• 1.3 動(dòng)物分組與造模16
• 1.4 標(biāo)本采集與指標(biāo)檢測(cè)16-18
• 1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理18
• 2 結(jié)果18-22
• 2.1 心臟表面血流量變化18-19
• 2.2 心肌表面微血管通透性檢測(cè)19-20
• 2.3 Naga-Olsen 染色結(jié)果20-21
• 2.4 電鏡結(jié)果21-22
• 2.5 claudin-5 和 occludin 蛋白表達(dá)22
• 3 討論22-26
• 3.1 孫絡(luò)絀急模型的建立22-23
• 3.2 心肌表面血流量變化23-24
• 3.3 心肌表面微血管通透性變化24-26
• 第二部分 心之病絡(luò)孫絡(luò)絀急模型大鼠微血管舒縮因子變化研究26-40
• 1 材料與方法26-32
• 1.1 動(dòng)物26
• 1.2 試劑與儀器26-27
• 1.3 動(dòng)物分組與造模27
• 1.4 標(biāo)本采集與指標(biāo)檢測(cè)27-32
• 2 結(jié)果32-37
• 2.1 血漿 TXB2、6-Keto-PGF1α、AngⅡ濃度變化32-34
• 2.2 血漿 NO、ET-1 濃度變化34-35
• 2.3 心肌組織 iNOS、eNOS、ET-1 mRNA 表達(dá)35-37
• 3 討論37-40
• 第三部分 心之病絡(luò)孫絡(luò)絀急模型大鼠心肌微血管新生與凋亡相關(guān)蛋白變化研究40-51
• 1 材料與方法40-43
• 1.1 動(dòng)物40
• 1.2 試劑與儀器40-41
• 1.3 動(dòng)物分組與造模41
• 1.4 標(biāo)本采集與指標(biāo)檢測(cè)41-43
• 2 結(jié)果43-48
• 2.1 TUNEL 法檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)43-44
• 2.2 微血管凋亡蛋白 Bax、Bcl-2、p53 表達(dá)44-47
• 2.3 微血管新生蛋白 CD34、VEGF、PDGF、Ang2 表達(dá)47-48
• 3 討論48-51
• 3.1 孫絡(luò)絀急病理狀態(tài)下的細(xì)胞凋亡48-49
• 3.2 孫絡(luò)絀急病理狀態(tài)下的微血管新生49-51
• 總結(jié)論51-52
• 參考文獻(xiàn)52-56
• 文獻(xiàn)綜述56-65
• 參考文獻(xiàn)61-65
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文情況65-66
• 致謝66-67

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 李惠娟;;冠狀動(dòng)脈痙攣的相關(guān)研究與臨床診治分析[J];北方藥學(xué);2011年08期

2 曹慶博,張清潭,張玉傳;冠心病患者血漿內(nèi)皮素和前列環(huán)素水平變化及臨床意義[J];濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2002年01期

3 謝娟;王宗仁;王磊;彭麗靜;;芪丹通脈片對(duì)急性心肌缺血大鼠降鈣素基因相關(guān)肽和內(nèi)皮素的影響[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2006年06期

4 馬貴洲;徐榮和;余丹青;蔡志雄;;冠狀動(dòng)脈痙攣臨床研究進(jìn)展[J];廣東醫(yī)學(xué);2009年12期

5 游凱;;過度換氣及輸注Tris-緩沖液誘發(fā)冠狀動(dòng)脈痙攣和變異型心絞痛[J];國外醫(yī)學(xué).心血管疾病分冊(cè);1979年02期

6 龐雪峰;沈劍耀;宗志紅;曾定尹;;通心絡(luò)抑制ET-1誘發(fā)的冠狀動(dòng)脈痙攣?zhàn)饔脵C(jī)制探討[J];山東醫(yī)藥;2009年12期

7 張棟,王淑友,馬惠敏,李順月;激光多普勒血流成像技術(shù)對(duì)針灸效果的觀察[J];上海針灸雜志;2004年05期

8 薛翠芳;趙和平;;降脂益肝沖劑對(duì)非酒精性脂肪肝大鼠血栓素B_2和6-酮-前列腺素Fla的影響[J];山西醫(yī)藥雜志;2009年01期

本文編號(hào)：784165