本文關(guān)鍵詞：移植用小鼠膠質(zhì)前體細(xì)胞的培養(yǎng)及其移植后形態(tài)和功能初探

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【摘要】：目的完善體外分離培養(yǎng)移植用膠質(zhì)前體細(xì)胞的方法,并運(yùn)用雙光子顯微鏡在活體動(dòng)物水平,對(duì)小鼠大腦皮層移植的膠質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行單細(xì)胞水平的在體功能研究。方法體外分離培養(yǎng)小鼠胚胎神經(jīng)干細(xì)胞,并將其誘導(dǎo)為膠質(zhì)前體細(xì)胞及星形膠質(zhì)細(xì)胞。分別用Nestin、A2B5以及GFAP對(duì)體外培養(yǎng)的神經(jīng)干細(xì)胞、膠質(zhì)前體細(xì)胞以及星形膠質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定。體外給予ATP及毒胡蘿卜素(Thapsigargin),對(duì)體外分化的星形膠質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行功能學(xué)鑒定。將以上誘導(dǎo)得到的膠質(zhì)前體細(xì)胞移植入成年小鼠大腦皮層,并在移植12周后對(duì)其進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察。另外,應(yīng)用雙光子活體鈣成像技術(shù),觀察移植膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)ATP刺激的反應(yīng)。結(jié)果 1體外誘導(dǎo)神經(jīng)干細(xì)胞成為膠質(zhì)前體細(xì)胞(A2B5陽性)的比率達(dá)到(87.4±3.4)%,繼續(xù)將其誘導(dǎo)為成熟星形膠質(zhì)細(xì)胞(GFAP陽性)的比率達(dá)到(83.4±3.3)%。2體外誘導(dǎo)而來的星形膠質(zhì)細(xì)胞可對(duì)ATP及毒胡蘿卜素產(chǎn)生鈣反應(yīng)。3移植進(jìn)入成年小鼠皮層的膠質(zhì)前體細(xì)胞,在移植12周后仍可存活,并可分化為成熟的星形膠質(zhì)細(xì)胞。4雙光子活體鈣成像實(shí)驗(yàn)證實(shí),ATP可誘導(dǎo)活體小鼠皮層內(nèi)移植細(xì)胞產(chǎn)生鈣信號(hào)。結(jié)論神經(jīng)干細(xì)胞來源的膠質(zhì)前體細(xì)胞在移植進(jìn)入成年小鼠皮層內(nèi)可分化為成熟星形膠質(zhì)細(xì)胞,并至少存活12周。另外,膠質(zhì)前體細(xì)胞在移植4周后,便可在活體動(dòng)物大腦皮層內(nèi)具備功能活動(dòng)。
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部腦研究中心;第三軍醫(yī)大學(xué)軍事預(yù)防醫(yī)學(xué)院勞動(dòng)衛(wèi)生學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 神經(jīng)干細(xì)胞 膠質(zhì)前體細(xì)胞 星形膠質(zhì)細(xì)胞 鈣信號(hào) 移植
【基金】：國家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金(31400933)~~
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 移植用小鼠膠質(zhì)前體細(xì)胞的培養(yǎng)及其移植后形態(tài)和功能初探楊志奇1,張寬1,馬秦龍2,鄧平2,陳純海2,周舟2,諶小維1(400038重慶,第三軍醫(yī)大學(xué):基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部腦研究中心1,軍事預(yù)防醫(yī)學(xué)院勞動(dòng)衛(wèi)生學(xué)教研室2)星形膠質(zhì)細(xì)胞在腦內(nèi)具有重要的生理功能,除了能夠促進(jìn)血管再生,修復(fù)損傷血腦屏障

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【相似文獻(xiàn)】

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

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本文編號(hào)：689920