本文關(guān)鍵詞：CHO-K1細(xì)胞簇集法檢測(cè)百日咳毒素毒性的優(yōu)化及驗(yàn)證

  更多相關(guān)文章： CHO-K細(xì)胞 百日咳毒素 簇集

【摘要】：目的對(duì)CHO-K1細(xì)胞簇集法檢測(cè)百日咳毒素(pertussis toxin,PT)毒性進(jìn)行優(yōu)化及驗(yàn)證。方法以國(guó)家PT標(biāo)準(zhǔn)品為參考品,將PT標(biāo)準(zhǔn)品倍比稀釋后與CHO-K1細(xì)胞混合培養(yǎng),顯微鏡觀察PT能引起CHO-K1細(xì)胞簇集的程度。對(duì)細(xì)胞濃度、孵育時(shí)間進(jìn)行優(yōu)化,并對(duì)方法的特異性、敏感度、重復(fù)性進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果方法的最佳細(xì)胞濃度為2.5×105個(gè)/ml,最佳孵育時(shí)間為24 h。只有PT活性成分能使CHO-K1細(xì)胞發(fā)生簇集,最低檢測(cè)限為10 pg/ml;2名試驗(yàn)員6次檢測(cè)結(jié)果表明,該方法重復(fù)性良好。結(jié)論 CHO-K1細(xì)胞簇集法可及時(shí)、準(zhǔn)確地檢測(cè)出生產(chǎn)過(guò)程中PT含量,適用于百日咳發(fā)酵過(guò)程監(jiān)測(cè)。
【作者單位】： 浙江衛(wèi)信生物藥業(yè)有限公司;
【關(guān)鍵詞】： CHO-K細(xì)胞 百日咳毒素 簇集
【分類號(hào)】：R378.42
【正文快照】： 百日咳疫苗是通過(guò)培養(yǎng)百日咳桿菌,收集其產(chǎn)生的百日咳毒素(pertussis toxin,PT)、絲狀血凝素(filamentous hemagglutinin,FHA)等有效抗原成分制成的疫苗。在百日咳桿菌發(fā)酵培養(yǎng)過(guò)程中,PT會(huì)隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加而降解,為了獲得較高含量的PT,需通過(guò)快捷、準(zhǔn)確的方法對(duì)PT含量進(jìn)行

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 侯啟明,張路民,梁雅文,秦進(jìn)才;應(yīng)用CHO細(xì)胞法檢測(cè)百日咳疫苗中的殘余毒性[J];中國(guó)生物制品學(xué)雜志;1997年02期

2 劉�？�,肖詹榮,付春暉,郭強(qiáng),葉娟,唐巧英;無(wú)細(xì)胞百日咳疫苗中活性PT的保護(hù)作用[J];中國(guó)生物制品學(xué)雜志;2003年06期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 夏德菊;潘殊男;楊云凱;周第;金蕭;王s，

本文編號(hào)：685431