本文關(guān)鍵詞：云南曼谷并殖吸蟲(chóng)初步調(diào)查及其囊蚴形態(tài)學(xué)觀察和遺傳標(biāo)記分析

  更多相關(guān)文章： 并殖吸蟲(chóng) 曼谷并殖 囊蚴形態(tài) DNA序列 云南省

【摘要】：[目的]對(duì)云南省曼谷并殖吸蟲(chóng)的地理分布、自然界第二中間宿主的種類、適宜的實(shí)驗(yàn)終宿主等進(jìn)行研究,并對(duì)曼谷并殖吸蟲(chóng)的中間宿主種類及感染情況、囊蚴的形態(tài)特征進(jìn)行觀察和描述。應(yīng)用形態(tài)學(xué)分類和DNA序列分析相結(jié)合的方法深入研究曼谷并殖吸蟲(chóng)的蟲(chóng)種獨(dú)立性及其在并殖科吸蟲(chóng)中的分類學(xué)地位；構(gòu)建基因進(jìn)化樹(shù),闡明云南的曼谷并殖吸蟲(chóng)與其他地區(qū)的曼谷并殖吸蟲(chóng)或其它蟲(chóng)種之間的同源性和親緣關(guān)系。 [方法]從云南南部的河口縣、馬關(guān)縣和西南部的滄源縣、保山市、隴川縣、普洱市、景洪市、勐臘縣等8個(gè)地州市的山澗溪流中采集第二中間宿主溪蟹,分離囊蚴,經(jīng)形態(tài)觀察、測(cè)量鑒定后,感染實(shí)驗(yàn)動(dòng)物家貓；試劑盒提取囊蚴DNA,利用ITS2和COI引物經(jīng)PCR體外擴(kuò)增獲得ITS2和COI基因序列,通過(guò)GenBank的Blast軟件同源性比較,使用MEGA5.0軟件構(gòu)建基因進(jìn)化樹(shù)。 [結(jié)果]本研究從云南南部和西南部的8個(gè)地州市的17條溪流中共采獲859只溪蟹,僅在景洪市和勐臘縣兩地的景洪溪蟹體內(nèi)檢獲31個(gè)曼谷并殖吸蟲(chóng)囊蚴,其他6個(gè)地州市均為陰性。景洪市與勐臘縣的曼谷并殖吸蟲(chóng)第二中間宿主—景洪溪蟹的自然感染率分別為2.33%和11.1%；感染度分別為1.2和1.25個(gè)。 囊蚴呈圓形或類圓形,具二層囊壁,外壁薄而脆且易破,內(nèi)壁堅(jiān)韌,內(nèi)外壁之間有寬大的空隙。測(cè)量25個(gè)活體囊蚴,其中有8個(gè)具有外層囊壁,其大小平均為(551.25±29.40)μmx(512.66±33.74)μm,外壁厚度平均為(5.67±1.61)μm；17個(gè)脫去外壁的囊蚴大小平均為(465.64±23.38)μm×(438.84±23.50)μm,內(nèi)壁厚度平均為(9.77±2.80)μm。囊蚴最顯著的特征是后尾蚴在囊腔內(nèi)多蜷曲成“U”形,排泄囊抵達(dá)腸叉后,后尾蚴與內(nèi)層囊壁之間有較大的空隙,蚴體在囊腔內(nèi)活動(dòng)自如。本實(shí)驗(yàn)人工感染2只家貓均未獲得成蟲(chóng)。 云南省景洪市與勐臘縣的曼谷并殖吸蟲(chóng)囊蚴的ITS2和CO1基因序列通過(guò)Blast同源性比較分析表明,其ITS2和COI基因與越南的曼谷并殖吸蟲(chóng)的同源性分別為100%和99%；與泰國(guó)的曼谷并殖吸蟲(chóng)的同源性分別為100%和96%；與泰國(guó)的哈氏并殖吸蟲(chóng)的同源性分別為99%和95%；與越南的哈氏并殖吸蟲(chóng)的同源性分別為98%和94%；與中國(guó)云南是小睪并殖吸蟲(chóng)的同源性分別為98%和93%。ITS2基因進(jìn)化樹(shù)顯示,本研究的曼谷并殖吸蟲(chóng)與已報(bào)道的越南、泰國(guó)和云南的曼谷并殖吸蟲(chóng),越南、泰國(guó)的哈氏并殖吸蟲(chóng),云南的小睪并殖吸蟲(chóng)以100%的置信度構(gòu)成一大支,獨(dú)立于其他蟲(chóng)種之外。COI基因進(jìn)化樹(shù)顯示,本研究的曼谷并殖吸蟲(chóng)與越南和云南的曼谷并殖吸蟲(chóng)均先以65%的置信度聚為兩支,再以99%的置信度聚為一支,此支又與泰國(guó)的曼谷并殖吸蟲(chóng)以93%的置信度聚為成一支。 [結(jié)論]本研究獲得的并殖吸蟲(chóng)囊蚴形態(tài),與萬(wàn)雅芳等2011年自勐臘縣報(bào)道的曼谷并殖吸蟲(chóng)囊蚴形態(tài)、以及其他地區(qū)報(bào)道的曼谷并殖吸蟲(chóng)囊蚴形態(tài)一致,符合曼谷并殖吸蟲(chóng)囊蚴的形態(tài)學(xué)特征。首次證實(shí)景洪市也是曼谷并殖吸蟲(chóng)的分布區(qū),但其第二中間宿主的感染率遠(yuǎn)低于勐臘縣；景洪溪蟹是云南曼谷并殖吸蟲(chóng)的第二中間宿主；家貓對(duì)曼谷并殖吸蟲(chóng)的易感性差,可能不是其適宜的實(shí)驗(yàn)終宿主。DNA序列分析顯示,本研究的曼谷并殖吸蟲(chóng)與已報(bào)道的云南、越南和泰國(guó)的曼谷并殖吸蟲(chóng)同源性極高,為同一蟲(chóng)種；與越南、泰國(guó)的哈氏并殖吸蟲(chóng)和云南的小睪并殖吸蟲(chóng)的親緣關(guān)系較近,為近緣蟲(chóng)種。
【關(guān)鍵詞】：并殖吸蟲(chóng) 曼谷并殖 囊蚴形態(tài) DNA序列 云南省
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R383.23
【目錄】：

• 目錄5-6
• 摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 引言11-12
• 材料與方法12-17
• 結(jié)果17-44
• 討論44-51
• 結(jié)論51-52
• 參考文獻(xiàn)52-56
• 綜述56-63
• 參考文獻(xiàn)61-63
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況63-64
• 致謝64

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：669113