本文關(guān)鍵詞：人紅細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白與硫氧還蛋白過(guò)氧化物酶2的相互作用

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【摘要】：目的研究人紅細(xì)胞內(nèi)硫氧還蛋白過(guò)氧化物酶2(Prx2)與血紅蛋白(Hb)的相互作用。方法首先利用紅細(xì)胞Hb再釋放試驗(yàn)分離紅細(xì)胞和溶血液電泳釋放的4個(gè)區(qū)帶,即Hb A、Hb A2、Hb A與Hb A2之間(Hb A-A2)及再釋放Hb,將這些區(qū)帶分別切下,通過(guò)反復(fù)凍融獲得各區(qū)帶所含蛋白;用葡聚糖G-25濃縮后再利用SDS-PAGE分離各區(qū)帶所含蛋白組分,并用抗-Prx2做免疫印跡分析;最后用微量熱泳動(dòng)試驗(yàn)(MST)分別檢測(cè)Prx2蛋白與Hb A和Hb A2之間的結(jié)合常數(shù)。結(jié)果紅細(xì)胞電泳釋放的區(qū)帶Hb A、Hb A2、Hb A-A2及再釋放Hb中均有Prx2;而溶血液電泳釋放的Hb區(qū)帶中,除Hb A2外其余各Hb區(qū)帶中均有Prx2。MST檢測(cè)顯示,Prx2蛋白與Hb A的結(jié)合常數(shù)(Kd值)為(14±1.08)μmol/L,而與Hb A2之間的Kd值未被檢測(cè)到。結(jié)論 Prx2與Hb A之間存在相互作用,但與Hb A2之間可能沒(méi)有相互作用。
【作者單位】： 包頭醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室;包頭醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【關(guān)鍵詞】： 紅細(xì)胞 血紅蛋白 Hb A Hb A 硫氧還蛋白過(guò)氧化物酶 Hb再釋放試驗(yàn) SDS-PAGE 微量熱泳動(dòng)
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81160214) 內(nèi)蒙古自然科學(xué)基金(2010BS1101) 內(nèi)蒙古自治區(qū)衛(wèi)生廳基金(2010056) 內(nèi)蒙古自治區(qū)研究生教育創(chuàng)新項(xiàng)目(S201310127(Y02)、S201410127(Y01))
【分類號(hào)】：R3411
【正文快照】： 紅細(xì)胞血紅蛋白釋放試驗(yàn)(hemoglobin release test,HRT)是我們建立的利用淀粉-瓊脂糖混合凝膠電泳觀察完整紅細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白(Hb)電泳釋放的1種方法[1]。HRT可分為“初釋放”(initial release):1次通電電泳后從紅細(xì)胞釋放出Hb;“再釋放”(re-release):電泳過(guò)程中斷電-再通電后

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本文編號(hào)：668983