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原代乳鼠心肌細(xì)胞分離培養(yǎng)的改進(jìn)

發(fā)布時(shí)間:2017-06-08 03:13

  本文關(guān)鍵詞:原代乳鼠心肌細(xì)胞分離培養(yǎng)的改進(jìn),由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的探討提高細(xì)胞純度、存活率及活性的乳鼠心肌分離培養(yǎng)方法。方法改進(jìn)心臟組織的處理方法,用胰酶預(yù)處理后再用II型膠原酶依次處理心肌組織,采用差速貼壁及化學(xué)藥物純化心肌細(xì)胞。結(jié)果提取的單個(gè)心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整,呈類圓形;12 h時(shí)大部分細(xì)胞貼壁;24 h后幾乎全部貼壁,僅見少量漂浮細(xì)胞,貼壁細(xì)胞伸出偽足,呈梭形、三角形等,細(xì)胞出現(xiàn)自主搏動(dòng)。48 h后心肌細(xì)胞偽足間形成聯(lián)接,交織成網(wǎng)狀,局部心肌細(xì)胞出現(xiàn)同步搏動(dòng)。3 d后心肌細(xì)胞聚集成簇,呈島嶼樣搏動(dòng)。心肌細(xì)胞存活率為96.6%,純度96%。結(jié)論此改進(jìn)方法所提取培養(yǎng)的乳鼠心肌細(xì)胞存活率及純度高,細(xì)胞活性好,結(jié)構(gòu)功能完整,可用于相關(guān)實(shí)驗(yàn)中原代乳鼠心肌細(xì)胞的分離培養(yǎng)。
【作者單位】: 新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院心臟中心;
【關(guān)鍵詞】心肌細(xì)胞 原代培養(yǎng) 新生大鼠
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(81060021)
【分類號(hào)】:R329.2
【正文快照】: 乳鼠心肌細(xì)胞常被用作體外實(shí)驗(yàn)研究模型,用于心血管病的基礎(chǔ)研究。雖然早在1960年,Harary等[1]已提出原代乳鼠心肌細(xì)胞分離培養(yǎng)方法,但由于這一傳統(tǒng)方法所分離的心肌細(xì)胞存活率及純度低、細(xì)胞活性差等原因,尚不能滿足于基礎(chǔ)研究的需求。目前所報(bào)道的培養(yǎng)方法大多基于傳統(tǒng)方法

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